国家自然科学基金(20076042) 作品数:11 被引量:77 H指数:6 相关作者: 姚善泾 关怡新 朱自强 靳挺 齐祥明 更多>> 相关机构: 浙江大学 华东理工大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 生物学 化学工程 轻工技术与工程 理学 更多>>
一种碱性蛋白酶在高压CO_2-水-乙醇体系中的稳定性 被引量:2 2003年 基于超(近)临界流体抗溶剂沉淀法分离与纯化蛋白质的发展,酶以及蛋白质的稳定性是一个关键因素.本工作以碱性蛋白酶粗品(由地衣芽孢杆菌2709#发酵生产)为目标蛋白,考察了其在不同CO2压力的作用下,在水-乙醇溶液中的稳定性情况,并进一步探索了酶活降低的原因,寻找保持酶活的办法.实验中所用CO2压力为0~7MPa,温度为35℃,乙醇浓度为0%~20%(wt).实验结果表明,在一定的实验研究范围内,杂蛋白沉淀出来的同时,碱性蛋白酶可以保持80%以上的相对酶活.实验结果为超(近)临界CO2沉淀法分离与纯化碱性蛋白酶提供了技术保障. 齐祥明 姚善泾 关怡新 朱自强关键词:超临界CO2 酶活力 碱性蛋白酶 稳定性 超临界抗溶剂沉淀蛋白质的研究(一)——加压CO2对纤维素酶酶活的影响因素 测定了10wt%-40wt%乙醇—水溶液中的纤维素酶,在温度为20℃~40℃和CO压力为0.49MPa~4.41MPa下的酶活变化数据,这些数据对于用高压CO分离纯化纤维素酶具有指导意义。实验表明,CO压力不是酶活损失的... 何卫中 姚善泾 关怡新 朱自强关键词:纤维素酶 酶活 二氧化碳 文献传递 重组人γ-干扰素包涵体稀释复性 被引量:17 2004年 采用稀释法研究了重组人γ 干扰素包涵体复性条件 ,如温度、pH值、蛋白浓度、复性液中脲浓度 ,同时对加样操作方式进行了考察 ,得到了较为适宜的复性条件 .结果表明 ,脲能有效地抑制复性过程中蛋白质的聚集 ,合适的脲浓度随复性蛋白浓度的增加而有所增大 ,在 4℃、pH值 8 0、脲浓度 1 0mol·L-1、蛋白浓度0 1mg·ml-1及脉冲加样操作方式等条件下 ,复性后重组人γ 干扰素的活性为 2 39× 10 5IU·ml-1,比活达 2 2 1× 10 7IU·mg-1. 靳挺 关怡新 费峥峥 姚善泾关键词:重组人Γ-干扰素 包涵体 稀释复性 Physical and Hydrodynamic Properties of Spherical Cellulose-Titanium Dioxide Composite Matrix for Expanded Bed Adsorption 被引量:8 2003年 Expanded bed adsorption (EBA) has been widely used in industrial downstream bioprocessing. Solid matrix is the principal pillar supporting the successful application of EBA. A novel spherical cellulose-titanium dioxide composite matrix was prepared through the method of water-in-oil suspension thermal regeneration. Its typical physical properties were wet density 1.18g.cm-3, diameters in the range of 100-300um, porosity 85.5%, and water content 72.3%. Expansion characteristics and liquid mixing performance of the matrix in expanded bed were investigated using water and 10% (by mass) glycerol solution as mobile phases. The results indicate that the custom-assembled matrix has a stable flow hydrodynamics and exhibits the same degree of liquid-phase mixing or column efficiency as the commercially available Streamline adsorbent. 雷引林 林东强 姚善泾 刘坐镇 朱自强关键词:MATRIX CELLULOSE SA/CS-CaCl_2/PMCG微胶囊的生物相容性研究 被引量:7 2002年 介绍了一种新型多组份生物微胶囊体系———SA CS CaCl2 PMCG微胶囊。考察了PMCG和SA CS CaCl2 PMCG微胶囊体系对大肠杆菌和酿酒酵母生长的影响 ,并用SA CS -CaCl2 PMCG生物微胶囊进行了固定化培养大肠杆菌和酿酒酵母的研究。结果表明 ,与其它合成聚阳离子类似 ,PMCG组分对细胞生长有明显的抑制作用 ,但是在制胶囊过程中以及在用SA CS CaCl2 PMCG微胶囊对大肠杆菌和酿酒酵母培养过程中 ,都显示了良好的生物相容性 ,因此作为整个体系来说 。 张立央 关怡新 姚善泾关键词:生物相容性 细胞固定化 蛋白质在离子交换介质中的动态吸附性能 被引量:15 2002年 研究了离子交换介质 CM-Sepharose FF 对几种不同的蛋白质——溶菌酶、木瓜蛋白酶、牛血清蛋白的动态吸附性能,考察了pH值、溶液粘度、初始蛋白浓度及吸附剂量等因素的影响。结果表明,这些参数会对吸附剂的动态吸附性能产生不同程度的影响,而这些蛋白质也都显示了相似的规律。采用两相阻力模型描述了蛋白质在离子交换介质的动态吸附性能,计算得到了蛋白质在吸附剂颗粒中的扩散系数,有助于进一步研究蛋白质吸附过程的传质现象。 姚善泾 关怡新 俞丽华关键词:蛋白质 离子交换介质 溶菌酶 一种双水相亲和分配配基的制备过程优化——亚氨基二乙酸-聚乙二醇 被引量:5 2003年 考察了不同亚氨基二乙酸(IDA)取代度的亚氨基二乙酸-聚乙二醇(IDA-PEG)的制备,并进行了条件优化(BF3浓度,NaOH浓度,反应时间,IDA结合条件等)。通过控制环氧氯丙烷与聚乙二醇的摩尔配比,得到了不同Cu( )含量的固定化金属亲和配基:Cu( )-IDA-PEG(A)(0.24molCu2+/molPEG)、Cu( )-IDA-PEG(B)(0.51molCu2+/molPEG)、Cu( )-IDA-PEG(C)(0.75molCu2+/molPEG),并初步探讨了固定化金属亲和配基的添加对PEG4000-(NH4)2SO4-H2O双水相系统相图的影响。 文禹撷 林东强 陆瑾 姚善泾关键词:亚氨基二乙酸 聚乙二醇 蛋白质 加压二氧化碳对大肠杆菌的存活影响及其致死效果 被引量:5 2006年 加压二氧化碳对E.coli有明显的致死作用,按照致死速率的快慢,整个过程可分为两个阶段:缓慢死亡期和迅速死亡期.CO2进入水相和细胞的速率控制着缓慢死亡期的持续时间和致死速率.提高压力和温度有利于提高加压CO2对E.coli的致死效果.较低的初始环境pH可以加快E.coli在加压CO2下的死亡.考察了搅拌和泄压方式对加压二氧化碳使E.coli致死效果的影响,结果表明改善二氧化碳的传质速率是提高致死效果的关键.不同菌龄的细胞对加压二氧化碳的敏感程度不同,对数生长期的细胞更易致死. 吴垠 姚善泾 关怡新关键词:大肠杆菌 致死 人γ-干扰素基因工程菌培养条件的研究 被引量:7 2003年 对表达重组人γ-干扰素的基因工程菌的培养条件进行了较详细的研究.确定了最佳的培养及诱导时间,并利用正交试验设计,对影响工程菌生长和重组人γ-干扰素表达的条件如培养基中葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物的量及摇床转速、装液量、接种量、pH等进行了优化.结果表明,在优化条件下,表达的γ-干扰素包涵体占菌体总蛋白的60%以上,每升发酵液可获得包涵体约为1.6g. 靳挺 关怡新 姚善泾关键词:重组人Γ-干扰素 基因工程菌 包涵体 发酵 一种新型蛋白质沉淀体系——加压CO_2乙醇-水体系 被引量:3 2005年 将有机溶剂抗溶剂与高压气体等电沉淀技术结合起来 ,提出了一种新的蛋白质纯化方法 .实验以加压CO2为挥发性酸 ,乙醇为助沉淀剂 ,对BSA的等电沉淀进行了研究 .由实验结果可知 ,本方法可使BSA处理浓度提高 ,CO2 操作压力降低 ,其中乙醇既具有促进沉淀的作用又具有降低BSA缓冲能力的作用 .蛋白质稳定性测试结果表明 ,在实验操作条件下 ,BSA未发生不可逆的构象变化 ,能保持稳定 .这些结果对该方法的进一步完善及其在蛋白质等生物活性成分分离纯化领域的应用具有借鉴作用 . 齐祥明 姚善泾 关怡新 朱自强关键词:CO2 BSA