国家自然科学基金(30572114)
- 作品数：9 被引量：28H指数：4
- 相关作者：张浩李航宇孔凡民董明李昱骥更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省博士科研启动基金更多>>
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- 三氧化二砷在诱导非小细胞肺癌NCI-H157细胞凋亡过程中对Survivin基因表达Caspase-3的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:研究三氧化二砷(As2O3)在诱导非小细胞肺癌NCI-H157凋亡过程中对Survivin基因表达及Caspase-3的影响,探讨As2O3诱导肿瘤细胞凋亡的作用机理研究。方法:首先对NCI-H157细胞培养和增殖测定,然后采用RT-PCR法检测Survivin mRNA表达;Western Blot检测Survivin及Caspase-3蛋白。结果:RT-PCR结果显示,10μmol/L As2O3作用于NCI-H157细胞12h,24h,48h同对照组相比,Survivin mRNA表达分别降至85.7%,59.4%,22.5%,处理72h后几乎检测不到Survivin mRNA的表达。Western Blot解析结果显示,Survivin蛋白表达在5μmol/L As2O3处理后分别下调至75.2%(12h),54.3%(24h),37.5%(48h)及20.3%(72h)。分别用不同浓度的As2O35～20μmol/L作用NCI-H157细胞24h,Survivin蛋白表达随着As2O3浓度的增加逐渐下降。As2O3作用12h之内只能检测到非激活状态32KD的proCaspase-3,处理24h后出现17KD的活性亚基,直至72h。结论:As2O3以时间、剂量依赖的方式抑制NCI-H157细胞增殖,诱导细胞凋亡过程中下调Survivin mRNA及蛋白表达,并活化Caspases-3,提示As2O3诱导的NCI-H157细胞凋亡机制可能与下调Survivin基因表达及激活Caspase-3活性有关。
- 鞠培新石文君
- 关键词：AS2O3SURVIVINCASPASE-3
- 胰腺癌组织中程序性细胞死亡因子4与细胞色素C的关系
- 2009年
- 目的研究胰腺癌组织中程序性细胞死亡因子4（PDCD4）与细胞色素C（Cyt c）表达的关系，探讨PDCD4诱导胰腺癌细胞凋亡的途径。方法收集1990年至2002年中国医科大学附属一院69例手术切除的胰腺癌标本，采用免疫组织化学方法检测胰腺癌石蜡标本中Cyt c的表达，同时采用Western blot方法检测其中8例冷冻保存的新鲜胰腺癌及正常胰腺组织中Cytc的表达情况，结合前期PDCD4在胰腺癌组织中的表达结果采用配对t检验和χ^2检验进行分析。结果同正常胰腺组织比较，胰腺癌组织Cytc表达明显下降。69例胰腺癌组织中，28例（41％）患者Cytc呈阳性表达；41例（59％）患者Cytc呈阴性表达。PDCD4蛋白呈阳性表达的患者中Cytc亦多呈阳性表达；Cytc蛋白呈阴性表达患者中PDCD4表达多呈阴性，两者表达有关（χ^2=10．52，P〈0．05）。结论胰腺癌组织中PDCD4和Cytc表达密切相关，PDCD4可能通过线粒体途径引起Cytc释放，启动凋亡程序，诱导细胞凋亡。
- 马刚王鸿鹄张浩董明宋少伟尾崎岩太松桥幸子郭克建
- 关键词：胰腺肿瘤程序性细胞死亡因子4细胞色素C
- HGF下调Skp2表达抑制人肝癌细胞增殖的实验研究
- 2009年
- 目的探讨肝细胞生长因子(HGF)对人肝癌细胞增殖的作用及其机制。方法人肝癌细胞株HepG2用于实验。通过BrdU细胞增殖酶联免疫实验观察HGF对细胞增殖的作用,采用Western印迹和RT-PCR法检测HGF对S期激酶结合蛋白2(Skp2)表达的影响。将Skp2真核细胞重组表达质粒转染HepG2细胞并获得稳定转染的过表达Skp2的HepG2细胞,观察HGF对该转染细胞增殖的影响。结果HGF对HepG2细胞的增殖具有浓度依赖性和时间依赖性的抑制作用;HGF明显抑制HepG2细胞表达Skp2蛋白和mRNA。但HGF对过表达Skp2的HepG2细胞无增殖抑制作用。结论HGF对HepG2细胞具有明显的增殖抑制作用,其作用机制与下调Skp2表达密切相关。
- 贺亮刘冰阳丁宏丁奎张浩
- 关键词：肝细胞生长因子SKP2细胞增殖
- 三氧化二砷诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的机制研究(英文)
- 2008年
- 目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的作用及机制。方法:采用MTT法观察不同浓度的As2O3对人类肝癌细胞株HepG2细胞生长的抑制作用;以流式细胞术观察细胞的凋亡率;以Western blot法检测JNK、p-JNK、Caspase-3及PARP蛋白在As2O3作用下及SP600125阻断JNK信号转导通路情况下的表达。结果:As2O3均对体外生长的肝癌细胞HepG2具有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡。Western Bloting结果显示,As2O3诱导肝癌细胞HepG2凋亡伴随着Caspase-3和PARP的活化:As2O3作用于HepG2细胞10min后p-JNK蛋白表达开始增加,20分钟达到高峰,30分钟开始减少,总JNK蛋白的含量无明显改变,JNK的激活早于细胞凋亡;用SP600125预处理HepG2细胞株后,可以明显减少Caspase-3和PARP的活化。结论:As2O3可以体外通过诱导细胞凋亡抑制肝癌细胞株HepG2的增殖,细胞凋亡通过Caspase-3途径实现。JNK信号转导通路参与了As2O3诱导的HepG2凋亡反应,并位于Caspase-3的上游。
- 李航宇鞠培新钟鑫平
- 关键词：三氧化砷肝癌病理机制
- 多西紫杉醇诱导人肝癌细胞凋亡及其机制的研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨多西紫杉醇（docetaxel，DTX）对人肝癌细胞诱导凋亡的作用及其机制。方法人肝癌细胞株HepG2和Huh7用于实验。通过WST-1细胞增殖实验观察DTX对细胞生长的抑制作用，采用Hoechst33342荧光染色和DNA凝胶电泳检测细胞的凋亡情况，采用Western印迹法检测DTX对Caspase-3和Caspase-9酶原的激活作用。结果DTX对HepG2和Huh7的生长有明显的抑制作用；经Hoechst33342荧光染色和DNA凝胶电泳检测发现DTX可诱导HepG2和Huh7细胞凋亡；在DTX诱导肝癌细胞凋亡的过程中，凋亡效应分子Caspase-3和Caspase-9酶原被剪切激活；Caspase-3抑制剂Z-VAD-FMK抑制DTX诱导的肝癌细胞凋亡。结论DTX对肝癌细胞具有较强的增殖抑制作用，凋亡是其抑瘤的机制之一。DTX导致肝癌细胞凋亡程序依赖于激活Caspase-3酶原途径。
- 张浩刘小方李昱骥周建平孔凡民董明
- 关键词：肝细胞多西紫杉醇细胞凋亡
- HGF抑制人肝癌细胞增殖作用的实验研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨肝细胞生长因子(HGF)对人肝癌细胞增殖的作用及其机制。方法通过溴脱氧尿核苷(BrdU)细胞增殖酶联免疫实验观察HGF对人肝癌细胞株HepG2细胞的增殖作用,采用Western印迹和RT-PCR法检测p27、p21和p18基因的表达。将反义p27表达质粒转染HepG2细胞获得稳定转染的p27低表达HepG2细胞,观察HGF对该转染细胞增殖的影响。结果HGF对HepG2细胞的增殖具有浓度依赖性和时间依赖性抑制作用,HGF明显促进HepG2细胞p27蛋白和mRNA表达,但对p21和p18的表达则无影响。HGF对反义p27稳定转染的HepG2细胞无增殖抑制作用。结论HGF对HepG2细胞具有明显的增殖抑制作用,其作用机制与上调p27表达密切相关。
- 贺亮刘冰阳丁奎丁宏张浩张健辛世杰
- 关键词：肝细胞癌肝细胞生长因子P27基因
- LPS对HepG-2细胞因子表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨LPS对HepG-2细胞TGF-β1，VEGF，IL-6表达的影响。方法用LPS刺激HepG-2细胞，RT—PCR和Western-blot方法检测TGF131，VEGF，IL-6基因的转录和蛋白的表达的情况，同时用HTA125阻断TLR4受体检测LPS对HepG-2细胞TGF-β1，VEGF，IL-6基因的转录和蛋白的表达的情况。结果LPS刺激细胞后可以促进TGF-β1、VEGF、IL-6基因的转录和蛋白的表达增加，抑制TLR4受体后LPS对细胞TGF-β1、VEGF、IL-6表达影响下降。结论LPS可以通过TLR4受体来促进HepG2细胞分泌TGF-β1、VEGF、IL-6。
- 隋春阳李航宇胡勇孔凡民宗志红郭仁宣张浩
- 关键词：HEPG-2LPSPCRWESTERN-BLOT
- 三氧化二砷诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的机制研究被引量：12
- 2008年
- 目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的作用机制。方法:采用MTT法观察不同浓度的As2O3对人类肝癌细胞株HepG2生长的抑制作用;以流式细胞术观察细胞的凋亡率;以Westernblot法检测JNK、p-JNK、Caspase-3及PARP蛋白在As2O3作用下及SP600125阻断JNK信号转导通路情况下的表达。结果:As2O3对体外生长的肝癌细胞HepG2具有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡。Westernblot结果显示,As2O3诱导肝癌细胞HepG2凋亡伴随着Caspase-3和PARP的活化;AS2O3作用于HepG2细胞10min后p-JNK蛋白表达开始增加,20min达到高峰,30min开始减少,总JNK蛋白的含量无明显改变,JNK的激活早于细胞凋亡;用SP600125预处理HepG2细胞株后,可以明显减少Caspase-3和PARP的活化。结论:As2O3通过诱导细胞凋亡抑制肝癌细胞株HepG2的增殖,细胞凋亡通过Caspase-3途径实现。JNK信号转导通路参与了As2O3诱导的HepG2凋亡反应,并位于Cas-pase-3的上游。
- 李航宇鞠培新钟鑫平刘金钢
- 关键词：三氧化二砷肝癌MTT法WESTERNBLOT法
- β_1整合素过表达抑制顺铂诱导肝癌细胞凋亡的实验研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨β1整合素过表达对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响及其机制。方法功能性β1整合素稳定过表达Hep3B细胞系用于实验。采用WST-1细胞增殖实验试剂盒检测细胞增殖,DNA梯形条带和Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡。结果与亲株、空载体转染Hep3B细胞相比,β1整合素过表达明显抑制顺铂诱导的肝癌细胞凋亡。细胞外信号调节激酶(ERK)抑制物PD98059和p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制物SB203580能够明显减弱β1整合素对细胞凋亡的保护作用,但Jun激酶抑制物SP600125不能减弱β1整合素的保护作用。结论β1整合素能够通过ERK和p38MAPK信号通路抵抗顺铂诱导的肝癌细胞凋亡。β1整合素介导的细胞外基质信号与肝细胞肝癌化疗耐药有关。
- 李昱骥张浩周建平孔凡民董晓申董明
- 关键词：肝细胞肝癌整合素凋亡蛋白激酶
