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Bax、Bcl-2ASODN联合转染增强宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的实验研究被引量：11: 2006年; 目的:研究凋亡抑制基因bcl-2反义寡核苷酸(ASODN)和促凋亡基因bax联合转染对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响,进而探求其放射增敏作用。方法:用逆转录病毒颗粒感染HeLa细胞,获得HeLa-bax细胞后,将bcl-2ASODN转染HeLa及HeLa-bax细胞,36h后放射治疗,通过MTT法、细胞形态学及流式细胞仪检测细胞增殖与凋亡,半定量RT-PCR测bcl-2及bax基因的表达。结果:(1)HeLa细胞经bcl-2ASODN及bax联合转染并放疗后,光镜观察有明显凋亡趋势;(2)MTT法及流式细胞仪检测其凋亡率明显高于单基因转染+放疗组(P<0.05);(3)RT-PCR结果显示,bax基因表达显著增强,而bcl-2基因表达较各对照组明显减弱。结论:凋亡抑制基因bcl-2ASODN和促凋亡基因bax联合转染诱导HeLa细胞凋亡效果明显优于单基因转染,可有效提高HeLa细胞的放射敏感性。; 魏玮程玉峰姜玉华梁业民乔乃安; 关键词：寡核苷酸类

转染bcl-2反义寡核苷酸诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的体外实验研究被引量：2: 2005年; 目的 :体外研究bcl- 2反义寡核苷酸对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响 ,旨在寻求提高肿瘤细胞放射敏感性的方法。方法 :(1)免疫组化、半定量RT -PCR法鉴定ASODN的有效性。 (2 )Giemsa染色、流式细胞术凋亡指数 (AI)、DNALadder检测细胞凋亡。结果 :(1)转染后 ,免疫组化结果示Bcl- 2蛋白表达降低 ;半定量RT -PCR结果显示bcl- 2mRNA表达较对照组明显减弱 (P <0 0 5 )。 (2 )转染后 ,Giemsa染色可见凋亡小体 ;流式细胞术结果显示转染后AI为 :6 6 0± 0 70 % ,明显高于对照组 1 79± 0 19% (P <0 0 5 ) ;DNALadder呈现具有凋亡特征的梯带。结论 :(1)本实验所设计的ASODN能有效地抑制bcl- 2基因的表达。 (2 )转染ASODN (bcl-2 )能够显著增加Hela细胞凋亡。进而有望通过转染ASODN提高肿瘤细胞的放射敏感性。; 李烿烿高成金程玉峰; 关键词：反义寡核苷酸 BCL-2基因 HELA

脂质体介导C-MYC反义寡核苷酸诱导HELA细胞凋亡的实验研究: 2006年; 目的体外研究C-MYC反义寡核苷酸(ASODN)对人宫颈癌HELA细胞凋亡的影响,寻求提高肿瘤细胞放射敏感性的方法。方法免疫组化、流式细胞术、半定量RT-PCR法鉴定ASODN的有效性;GIEMSA染色、流式细胞术检测凋亡指数(AI)、DNA LADDER检测细胞凋亡。结果转染后,免疫组化结果显示C-MYC蛋白表达降低;半定量RT-PCR结果显示C-MYC MRNA表达较空白对照组及阴性对照组明显减弱(P<0.05)。GIEMSA染色可见凋亡小体;流式细胞术结果显示转染后凋亡指数为(10.29±0.66)%,转染ASODN(C-MYC)联合放射的凋亡指数为(16.83±0.57)%,均明显高于空白对照组(1.79±0.19)%(P<0.05);DNA LADDER呈现具有凋亡特征的梯带。结论本实验所设计的ASODN能有效地抑制C-MYC基因的表达;转染ASODN(C-MYC)能够显著增加HELA细胞凋亡,从而提高肿瘤细胞的放射敏感性。; 李烿烿马道新程玉峰; 关键词：反义寡核苷酸基因 HELA

人bax基因逆转录病毒表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达被引量：1: 2006年; [目的]构建带有报告基因EGFP的bax基因逆转录病毒表达载体,建立高表达bax基因的Hela细胞。[方法]通过RT-PCR方法从Hela细胞克隆bax基因,根据基因工程原理,经PCR、酶切等方法构建bax基因和报告基因EGFP双基因逆转录病毒表达载体pLBaxSN-IRES2-EGFP,转染Hela细胞后,荧光显微镜和WesternBlotting检测bax基因的表达情况。[结果]成功构建了带有EGFP的bax基因的逆转录病毒表达载体,并将其转入Hela细胞。[结论]成功建立的高表达bax基因的Hela细胞株,为探讨bax基因与放射敏感性之间的关系奠定了基础。; 陈秀军程玉峰王来城; 关键词：BAX基因

环境激素对雄性生殖系统的影响被引量：1: 2007年; 环境激素包括部分农用产品、生活用品、工业原料、重金属和二次污染物等,它们通过参与内源性激素的介导反应,与内分泌系统、免疫系统、神经系统的综合效应,影响生殖系统部分酶的表达,从而影响体内正常激素的运输,增加体内自由基含量,造成过氧化损伤,与基因交互作用等反应机制,最终导致雄性生殖系统的紊乱、生殖器官发育不良、畸变、癌变、雄性动物不育、雄性出生率低下等。; 于洋席波李军; 关键词：环境激素生殖毒性雄性

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山东省自然科学基金(Y2001C32)