国家高技术研究发展计划(2007AA02Z125)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：钟江张琦戴支凯黄大林李彬彬更多>>
- 相关机构：复旦大学桂林医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一株在HA831中复制并能提高绿色荧光蛋白表达水平的AcMNPV突变体的初步研究
- 2009年
- 棉铃虫卵巢细胞系HA831是一株对AcMNPV不敏感的细胞系.用AcMNPV突变体库中分离到的病毒突变体感染HA831细胞时,得到了一株绿色荧光蛋白基因表达水平明显提高的AcMNPV突变体.分析该突变体基因组,发现其orf18基因被Tn5转座子插入.利用同源重组重新构建了一株在同样位置带有同样插入突变的突变体,命名为AcGFP-i18.AcGFP-i18在Sf9细胞中能正常复制,其感染HA831细胞后,细胞中绿色荧光蛋白的表达水平明显高于对照病毒AcGFP,同时有一定水平的子代病毒产生.这一结果提示orf18位点的插入突变可以一定程度上扩展AcMNPV的宿主细胞范围.
- 夏霏张琦尹隽钟江
- 关键词：病毒复制宿主范围
- Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达鼠IL-2蛋白的研究
- 2011年
- 目的:利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在BHK细胞表达重组鼠白细胞介素(IL)-2蛋白。方法:用Flag标记鼠IL-2并加入真核细胞启动子CMV,构建重组质粒pFB-CMV-IL-2并予酶切和PCR鉴定;将鼠IL-2克隆入杆状病毒表达载体pFastBacDual中,将pFB-CMV-IL-2转化到含杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态菌中,筛选阳性克隆,获得重组杆状病毒载体Bacmid-pFB-CMV-IL-2,抽提质粒;用脂质体转染法将Bacmid-pFB-CMV-IL-2转染Sf9昆虫细胞包装病毒,收获重组杆状病毒,将构建病毒转导BHK细胞培养,用Western blot检测IL-2蛋白。结果:通过杆状病毒表达系统,在BHK细胞成功表达重组的鼠IL-2蛋白。结论:重组杆状病毒在真核细胞中成功表达重组鼠IL-2蛋白。
- 黄大林戴支凯王鑫李彬彬钟江
- 关键词：白细胞介素2重组蛋白质类
