山东省科技攻关计划(2006GG3202037)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：山东大学山东省千佛山医院更多>>
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- 急性白血病患者WIF-1基因启动子甲基化及β连环蛋白表达的研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨急性白血病（AL）患者Wnt抑制因子1（WIF-1）基因启动子甲基化及β连环蛋白（β-catenin）的表达在白血病中的意义。方法采用甲基化特异性PCR检测山东大学附属千佛山医院2009年1月至2010年6月55例AL患者及对照组骨髓单个核细胞WIF-1基因启动子甲基化情况，流式细胞术检测AL患者及对照组骨髓单个核细胞β—catenin表达。结果32．7％（18／55）的AL患者WIF-1基因启动子区域有异常甲基化，对照组未检测到WIF-1基因甲基化，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。甲基化组首次诱导治疗完全缓解率（38．9％，7／18）低于非甲基化组（81．1％，30／37），差异有统计学意义（P〈0．05）。甲基化组与非甲基化组β—catenin的表达（17．5％±3．3％、15．4％±3．6％）均高于对照组（10．5％±1．5％，均P〈0．05）；甲基化组β—catenin的表达高于非甲基化组（P〈0．05）。结论WIF-1基因启动子甲基化及β—catenin过表达可能参与了AL患者Wnt／β-catenin途径的异常激活。
- 王焱朱传升毕可红徐文伟董琳侯明
- 关键词：白血病DNA甲基化Β连环素WIF-1基因
- K562细胞TMS1基因去甲基化后NF-κB表达的变化
- 2014年
- 目的探讨甲基化诱导静止基因(TMS1)在慢性髓性白血病细胞系K562细胞中的甲基化程度及其与NF-κB的关系。方法选取6例正常人及非恶性血液病患者骨髓细胞作为骨髓细胞对照组,提取RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TMS1 mRNA表达;体外培养K562细胞,设空白对照组、0.5μmol/L地西他滨(DCA)实验组、1μmol/L DCA实验组。采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测各组K562细胞TMS1基因甲基化程度;采用RT-PCR和Western blotting法检测各组K562细胞TMS1基因与NF-κB在mRNA及蛋白水平的表达变化;采用CCK-8法检测细胞增殖抑制作用,光学显微镜下观察细胞形态变化。结果骨髓细胞对照组均可检测到TMS1 mRNA的表达,而K562细胞系中无TMS1 mRNA表达。MSP检测结果显示,空白对照组TMS1基因呈完全甲基化;TMS1基因去甲基化后NF-κB的表达下调,与空白对照组相比,其他两组细胞TMS1mRNA及蛋白表达均增高,而NF-κB表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度的DCA对K562细胞均有一定的增殖抑制作用,且呈量效和时效关系。结论 TMS1基因在K562细胞中呈完全甲基化,其沉默表达可能会异常激活NF-κB途径,部分参与白血病的发生发展。
- 李洪丽王焱徐文伟董琳郭燕朱传升毕可红
- 关键词：甲基化白血病
- K562细胞TMS1基因甲基化状态及三氧化二砷对其去甲基化作用
- 2014年
- 目的探讨慢性髓性白血病细胞系K562细胞甲基化诱导静止基因（TMS1）甲基化程度及三氧化二砷（As2O3）对其甲基化状态的逆转作用及其机制。方法K562细胞经不同浓度As2O3处理48h，采用甲基化特异性PCR（MsP）法检测As2O3处理前后K562细胞TMS1基因甲基化程度；RT-PCR及Westernblot法检测As2O3处理前后K562细胞TMS1mRNA及蛋白表达，Westemblot法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达水平的变化；用细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V／PI）标记、流式细胞术检测细胞凋亡。结果K562细胞TMS1基因呈完全甲基化，TMS1mRNA及蛋白呈低表达状态，相对表达水平分别为0．01＋0．01、0．09~0．02；2jgnol／LAs2O3可完全逆转K562细胞TMS1的甲基化水平，TMS1mRNA及蛋白相对表达水平分别为0．72±0．04和1．3±0．06，与处理前相比明显升高（P〈0．01）；细胞凋亡检测结果显示，与对照组相比，2gmol／LAs2O3处理组细胞凋亡率明显增加[（2．05±0．16）％对（12．24±1．06）％，P〈0．05）]。与对照组相比，2μmol／LAs2O3处理组K562细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低，促凋亡蛋白Bax表达明显增高，Bcl-2／Bax比值明显降低（1．94±0．14对0．56士0．12，P〈0．01）。结论As2O3可通过逆转抑癌基因TMS1的甲基化状态，恢复其表达，并通过下调Bcl．2／Bax比值促进K562细胞凋亡。
- 李洪丽董小锋王焱徐文伟董琳毕可红朱传升
- 关键词：K562细胞DNA甲基化砷剂
- Apaf-1基因启动子甲基化与抑凋亡蛋白Apollon表达在成人急性白血病发生发展中的意义被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨Apaf-1基因启动子甲基化与抑凋亡蛋白Apollon在成人急性白血病（AL）发生发展中的作用.方法 采用甲基化特异性PCR（MS-PCR）检测53例AL患者骨髓细胞基因启动子区域甲基化情况,RT-PCR方法 检测Apaf-1 mRNA表达水平.免疫细胞化学方法 检测Apollon蛋白表达情况,正常骨髓对照为10名正常人和非恶性血液病患者.结果 18例（33.9%）AL患者Apaf-1基因启动子存在异常甲基化,甲基化检测阳性患者均未检测到Apaf-1 mRNA的表达,对照组仅1份Apaf-1 mRNA表达缺失,MS-PCR检测未发现Apaf-1基因启动子的异常甲基化,AL患者Apaf-1基因甲基化阳性率高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）,AL患者骨髓细胞Apollon蛋白表达水平高于对照组（P＜0.05）,AL患者外周血WBC＞10×109/L的患者Apaf-1基因启动子甲基化阳性率及Apollon蛋白表达水平高于WBC≤10×109/L患者,差异有统计学意义（P＜0.05）,AL患者中Apaf-1基因启动子甲基化阳性率与Apollon蛋白表达呈正相关.结论 Apaf-1基因启动子的异常甲基化与抑凋亡蛋白Apollon的高表达在白血病的发生发展中可能起协同作用,共同促进了白血病的发生、发展.
- 郭军朱传升徐文伟王焱董琳毕可红
- 关键词：白血病基因APAF-1DNA甲基化
- Dickkopf1(DKK-1)基因甲基化在急性白血病中的表达分析被引量：1
- 2012年
- 目的探讨WNT/β-catenin通路的关键抑制因子Dickkopf1(DKK-1)基因异常甲基化与急性白血病(AL)发病机制的相关性。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测4个AL细胞系(NB4、Jurkat、Molt-4、CEM)、65例AL患者及20例正常对照骨髓单个核细胞中DKK-1基因mRNA的表达情况;采用甲基化特异性PCR(M SP)方法检测各标本及细胞系中DKK-1基因启动子区域的甲基化状态。结果与正常对照组比较,AL患者DKK-1基因mRNA表达量显著降低(P<0.05);正常对照组标本单个核细胞中不存在DKK-1基因的甲基化;DKK-1在AL患者中甲基化率为37.7%(24/65),其中急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中甲基化率为41.2%(14/34),急性髄系白血病(AML)患者中甲基化率为28.6%(10/31)。结论 DKK-1甲基化及异常表达在急性白血病中是一种较为普遍的现象,其参与了部分急性白血病的发病过程。
- 朱珣珣朱传升王焱徐文伟董琳郭燕李洪丽毕可红
- 关键词：甲基化白血病
