国家林业局948项目(2012-4-49)
- 作品数：2 被引量：22H指数：2
- 相关作者：高健张春玲张颖陈媛文齐飞艳更多>>
- 相关机构：国际竹藤中心更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划国家科技支撑计划国家林业公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 毛竹EMF2类基因原核表达条件优化被引量：2
- 2012年
- 在对毛竹EMF2基因功能研究的过程中,需要制备其抗体用于蛋白表达的检测。由于PheEMF2原核表达量低,纯化到的蛋白量不利于抗体制备,所以本研究用正交设计的方法对PheEMF2原核表达诱导条件进行优化,提高其原核蛋白表达量。根据L25(56)正交设计表设计诱导时间、诱导温度、IPTG终浓度、菌液OD值四因素五水平的融合蛋白表达诱导条件。用凝胶图像光密度分析系统分析各诱导条件下融合蛋白的表达量,发现菌液OD值和诱导温度对蛋白表达量有显著影响,而IPTG终浓度和诱导时间对蛋白表达量影响不显著。根据正交设计的效应曲线和方差分析结果,选择在菌株生长值OD600为1.1时,加入IPTG至终浓度1.0mmol/L,放入25℃摇床中振荡8 h诱导融合蛋白表达,融合蛋白的表达量约提升了10倍,占细菌总蛋白量的21.4%。
- 齐飞艳陈媛文张颖张春玲高健
- 关键词：原核表达诱导蛋白
- 毛竹实时荧光定量PCR内参基因的筛选及成花基因PheTFL1表达分析被引量：20
- 2013年
- 通过qRT-PCR对毛竹相关成花基因PheTFL1的表达进行研究,为毛竹开花机理的研究提供理论依据。从毛竹UBC18、PP2A和EF1α等9个候选内参基因中筛选出在叶、幼嫩花序、花序轴、枝、竹青等11个组织器官中都稳定表达的PP2A用于毛竹PheTFL1基因qRT-PCR结果的校正。结果显示:PheTFL1基因在开花竹叶、枝和竹青中低丰度表达,与未开花竹差异不显著,但在花和花序轴中高丰度表达;在实生苗叶和根中高丰度表达,在实生苗茎中低丰度表达。PheTFL1基因在具有分生能力的幼嫩组织中高丰度表达,说明其不仅参与花发育的调控,还参与了分生组织生长的调控。
- 齐飞艳胡陶彭镇华高健
- 关键词：内参基因实时荧光定量PCR
