国家教育部博士点基金(20040760002)
- 作品数：10 被引量：38H指数：4
- 相关作者：郑玉建吴顺华肖静张跃新成军更多>>
- 相关机构：新疆医科大学北京地坛医院解放军第302医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 三氧化二砷体外诱导人HepG2细胞铁蛋白基因表达的研究被引量：1
- 2005年
- 目的了解低剂量三氧化二砷诱导的HepG2细胞的差异表达基因,揭示慢性砷中毒对肝细胞损伤的作用机制。方法在体外用三氧化二砷(5μmol/L)处理HepG2细胞,同时以PBS处理的相同细胞系作为对照;24h后制备细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaⅠ酶切后,将实验组cDNA分成2组,分别与2种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行2次消减杂交及2次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌JM109进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建三氧化二砷处理HepG2细胞差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩增后得到109个白色克隆,进行菌落PCR分析,均得到200～1000bp插入片段。挑取含有插入片段的36个克隆进行测序,通过生物信息学分析发现铁蛋白重链和轻链在三氧化二砷诱导的肝HepG2细胞正向消减cDNA文库中显著上调,共有8个阳性克隆子。结论低剂量三氧化二砷刺激细胞后可诱导铁蛋白的表达上调,暗示铁蛋白在砷诱导的肝细胞损伤中起作用。
- 吴顺华郑玉建成军张跃新刘妍刘开泰
- 关键词：三氧化二砷HEPG2细胞铁蛋白抑制性消减杂交
- 三氧化二砷反式激活基因AsTP2的克隆化及生物信息学分析被引量：3
- 2005年
- 目的 三氧化二砷反式激活靶基因(AsTP2)的克隆化研究。方法 对构建的三氧化二砷差异表达的肝HepG2细胞 cDNA消减文库进行筛选,利用RT PCR技术获得新基因AstTP2的编码序列,结合生物信息学对其氨基酸序列、染色体定位和基因 功能进行分析比较。结果 AsTP2基因编码区为1119nt,编码产物为372aa。经核苷酸序列数据库(GenBank)和蛋白质一级结构序 列数据库(SwissProt)同源序列的搜寻,发现未知功能的同源蛋白,说明克隆的AsTP2基因属于未知功能新基因,GenBank注册号为 AY744366。该基因在三氧化二砷诱导的HepG2细胞中表达上调。结论 克隆了一条新的三氧化二砷反式激活靶基因AsTP2,为进 一步研究三氧化二砷的反式激活作用和揭示砷致癌的生物学机制提供新线索。
- 吴顺华郑玉建张跃新成军刘妍吴煜
- 关键词：三氧化二砷反式激活基因克隆化生物信息学分析
- 地方性砷中毒生物标志物研究进展被引量：4
- 2005年
- 肖静郑玉建
- 关键词：地方性砷中毒生物标志物化学性疾病分子生物学病因学研究皮肤损害
- DNA修复基因XPD多态性与地方性砷中毒关系的研究被引量：1
- 2006年
- 目的研究核苷酸切除修复基因XPD单核苷酸多态性与地方性砷中毒患病风险的关系。方法采用病例对照研究,包括正常对照99人,地方性砷中毒患者92人。以聚合酶链反应-限制性长度多态性方法分析XPD基因Lys751 Gln多态性,比较不同基因型和地方性砷中毒患病风险的方法。结果病例组中野生型XPD75Lys纯合子的频率明显低于对照组,和携带XPD751Lys/Lys基因型比较,携带至少一个XPD75Gln等位基因的个体即Lys/Gln和Gln/Gln基因型,地方性砷中毒发病风险显著增加,OR值分别为1.59和8.56。结论XPD基因Lys751Gln多态性和地方性砷中毒易感性有关,XPD751Gln等位基因可能是地方性砷中毒的风险等位基因。
- 肖静郑玉建吴顺华武贵臻陈艳
- 关键词：地方性砷中毒XPD基因单核苷酸多态性
- 低剂量三氧化二砷对HepG2细胞p53基因转录水平的下调作用被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨低剂量三氧化二砷(As2O3)对p53启动子转录活性的调节作用。方法:确定p53启动子区域,聚合酶链反应(PCR)扩增p53p,克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-p53p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;并以不同浓度三氧化二坤刺激HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性。结果:成功克隆出614 bp的新的p53 启动子,pCAT3-p53p和不同浓度的三氧化二砷(0．25 μmoL／L)瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是 pCAT3-Basic空载体的11．2倍,表明pCAT3-p53p具有强的启动子活性。选用0．25、0．5、2．5、5．0μmol／L浓度的三氧化二砷刺激pCAT3-p53p转染的HepG2细胞,其CAT吸光度值分别为:0．076、0．186、0．149、0．119,CAT活性随着三氧化二砷浓度的倍增呈衰减趋势。结论:p53启动子有反式激活下游基因表达的活性,低剂量三氧化二砷对p53基因转录水平具有下调作用。
- 吴顺华郑玉建成军张跃新刘妍吴煜张黎颖郭江
- 关键词：三氧化二砷反式激活下调
- 砷致小鼠脂质过氧化及锌、硒对砷的干预实验研究被引量：1
- 2007年
- 【目的】探讨砷对小鼠血清及肝脏脂质过氧化的影响及锌、硒对它的干预作用。【方法】采用亚慢性毒性实验方法,实验结束后分别测定小鼠血清、肝脏组织中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,同时观察锌、硒干预后对染砷小鼠体内抗氧化水平的影响。【结果】随着砷染毒剂量的增加,小鼠血清及肝脏组织中MDA和GST含量显著增加,SOD、GSH-Px活性显著降低,且呈剂量-效应关系。锌、硒能抑制MDA和GST生成量,提高SOD、GSH-Px活性。【结论】砷可致机体脂质过氧化,锌、硒可拮抗砷的脂质过氧化作用。
- 郑玉建吴顺华王婷张杰
- 关键词：砷锌硒脂质过氧化干预实验研究
- 地方性砷中毒患者细胞因子水平与抗氧化能力相关分析被引量：13
- 2006年
- 目的:探讨地方性砷中毒患者细胞因子水平与抗氧化能力的相关性。方法:对81例地方性砷中毒患者(病例组)和对照组(88例)血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平进行检测及分析。结果:与对照组相比,地方性砷中毒患者血清IL-2、IL-8和TNF-α水平显著增高(P<0．05),SOD、GSH-Px活性明显降低,而MDA水平增高(P<0．05)。砷中毒患者IL-2、IL-8、TNF-α含量与SOD、GSH-Px活性呈负相关性,与MDA水平呈正相关性 (P<0．05)。结论:地方性砷中毒患者血清IL-2、IL-8和TNF-α水平高于对照组,而抗氧化能力低于对照组。地方性砷中毒患者的IL-2、IL-8和TNF-α水平随抗氧化能力的降低而升高。
- 肖静吴顺华郑玉建王婷
- 关键词：地方性砷中毒细胞因子抗氧化能力
- DNA修复基因XPD多态性与地方性砷中毒关系的研究被引量：10
- 2006年
- 目的:研究核苷酸切除修复基因XPD单核苷酸多态性与地方性砷中毒患病风险的关系。方法:采用病例对照研究,包括正常对照99例,地方性砷中毒患者92例。以聚合酶链反应限制性长度多态性方法分析XPD 基因Lys751Gln多态性,比较不同基因型和地方性砷中毒患病风险的关系。结果:病例组中野生型XPD751Lys 纯合子的频率明显低于对照组,和携带XPD751Lys／Lys基因型比较,携带至少一个XPD751Gln等位基因的个体即Lys／Gln和Gln／Gln基因型,地方性砷中毒发病风险显著增加,OR值分别为1．59和8．56。结论:XPD基因 Lys751Gln多态性和地方性砷中毒易感性有关,XPD751Gln等位基因可能是地方性砷中毒的风险等位基因。
- 郑玉建肖静吴顺华杨晓燕武贵臻陈艳
- 关键词：地方性砷中毒XPD基因单核苷酸多态性
- 砷诱导Jurkat T淋巴细胞铁蛋白重链的表达被引量：1
- 2005年
- 目的了解三氧化二砷诱导人JuikatT淋巴细胞的差异表达基因,探讨砷对淋巴细胞基因转录的影响机制。方法在体外用三氧化二砷(5μmol/L,24h)处理人JurkatT淋巴细胞后,应用抑制性消减杂交技术(SSH)和基因克隆技术构建差异表达的cDNA文库,用PCR技术和测序技术鉴定阳性克隆。结果用SSH技术构建了由三氧化二砷诱导的人JurkatT淋巴细胞的差异表达基因的正向消减cDNA文库。经测序分析结果显示,铁蛋白重链在正向消减cDNA文库中有2个阳性克隆。结论三氧化二砷可诱导铁蛋白重链的表达,铁蛋白重链在淋巴细胞抗砷损伤机制中可能起着一定的作用。
- 吴顺华郑玉建张跃新成军刘开泰王国荃
- 关键词：三氧化二砷JURKATT淋巴细胞克隆
- 亚砷酸钠对人淋巴细胞增殖抑制机制的实验研究被引量：5
- 2006年
- 目的探讨亚砷酸钠(NaAsO2)对人淋巴细胞体外增殖抑制的影响。方法用不同浓度的NaAsO2处理细胞后,通过噻唑蓝还原法,吖啶橙荧光染色法和流式细胞术观察NaAsO2对淋巴细胞增殖的影响。结果NaAsO2低、中、高剂量对淋巴细胞增殖有抑制作用,荧光染色法测得凋亡率分别为10.07%、18.79%、28.35%。结论NaAsO2抑制淋巴细胞增殖,可能与其诱导凋亡有关。
- 郑玉建闫玲吴顺华张杰
- 关键词：亚砷酸钠增殖抑制淋巴细胞
