重庆市卫生局医学科研项目(07-2-082)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目国家自然科学基金更多>>
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- 不同转移潜能乳腺癌细胞中EGFR的表达及意义
- 2010年
- 目的研究表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在不同转移潜能乳腺癌细胞中的表达,并探讨其在乳腺癌侵袭转移过程中的作用。方法利用人工基质膜侵袭实验获得高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测两系细胞生长曲线和倍增时间,流式细胞仪检测两系细胞周期,transwell侵袭小室模型比较两系的迁移能力。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western Blot)检测EGFR在两系细胞中的表达。结果利用transwell小室成功筛选出高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系;它们的体外生长速度、倍增时间、细胞周期和侵袭力具有明显差异;RT-PCR和Western Blot均显示在高转移潜能乳腺癌细胞中EGFR在基因和蛋白水平的表达均显著高于低转移乳腺癌细胞。结论 EGFR的过表达与乳腺癌细胞侵袭能力显著性相关,EGFR在乳腺癌侵袭过程中发挥了重要的作用。
- 张俊李少林郭启帅曹辉张涛汤为学
- 关键词：乳腺癌表皮生长因子受体TRANSWELL
- MMP-2、MMP-9在高、低转移潜能乳腺癌细胞中的表达变化被引量：3
- 2011年
- 目的筛选高、低转移潜能的乳腺癌细胞亚系,研究基质金属蛋白酶-2(matrix metalloprotainese,MMP-2)、MMP-9在高、低转移潜能乳腺癌细胞的表达差异及其意义。方法利用人乳腺癌细胞系MDA-MB-435s细胞在Transwell小室上连续穿透人工基质膜获得高、低转移潜能乳腺癌细胞株。用细胞侵袭实验、免疫组化、Western blot方法,测定2株细胞的侵袭能力和MMP-2和MMP-9的表达情况。结果细胞侵袭实验结果显示,侵袭实验20 h时,高转移潜能乳腺癌细胞的侵袭能力[(61.40±7.08)个/视野]强于低转移潜能乳腺癌细胞[(25.34±4.87)个/视野,P<0.05]。免疫组化和图像分析结果显示,MMP-2和MMP-9在高转移潜能乳腺癌细胞中的表达水平[分别为(0.24±0.04)、(0.23±0.05)]高于低转移潜能乳腺癌细胞[分别为(0.16±0.02)、(0.13±0.03),P<0.05]。将免疫组化结果和细胞侵袭实验结果进行Pearson相关分析,结果表明MMP-2、MMP-9的表达水平与穿透Transwell小室的数量呈正相关(r=0.957、r=0.964,P<0.05)。Western blot检测结果也显示,高转移潜能乳腺癌细胞的MMP-2和MMP-9的表达[分别为(0.59±0.14)、(0.67±0.17)]明显高于低转移潜能乳腺癌细胞[分别为(0.31±0.07)、(0.35±0.06),P<0.05]。结论利用细胞穿透人工基底膜能力的差异能够筛选出高、低转移潜能的乳腺癌细胞;MMP-2、MMP-9的蛋白表达与乳腺肿瘤的侵袭能力关系密切。
- 张涛陈晓品汤为学彭志平李少林
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移基质金属蛋白酶
- 皮质肌动蛋白在不同转移潜能乳腺癌细胞中的表达及意义被引量：1
- 2010年
- 目的筛选不同转移潜能的乳腺癌细胞亚系,并探讨皮质肌动蛋白(cortactin)在乳腺癌细胞增殖和侵袭过程中的作用。方法经过连续人工基质膜侵袭实验后获得高、低转移潜能的乳腺癌细胞亚系,通过透射电镜观察比较两系细胞的超微结构,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测两系细胞增殖能力,流式细胞仪检测两系细胞周期,Transwell侵袭小室模型比较两系的迁移能力。应用免疫细胞化学法、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹分析法检测cortactin蛋白在两系细胞中的表达。结果利用人工基质膜侵袭实验筛选出高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系,并且两系细胞形态上无明显差异。MTT实验显示高转移潜能细胞体外生长速度显著快于低转移潜能细胞(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,高转移潜能细胞亚系与低转移潜能细胞亚系相比,G0/G1期细胞前者比后者少[(52.67±3.69)%vs(64.46±2.79)%],而S期细胞前者比后者多[(30.53±6.19)%vs(24.63±2.04)%]。高转移潜能细胞亚系增殖指数(PI)高于低转移细胞亚系[(47.32±3.69)%vs(35.53±2.80)%,P<0.05],侵袭能力显著强于低转移潜能细胞亚系[(61.46±7.08)vs(25.32±4.87)个/视野,P<0.05]。免疫组化、RT-PCR和蛋白质印迹分析均显示在高转移潜能细胞亚系中cortactin在基因和蛋白水平的表达均高于低转移潜能细胞亚系(P<0.05)。结论 Cortactin的过表达与乳腺癌的增殖和转移过程密切相关。
- 张俊曹辉郭启帅张涛汤为学李少林
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移细胞增殖
- 不同转移潜能乳腺癌细胞亚系的建立与生物学特性的分析被引量：4
- 2008年
- 目的探讨利用细胞穿透人工基质膜能力的差异筛选不同转移潜能乳腺癌细胞的可行性,并分析二者生物学特性差异。方法人乳腺癌细胞系MDA-MB-435s经过连续人工基质膜侵袭试验后获得高、低转移潜能细胞株,并应用细胞生长曲线测定、侵袭力、黏附率实验,促血管形成实验分析所筛选出的不同转移潜能乳腺癌细胞的生物学性质的差异。结果获得2株转移潜能不同的乳腺癌细胞株,它们具有差异明显的体外生长速度、侵袭力、黏附力和促血管形成能力。结论利用细胞穿透人工基底膜能力的差异能够筛选出高、低转移潜能的乳腺癌细胞。
- 张涛汤为学蔡辉李少林
- 关键词：乳腺癌肿瘤转移细胞株生物学特性
