湖州市科技计划项目(2007YS15)
- 作品数：3 被引量：16H指数：3
- 相关作者：徐德顺吴晓芳韩健康查云峰胡霞清更多>>
- 相关机构：湖州市疾病预防控制中心浙江省湖州市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：湖州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 食品中沙门菌实时荧光PCR快速检测方法的研究被引量：3
- 2008年
- 目的利用荧光定量PCR技术,建立食品中沙门菌污染的快速敏感特异的检测方法。方法以沙门菌的fimY基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以沙门菌菌株提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和Mg^(2+)浓度,以沙门菌和10种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性,并初步应用于样品的检测。结果本研究建立的反应体系在引物和探针的浓度为0.8μmol/L,1.0μmol/L,Mg^(2+)浓度为3 mmol/L时,具有良好的特异性和敏感性。在10株相关菌株的检测中,除沙门菌出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性。在纯菌条件下,定量检测低限33 cfu/ml。稳定性分析表明:同一样品重复检测3次Ct值的变异系数均小于5%。检测样品结果显示实时PCR方法较传统方法敏感、快捷、简便。结论该方法特异性强,稳定性高,操作简便快捷,适应食品微生物检验发展需要,具有较大的推广及应用价值。
- 徐德顺胡霞清纪蕾
- 关键词：食品沙门菌实时荧光PCR
- 实时荧光定量-聚合酶链反应检测食品中金黄色葡萄球菌方法的研究被引量：7
- 2009年
- 目的利用实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time PCR)技术,建立食品中金黄色葡萄球菌(金葡萄)污染的快速敏感特异的检测方法。方法以金葡菌的FemB基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以金葡菌菌株提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和Mg2+浓度,以金葡菌和10种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性。并初步应用于样品的检测。结果本研究建立的反应体系在引物和探针的浓度为0.8μmol/L、0.6μmol/L,Mg2+浓度为3.5 mmol/L时,具有良好的特异性和敏感性。在10株相关菌株的检测中,除金葡菌出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性。在纯菌条件下,最低检测限为44 cfu/m。l稳定性分析表明:同一样品重复检测3次Ct值的变异系数均<5%。检测样品结果显示real-tim e PCR方法较传统方法敏感、快捷、简便。结论该方法特异性强,稳定性高,操作简便快捷,适应食品微生物检验发展需要,具有较大的推广及应用价值。
- 徐德顺韩健康吴晓芳
- 关键词：食品金黄色葡萄球菌TAQMAN探针荧光定量PCR
- 食品中副溶血弧菌实时荧光PCR快速检测方法的建立被引量：6
- 2009年
- 徐德顺吴晓芳查云峰
- 关键词：弧菌GYRB实时荧光食品
