重庆市自然科学基金(CSTC2007BB5004)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：杨澜赵清舒为群常晓松胡冉更多>>
- 相关机构：第三军医大学泸州医学院广州军区武汉总医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 耐辐射奇球菌RecR和SSB蛋白的克隆表达及抗紫外功能被引量：1
- 2010年
- RecR和SSB蛋白是耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans)同源重组修复RecFOR途径的关键蛋白.以耐辐射奇球菌基因组为模板,PCR扩增recR和ssb基因片段,以质粒pET32a(+)为载体,构建重组质粒pET32a(+)-recR和pET32a(+)-ssb,并转化到Escherichia coli BL21(DE3)中,IPTG诱导蛋白表达,表达产物采用SDS-PAGE鉴定,同时,应用平板菌落计数法检测紫外辐照前后各组细菌生存率变化,研究RecR和SSB蛋白在E.coli BL21(DE3)抗紫外线辐射中的作用.结果表明,RecR和SSB能够克隆至pET32a(+)载体并在E.coli BL21(DE3)中诱导表达.紫外辐照生存率实验结果提示,RecR和SSB蛋白能增强E.coli BL21(DE3)对紫外线辐射的抵抗能力.RecR和SSB的成功表达及紫外抗性特点将为耐辐射奇球菌超强耐辐射机制的研究提供实验基础.
- 常晓松杨澜付文娟赵清胡冉陈济安舒为群
- 关键词：SSB基因克隆耐辐射奇球菌
- 耐辐射奇球菌recF和recO基因的克隆表达与功能验证
- 2009年
- 目的构建耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans,Dr)recF和recO基因的原核表达重组子并在E.coliBL21(DE3)中表达,检测RecO和RecF蛋白能否提高E.coliBL21(DE3)对紫外线辐射的抵抗能力。方法采用PCR扩增Dr菌基因组中recF和recO基因片段,以质粒pET30b(+)为基础,构建重组质粒pET30b(+)-recF和pET30b(+)-recO,并转化到E.coliBL21(DE3)中,IPTG诱导重组RecF和RecO蛋白表达,表达产物采用SDS-PAGE鉴定;计算紫外辐照前后各组细菌生存率变化。结果构建了pET30b(+)-recF和pET30b(+)-recO重组载体,经IPTG诱导后能在E.coliBL21(DE3)中表达RecF和RecO蛋白。结论构建了原核表达重组质粒pET30b(+)-recF和pET30b(+)-recO,实现RecF和RecO在原核细胞中的表达,体外实验证明RecO和RecF蛋白能提高E.coliBL21(DE3)对紫外线辐射的抵抗能力。
- 杨澜常晓松付文娟舒为群赵清
- 关键词：基因克隆耐辐射奇球菌
- 转染抗辐射菌recO基因对紫外线所致皮肤成纤维细胞氧化及炎性损伤的保护作用被引量：2
- 2009年
- 背景与目的：观察转染recO基因对紫外线（UVB）诱导的人皮肤成纤维细胞（HSF）抗氧化能力及某些炎性因子分泌的影响。材料与方法：从抗辐射菌（deinococcus radiodurans,Dr）中克隆recO基因连接到pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO载体上并转染HSF细胞,recO转染组分别以0、30、90、120mJ/cm2的紫外线（UVB）进行照射,同时设未转染空白组及转染空质粒组2个对照。检测各组受试细胞总超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的变化。结果：UVB照射24h后,未转染空白组和转染空质粒组总SOD活性水平随UVB照射剂量的增加而下降,MDA、LDH、IL-6及TNF-α含量则随照射剂量的增加而增加,而转染recO组细胞在接受与对照组同等剂量的UVB照射后,SOD分泌增加,IL-6分泌减少,在30~120mJ/cm2剂量范围内与2个对照组相比差异均具有统计学意义（P均〈0.05）,而MDA、LDH及TNF-α水平变化不明显（P〉0.05）。结论：转染recO基因对UVB照射引起的HSF细胞氧化及某些炎性损伤具有一定的保护作用。
- 杨澜赵清韩知峡邱志群常晓松陈济安许川胡冉舒为群
- 关键词：UVB皮肤成纤维细胞
