江苏省医学重点人才培养基金(RC2007049)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
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- 急性乙型肝炎患者特异性核心抗原细胞毒性T淋巴细胞频率的变化及其意义被引量：5
- 2011年
- 目的 动态观察急性乙型肝炎（AHB）患者外周血HBcAg18-27表位特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）、血清ALT、HBV DNA、HBsAg和淋巴细胞亚群的变化,探讨HBV特异性CTL频率的消长在病毒清除以及肝脏损伤中的作用.方法 分别选取AHB、慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血,根据人类白细胞抗原（HLA）-A0201结果分为两组：HLA-A0201阳性患者作为HBV特异性CTL检测组、HLA-A0201阴性患者作为特异性抗原表位对照组.用HLA-A0201限制性表位HBcAg18-27五聚体复合物通过流式细胞技术,动态定量检测外周血中HBV特异性CTL频率和T、B淋巴细胞与自然杀伤细胞（NK）和NKT淋巴细胞;以速率法检测血清ALT水平;荧光定量PCR检测HBV DNA水平; Abbott微粒子化学发光技术检测HBV血清学标志物.计量资料采用均数±标准差（（x）±s）表示或中位数（P25-P75）描述,组间比较采用方差分析或非参数检验（KruskalWallis检验和Mann-Whitney U检验）;两种计量指标的关系采用Pearson相关分析.结果 AHB患者入院第1、2、3周外周血HBcAg表位特异性CTL频率分别为2.11%（0.20%～3.64%）、3.56%（1.05%～5.91%）、2.03%（0.33%～3.58%）,高于入院第4、5、6周的0.99%（0.12%～2.16%）、0.29%（0.05%～0.76%）、0.39%（0.05%～0.46%）,也显著高于CHB的0.11%（0.06%～0.29%）,z值分别为-3.258,-4.041,-3.259,P值均＜0.01.AHB患者HBcAg表位特异性CTL峰值延迟于血清HBV DNA、HBsAg和ALT等指标的峰值;在AHB患者中,HBcAg表位特异性CTL高频率患者的血清HBsAg消失时间早于CTL频率较低的患者[（1.75±1.04）周与（4.33±3.51）周,t=-2.018,P＜0.05].CD3＋CD8＋T淋巴细胞频率的峰值出现在入院后第2周,并与HBcAg表位特异性CTL峰值相重叠,两者动态变化规律呈相关性（r=0.420,P＜0.01）.AHB患者早期外周血NK、NKT淋巴细胞数量显著低于正常对照组和CHB患者,但随着病情好转而逐渐恢复,AHB患者外周血NK细胞数量变化与HBc
- 李军韩亚萍刘波刘源陈念董莉严友德蒋龙凤黄祖瑚
- 人宫颈癌基因在消化系肿瘤中的表达及其临床意义
- 2008年
- 背景:人宫颈癌基因(HCCR)是在宫颈癌中发现的一个新的癌基因,可能通过负向调节p53而促进肿瘤发生。目的:检测HCCR在人胃癌、结肠癌、肝癌中的表达,探讨其与肿瘤临床病理特征的关系。方法:以免疫共沉淀法检测HCCR在消化系肿瘤患者外周血中的表达,以细胞免疫荧光和免疫细胞化学染色检测HCCR在消化系肿瘤细胞株中的定位和表达,以免疫组化方法检测HCCR在肿瘤组织中的表达,并分析其与肿瘤临床病理特征的关系。结果:HCCR在消化系肿瘤患者外周血中有表达,肿瘤细胞株中其表达定位于细胞膜和细胞质。HCCR在人胃癌、结肠癌、肝癌组织中的阳性表达率显著高于相应正常或癌旁组织(P<0.05)。HCCR的阳性表达率与胃癌部位和肝癌组织学分级显著相关(P<0.05),与其他肿瘤临床病理特征均不相关。结论:HCCR在人消化系肿瘤细胞和组织中表达较强,可能与肿瘤的发生、发展有关,有望成为消化系肿瘤诊断的标记物。
- 王静黄霞玥郝波杨艳梅张国新
- 关键词：人宫颈癌基因胃肠肿瘤肝肿瘤基因表达
- 抗HCCR单克隆抗体的制备及其鉴定
- 2012年
- 目的制备抗人宫颈癌癌基因(HCCR)单克隆抗体(mAb),并进行鉴定。方法以HCCR重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,常规筛选杂交瘤细胞。腹水诱导法制备抗人HCCR单克隆抗体,并经蛋白A亲合层析进行纯化。用Western blot和免疫荧光等方法检测HCCR mAb的特异性。用纯化HCCR蛋白进行包被,建立间接ELISA方法,检测系列稀释的HCCR mAb,确定其灵敏度。结果筛选出2株分泌抗人HCCR mAb的杂交瘤细胞株。Western blot结果表明抗人HCCR抗体能与HCCR蛋白特异性结合,免疫荧光结果显示肝癌HepG2细胞中胞浆和胞膜均呈阳性染色。间接ELISA方法检测HCCR mAb的灵敏度可达到1μg/L。结论成功制备并鉴定了特异性抗人HCCR mAb的杂交瘤细胞株,为进一步深入研究HCCR的生物学特征和临床应用打下基础。
- 郝波林艳张国新施瑞华
- 关键词：HCCR单克隆抗体杂交瘤
