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河南省科技攻关计划(112102310064)
作品数:
4
被引量:4
H指数:2
相关作者:
于庆凯
张明智
陈奎生
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作者
4篇
张明智
4篇
于庆凯
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陈奎生
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2014
1篇
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细胞周期检测点激酶1小干扰RNA干扰表达载体体内对顺铂诱导的食管癌移植瘤细胞生长、凋亡的影响
2014年
目的构建裸鼠食管癌移植瘤模型,观察细胞周期检测点激酶1(Chkl)小干扰RNA(siRNA)干扰表达载体对顺铂诱导的食管癌移植瘤细胞生物学行为的影响。方法分组饲养荷瘤裸鼠。A组:对照组,瘤体注射无菌生理盐水;B组:瘤体注射ChklsiRNA2加浓度为(5mg/kg)的顺铂;C组:瘤体注射顺铂(5mg/kg)。观察各组移植瘤的生长;采用免疫组织化学、原位杂交方法检测各组移植瘤组织中Chkl蛋白和mRNA的表达;运用原位缺口末端标记(TUNEL)检测各组细胞凋广。结果B组[(279.11±27.23)mm^3]移植瘤体积明显小于C组[(512.41±35.18)mm^3]及A组[(907.82±58.09)mm^3],组问两两比较差异均有统计学意义(P〈0.01);B组移植瘤组织中Chkl蛋白(26.87±5.31)及mRNA(45.29±6.47)表达明碌低于C组(蛋白:56.80±7.00;mRNA:87.51±8.38)及A组(蛋白:98.23±15.67;mRNA:187.23±18.55),组间两两比较差异均有统计学意义(P〈0.05);B组细胞中凋亡指数[(21.03±1.35)%]明显高于c组[(12.41±1.23)%]及A组[(1.34±O.12)%],组问两两比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论沉默Chkl表达,可体内增强顺铂对裸鼠食管癌移植瘤生长抑制,诱导移植瘤细胞凋亡的效应。
孙森淼
孙玉生
张明智
张威
于庆凯
陈奎生
关键词:
食管鳞癌
顺铂
裸鼠移植瘤
细胞周期检测点激酶1小干扰RNA对顺铂抑制人食管癌EC9706细胞增殖、诱导其凋亡的影响
被引量:2
2013年
目的构建pSilencer3.1.细胞周期检测点激酶1(Chkl)小干扰RNA(siRNA)重组载体,观察其对顺铂抑制食管癌EC9706细胞增殖及诱导其凋亡的影响。方法根据Chkl基因序列,设计合成3条ChklsiRNA片段,构建3个pSilencer3.1.ChklsiRNA重组载体,转染人食管鳞癌EC9706,采用实时定量聚合酶链反应(Real—timePCR)检测细胞中ChklmRNA的表达,Westernblot检测Chkl蛋白的表达,选择抑制Chkl表达最强的pSilencer3.1-ChklsiRNA转染EC970624h后,再应用浓度为10μmol/L的顺铂处理EC9706细胞12h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,原位末端转移酶标记(TUNEL)法及流式细胞术检测各组细胞凋亡,同时设顺铂单独处理组和正常对照组。结果pSilencer3.1-ChklsiRNA转染食管癌EC9706细胞,人食管癌EC9706细胞中ChklmRNA及蛋白(siRNAl:1.828±0.077,siRNA2:1.801±0.072,siRNA3:1.833±0.079,未处理的EC9706细胞2.793±0.086,对照siRNA组2.724±0.084)的表达均减弱,且差异均有统计学意义(P〈0.05),并增强顺铂对人食管癌EC9706细胞增殖的抑制作用[ChklsiRNA+顺铂组、顺铂组及正常对照组细胞生长抑制率分别为(24.67±0.54)%、(13.56±0.28)%及(1.93±0.12)%]及对细胞凋亡指数[ChklsiRNA+顺铂组、顺铂组及正常对照组分别为(11.76±1.02)%、(19.97±1.23)%及(3.76±0.54)%]的诱导作用(P〈0.05)。结论成功构建的pSilencer3.1一ChklsiRNA重组载体,其可能通过抑制Chkl基因的表达,增强顺铂抗肿瘤的敏感性。
孙淼淼
马怡晖
陈奎生
张明智
于庆凯
关键词:
食管鳞癌
RNA干扰
顺铂
增殖
细胞周期检测点激酶1在食管鳞癌组织中的表达及其意义
被引量:2
2014年
目的探讨细胞周期检测点激酶1(Chk1)在食管鳞癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学、原位杂交技术分别检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中Chk1蛋白及mRNA的表达,探讨Chk1表达与食管鳞状细胞癌发生发展及浸润转移之间的关系。结果正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中,Chk1蛋白的阳性表达率分别为14.5%、38.7%和88.7%,三者间两两比较差异均有统计学意义(P〈0.05);其mRNA表达水平亦依次升高,分别为82.3%、35.5%和8.1%,3组间比较差异有统计学意义(P〈0.05);深层浸润组食管鳞癌组织中Chk1的表达(蛋白:94.5%,mRNA:85.5%)均显著高于浅层浸润组(蛋白:42.9%,mRNA:57.1%),两组比较差异有统计学意义(P〈0.05);有淋巴结转移组的食管鳞癌组织中Chk1的表达(蛋白:100.0%,mRNA:95.0%)显著高于无淋巴结转移组(蛋白:83.3%,mRNA:76.2%),两组比较差异有统计学意义(P〈0.05);随着食管鳞癌分化级别的升高,鳞癌组织中Chk1蛋白、mRNA的表达依次升高,组间两两比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论Chk1蛋白及mRNA表达与食管鳞癌发生发展及浸润转移有关。
孙森淼
孙玉生
赵志华
张明智
张威
于庆凯
陈奎生
关键词:
食管鳞癌
Chk1表达与食管鳞癌浸润转移的关系
2014年
目的探讨Chk1表达与食管鳞癌浸润转移的关系。方法采用Western Blot、RT-PCR技术分别检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中Chk1蛋白及mRNA的表达,探讨Chk1表达与食管鳞状细胞癌浸润转移之间的关系。结果正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织以及食管鳞癌组织中,Chk1蛋白、mRNA的表达水平依次升高,三者间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);深层浸润组食管鳞癌组织中Chk1蛋白、mRNA的表达水平均显著高于浅层浸润组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移组的食管鳞癌组织中Chk1蛋白、mRNA的表达水平显著高于无淋巴结转移组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Chk1高表达与食管鳞癌浸润转移有关。
孙淼淼
冯稳
于庆凯
张明智
关键词:
食管鳞癌
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