广西壮族自治区自然科学基金(2011GXNS-FA018088)
- 作品数：1 被引量：7H指数：1
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- 相关机构：广西兽医研究所更多>>
- 发文基金：广西特聘专家专项经费资助项目广西壮族自治区科技攻关计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- H5亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测技术的建立被引量：7
- 2013年
- 【目的】建立一种适用于H5亚型禽流感病毒(AIV)的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)可视化快速检测技术,为控制疫情扩散、减少经济损失争取了时间。【方法】根据GenBank中H5亚型AIV血凝素(HA)基因序列,设计一套针对HA基因6个区域的4条特异性引物,在反应之前向反应液中加入荧光试剂(Calcein/MnCl2混合液),然后对反应条件和体系进行优化。【结果】优化的RT-LAMP技术操作简便迅速,常规水浴锅中50min可完成,能特异性地检测出H5亚型AIV,但对其他HA亚型AIV、禽呼吸道病原体无交叉扩增反应,灵敏度是常规RT-PCR的10倍;反应结束后无需打开反应管盖,即可根据反应液的颜色变化对结果进行判定。【结论】建立的H5亚型AIVRT-LAMP可视化检测技术具有简便、快速、特异等特点,可在设备有限的基层兽医站及养殖场对H5亚型AIV进行快速初步诊断。
- 彭宜谢芝勋刘加波庞耀珊邓显文谢志勤谢丽基范晴罗思思
- 关键词：H5亚型禽流感病毒荧光试剂
