国家自然科学基金(31200481)
- 作品数：3 被引量：17H指数：3
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- 相关机构：中南林业科技大学贵州大学更多>>
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- 马尾松胚性细胞团诱导体系优化被引量：3
- 2020年
- 【目的】马尾松胚性细胞团诱导率低一直限制着马尾松体细胞胚胎发生体系的实践应用,探讨了影响马尾松胚性细胞团诱导的几个关键因子及其效应,以期提高胚性细胞团诱导率,优化胚性细胞团诱导发生体系。【方法】以包含未成熟胚的雌配子体为外植体,LP培养基为基本培养基,探讨家系基因型、激素组合、培养基碳源及氮源等因子对马尾松胚性细胞团诱导的影响。【结果】家系基因型对马尾松胚性细胞团诱导有显著性影响,家系平均诱导率最高达17.5%,最低为0;3组激素组合的诱导率无显著差异,其中1.5 mg/L 2.4-D+1.0 mg/L 6-BA处理获得较高诱导率(14.85%);不同碳源类型及水平处理下(麦芽糖、蔗糖、葡萄糖),各家系的最佳诱导反应呈现家系与碳源类型及水平的交互效应,其中k1家系在30 g/L蔗糖处理中可获得最高诱导率(40%),而k3家系则在30 g/L葡萄糖处理中获得最高诱导率(22%),综合4个家系在不同碳源水平处理下的综合诱导效应,在30 g/L蔗糖处理中获得的平均诱导率最高(18.51%);调整培养基中的氨硝比(NH4+/NO3-)有助于胚性细胞团诱导,其氨硝比(NH4+/NO3-)的合适比例范围为0.2~0.4,平均诱导率可达14.23%,而单一性降低NH4+浓度至1/2LP浓度水平或增加培养基中NO3-浓度至3/2 LP浓度水平,诱导率分别可提高到17.86%和15.48%。【结论】马尾松胚性细胞团诱导有显著的家系效应,需选择诱导敏感型家系为实验材料来源;调整诱导培养基中碳源类型与浓度水平,同时考虑培养基中的氨硝比,对优化胚性细胞团诱导有积极作用,推荐30 g/L蔗糖为碳源,并调整培养基中的氨硝比(NH4+/NO3-)范围0.2~0.4,可提高胚性细胞团诱导率。研究结果可为提升胚性细胞团诱导率建立稳定的马尾松胚性细胞团诱导体系提供研究参考和技术支撑。
- 王杰杨模华郑力尉李朋乐陈国敏王舒祺单易婷
- 关键词：马尾松胚性细胞团基因型碳源氮源
- 蔗糖与肌醇对马尾松胚性细胞系增殖的影响被引量：3
- 2014年
- 针对马尾松胚性细胞系增殖困难的问题,本研究设定了2因素3水平的处理,分析了增殖培养基中蔗糖与肌醇对马尾松胚性细胞系增殖的影响。研究结果表明,胚性培养物的增殖倍数在9个处理间存在极显著性差异(P<0.01),并初步选出马尾松胚性细胞系增殖倍数较高的3个培养基:5号(蔗糖20 g·L-1+肌醇1.0 g·L-1)、7号(蔗糖30 g·L-1+肌醇0.1 g·L-1)和8号(蔗糖30 g·L-1+肌醇1.0 g·L-1)。胚性细胞在以上3个培养基具有不同分化发育反应,其中培养基5号中,培养基胚性细胞发育较慢;培养基7号中,胚性细胞发育较快且能形成具有完整结构的正常早期体细胞胚;在培养基8号中,胚性细胞易分化形成结构不完整、形态不正常的早期体细胞胚。综合考虑胚性细胞系增殖倍数与胚性细胞分化发育两方面的因素,在增殖培养基中添加蔗糖30 g·L-1和肌醇0.1 g·L-1的组合更适合马尾松胚性细胞系的增殖。
- 史昆杨模华李志辉张冬林丁贵杰
- 关键词：马尾松胚性细胞系蔗糖肌醇增殖
- 马尾松胚性细胞悬浮增殖培养体系的建立被引量：11
- 2014年
- 本研究利用马尾松未成熟胚诱导的胚性愈伤组织,首次建立马尾松胚性愈伤组织悬浮增殖培养体系。实验中定期对细胞生长参数沉淀细胞体积（SCV）、细胞活力进行了测定,研究了初始接种量,继代细胞密度对悬浮增殖培养体系建立的影响。研究结果表明：不同初始接种量、继代转接细胞密度显著地影响马尾松胚性细胞悬浮培养的效果;在悬浮培育过程中,胚性细胞的生长周期曲线呈＂S＂型,细胞活力呈现先急剧上升,后缓慢下降的趋势;本研究建立的马尾松胚性细胞悬浮增殖培养体系为：在30 mL的培养基中,初始接种1.0 g胚性细胞（平均增殖系数达12.097）,继代培育以1/6作为继代细胞密度,且继代周期为8～12 d为宜。本研究为优化调控马尾松体细胞胚胎发生胚性愈伤组织稳定增殖提供了技术支撑,同时为采用遗传转化及细胞融合等技术进行马尾松新品种选育奠定了研究基础。
- 史昆杨模华李志辉张冬林王茜丁贵杰
- 关键词：生物技术马尾松胚性细胞
