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生物芯片技术在血栓研究中的应用被引量：1: 2011年; 基因多态性是促进血管性疾病发生和发展的重要因素之一。血栓是血管性疾病的一种,其形成和发生是由多种遗传和环境因素共同作用的结果。通过生物芯片技术,对血栓相关基因的表达及调控网络进行研究,为进一步探讨血栓形成机制提供了新思路。本综述总结和分析了近年来生物芯片技术在血栓研究领域的应用科研成果,并对生物芯片技术在这一领域的应用前景进行了展望。; 郝建秀张春明王沂王德芝; 关键词：生物芯片血栓基因多态性血管性疾病

心肌肌钙蛋白I(cTnI)合成肽制备、鉴定及抗体研究被引量：2: 2013年; 目的制备人心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)合成肽并鉴定其质量。方法根据人cTnI氨基酸序列,结合计算机软件分析,预测cTnI分子的亲水性、抗原性和同源性,采用固相多肽合成法合成了cTnI分子98～110位氨基酸肽段序列(13肽,RQLHARVDKVDEE)。经与载体蛋白KLH偶联作为免疫原制备抗cTnI-KLH抗体,用间接ELISA方法鉴定其免疫原性。结果采用多肽合成法合成的cTnI合成多肽(13肽),经HPLC纯化后,以其制备的cTnI-KLH纯度达到95%。免疫学实验证实,制备的抗体效价达到1∶100 000。结论本研究制备的肽段连接物具有较强的免疫原性,并与生物提取人cTnI具有较好的交叉反应性。cTnI合成肽的研制为临床cTnI检测试剂的国产化奠定了基础。; 王德芝周则卫刘鉴峰徐文清郝建秀杨福军张春明; 关键词：抗体

噬菌体展示技术在血液肿瘤诊断治疗中的应用被引量：1: 2012年; 血液肿瘤即造血系统的恶性肿瘤,是一种严重危害公共健康的疾病。目前,血液肿瘤诊断治疗的最理想方法就是分子特异性诊断和靶向治疗,但该方法面临的最大困难就是分子靶点的选择。噬菌体展示技术是近十年发展起来的一种新的生物学技术,具有高通量筛选、模拟天然表位、易于纯化、将蛋白功能与编码基因相统一等优点,广泛应用于功能性蛋白质和多肽的筛选、蛋白质间的识别与相互作用、抗原表位的鉴定、基因工程抗体的筛选等多个分子生物学领域,非常适于理想靶点的选择。目前,噬菌体文库技术在血液肿瘤诊治中的应用主要集中在噬菌体抗体文库和噬菌体随机肽库上。本文就噬菌体展示技术在血液肿瘤诊断治疗中的研究成果做一总结分析,并对该技术在这一领域的应用前景进行展望。; 王沂张春明郝建秀宋娜玲刘金剑贺欣刘鉴峰王德芝; 关键词：噬菌体展示血液肿瘤

抗人纤维蛋白噬菌体单链抗体库的构建和鉴定被引量：1: 2012年; 目的应用噬菌体展示技术构建抗人纤维蛋白单链抗体(scFv)文库,筛选高亲和力抗人纤维蛋白scFv并进行鉴定。方法利用人纤维蛋白免疫小鼠,分别扩增小鼠VH和VL基因,经重叠延伸聚合酶链反应(PCR)将VH和VL基因拼接成scFv基因,SfiⅠ/NotⅠ双酶切克隆入pCANTAB 5E噬菌粒载体,转化E.coli TG1构建成库,采用人纤维蛋白原对抗体库进行负筛选,人纤维蛋白进行正筛选,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测阳性克隆的抗原特异性并进行测序分析。结果构建了库容为8.7×106的抗人纤维蛋白scFv库,ELISA测定显示scFv具有较高的抗原特异性;抗人纤维蛋白scFv基因序列长732 bp,编码244个氨基酸,VH和VL基因均有明确的3个互补决定区和4个骨架区。结论成功构建了抗人纤维蛋白scFv文库,并筛选到高亲和力的抗人纤维蛋白scFv,为新型血栓显像剂的开发奠定了实验基础。; 王沂张春明王洋郝建秀宋娜玲刘金剑贺欣刘鉴峰闫玉军王德芝; 关键词：纤维蛋白噬菌体抗体库单链抗体

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天津市自然科学基金(10JCYBJC09900)