山东省自然科学基金(Y2001C12)
- 作品数：9 被引量：12H指数：2
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- 长期摄入不同剂量乙醇对大鼠骨骼肌G11α表达及胰岛素抵抗的影响
- 2005年
- 目的:观察G蛋白家族中G11α和Gqα mRNA在乙醇诱导下对大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的作用.方法:①实验于2003-09/2005-03在山东省立医院中心实验室完成.选用雄性Wistar健康成年大鼠40只.随机将大鼠分为4组,对照组、大剂量饮酒组、中剂量饮酒组、小剂量饮酒组,每组10只.对照组:胃管灌注蒸馏水5.0 g/(kg·d),1次/d;大、中、小剂量饮酒组:胃管灌注乙醇量5.0,2.5,0.5g/(kg·d),1次/d,每组均喂养5个月.②采用强生血糖仪测定空腹血糖和糖负荷后2 h血糖.③采用液体闪烁计数仪分别测量基础状态下、胰岛素刺激后的组织非特异吸收的2-D-3H葡萄糖量.基础状态葡萄糖摄取=单位重量基础状态肌肉计数-单位重量煮沸变性肌肉计数;胰岛素刺激后葡萄糖摄取=单位重量胰岛素刺激后肌肉计数-单位重量基础状态肌肉计数.④采用反转录聚合酶链反应法测定G11α和GqαmRNA水平.采用蛋白质印迹实验测定G11α和Gqα蛋白水平.⑤各组间比较采用单因素方差分析.结果:大鼠40只均进入结果分析.①各饮酒组大鼠空腹血糖和糖负荷后2 h血糖与对照组相近.②大、中剂量饮酒组大鼠基础状态骨骼肌糖摄取量与对照组比较,分别下降29%,72%(P＜0.05);胰岛素刺激后,分别下降27%,61%(P＜0.05);小剂量饮酒组大鼠无明显变化.③大、中、小剂量饮酒组大鼠骨骼肌G11α mRNA表达与对照组比较,分别下降57%,42%,38%(P＜0.05～0.01);Gqα mRNA表达无明显变化.④大鼠长期摄入乙醇后骨骼肌G11α和Gqα蛋白水平变化与mRNA水平变化趋势一致.结论:①乙醇喂养5个月后,大鼠机体水平上没有表现出明显的糖代谢紊乱.②摄入乙醇剂量为5.0 g/(kg·d)和2.5 g/(kg·d)5个月后,大鼠骨骼肌产生明显的胰岛素抵抗.③长期摄入乙醇可影响大鼠骨骼肌G11α表达,并呈剂量依赖性.④各饮酒组大鼠骨骼肌Gq α mRNA表达及其蛋白水平变化不明显.
- 曹铭锋高聆刘毅完强赵家军
- 关键词：乙醇胰岛素抗药性
- 长期饮酒对大鼠睾丸睾酮合成和雄激素结合蛋白mRNA表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨饮酒对大鼠睾丸组织睾酮合成和雄激素结合蛋白(ABP)mRNA表达的影响。方法雄性Wistar大鼠40只,按体重随机分为4组,每组10只,即对照组(蒸馏水5g·kg^(-1)·d^(-1));大剂量饮酒组(酒精量5 g·kg^(-1)·d^(-1));中剂量饮酒组(酒精量2.5 g·kg^(-1)·d^(-1));小剂量饮酒组(酒精量0.5g·kg^(-1)·d^(-1)),喂养时间5个月。ELISA测定睾酮含量,RT-PCR测定睾九组织外周型苯二氮革受体(PBR)、PPARα和ABP mRNA水平。结果与对照组相比,(1)大剂量饮酒组大鼠睾丸组织睾酮含量下降31.13%(P<0.05),中剂量饮酒组下降26.8%(P<0.05),小剂量饮酒组下降14.2%(P>0.05);(2)各饮酒组PBR mRNA水平明显降低(均P<0.05),PPARαmRNA水平也明显降低(均P<0.05);(3)各饮酒组ABP mRNA水平明显下降(均P<0.05)。结论长期饮酒可显著降低大鼠睾酮合成,PBR和PPARα表达降低是其可能机制之一;长期饮酒还可抑制大鼠ABP表达,影响睾酮生物学效应的发挥。
- 曹铭锋蒋进皎完强高聆刘毅赵家军
- 关键词：WISTAR
- 不同剂量乙醇对大鼠心肌糖代谢信号传递分子mRNA表达的影响
- 2007年
- 目的:观察长期摄入不同剂量乙醇对大鼠心肌糖代谢传导通路中主要信号IR、IRS1、IRS2、GLUT4、AMPKα、MEF2基因转录水平的影响,探讨乙醇影响葡萄糖转运的可能机制。方法:雄性Wistar大鼠48只,随机分为对照组、大、中、小剂量乙醇组。乙醇喂养22周,留取左心室肌于液氮中保存。采用RT-PCR检测心肌IR、IRS1、IRS2、GLUT4、AMPKα1和AMPKα2亚基、MEF2A和MEF2D亚型mRNA的表达。结果:与正常对照组相比,除低剂量乙醇组MEF2D mRNA水平无明显变化外,其它饮酒组中各观察指标表达均下降(P<0.01或P<0.05)。除IR外,各饮酒组IRS1、IRS2、GLUT4、AMPKα、MEF2A、MEF2D mRNA水平的下降程度与摄入乙醇量存在剂量依赖关系,即摄入乙醇量越大,下降越明显。相关分析表明,GLUT4 mRNA的改变与IRS1、IRS2、AMPKα、MEF2A、MEF2D的变化呈正相关,其中GLUT4的表达水平与IRS1、MEF2A有较高相关性(r=0.683,r=0.824,P<0.01)。结论:长期摄入乙醇可降低大鼠心肌糖代谢信号分子的表达。
- 侯晓磊陶迎冯丽王来成马春燕完强高聆赵家军
- 关键词：乙醇葡萄糖转运子4
- 饮酒对大鼠骨骼肌胰岛素受体及其底物表达和磷酸化的影响
- 2005年
- 观察摄入不同剂量的酒精5个月后,大鼠骨骼肌胰岛素刺激后葡萄糖摄取能力和胰岛素受体(IR)、IR底物(IRS)1及IRS-2的表达及胰岛素刺激后酪氨酸磷酸化水平的变化,发现饮酒可降低骨骼肌胰岛素刺激后糖摄取,同时伴有IR、IRS-1和IRS-2表达及酪氨酸磷酸化水平代偿性上调。
- 完强高聆刘毅赵家军
- 关键词：胰岛素敏感性WISTAR
- 长期饮酒减少大鼠睾丸间质细胞PBR和StAR蛋白表达
- 2008年
- 目的研究慢性饮酒对雄性大鼠睾丸外周型苯二氮[艹卓]类受体（PBR）和类固醇生成快速调节蛋白（StAR）表达的影响。方法以不同浓度的乙醇饲养40只Wistar大鼠20周，检测睾丸组织PBR和StAR蛋白的表达。结果慢性饮酒Wistar大鼠的睾丸曲精小管生精细胞层明显减少，管腔中可见断裂的精子鞭毛，少见完整的精子；免疫沉淀显示PBR和StAR蛋白表达下降，与对照组相比较，小、中、大剂量饮酒组PBR和StAR表达分别下降13．8％、20．9％、50．4％和34．5％、37．7％、95．2％；免疫组化显示小、中、大剂量饮酒组睾丸间质组织中的PBR和StAR表达面积分别减少33．27％、37．71％、63．59％和27．12％、51．84％、58．41％。结论慢性饮酒能降低睾丸间质PBR和StAR蛋白表达，且其与乙醇浓度呈正相关。
- 汪海东郑冬梅冯丽侯晓磊高聆赵家军
- 关键词：WISTAR
- 乙醇对人肝L02细胞糖原和GSK-3β、P-AMPK的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究乙醇对体外培养的人肝L02细胞糖原含量及糖原合成酶激酶(GSK-3β)、磷酸化的AMP激活的蛋白激酶(P-AMPK)的影响。方法培养L02细胞,按加入的乙醇浓度分为0、50和100mmol/L三组,培养24h,用蒽酮-硫酸比色法测定细胞糖原含量,蛋白免疫印记法(Western Blot)检测GSK-3β及P-AMPK的表达水平;并加入AMPK的激动剂(AICAR)或AMPK的阻断剂(Compound C),检测GSK-3β含量的变化。结果与0mmol/L组比较,50和100mmol/L组糖原含量下降、GSK-3β及P-AMPK表达增强(P均<0.05),50mmol/L组与100mmol/L组比较,糖原含量及蛋白表达均未见明显统计学差异(P>0.05);AICAR和Compound C对GSK-3β的表达无明显影响(P>0.05)。结论乙醇能减少L02细胞糖原含量,可能与GSK-3β表达增加有关。
- 于慧陈少华赵家军高聆
- 关键词：乙醇糖原蛋白激酶类
- 乙醇对大鼠骨骼肌胰岛素信号传递分子表达的影响被引量：7
- 2005年
- 目的 探讨乙醇对大鼠骨骼肌葡萄糖摄取能力和胰岛素受体 (IR)、胰岛素受体底物 1(IRS1)和胰岛素受体底物 2 (IRS2 )及葡萄糖转运体 4(glut4)表达的影响。方法 雄性Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为对照组和饮酒组 ,每组 10只。饮酒组每天乙醇灌胃 1次 ,乙醇量为 5g (kg·d) ;对照组每天蒸馏水灌胃 1次 ,蒸馏水量 5g (kg·d)。喂养时间 5个月。测大鼠空腹血糖和胰岛素、口服糖耐量 2h血糖 ;体外胰岛素刺激实验检测骨骼肌糖摄取能力 ;用RT- PCR和Westernblot法测定IR、IRS1和IRS2mRNA和蛋白表达水平 ,Real- timePCR测定glut4mRNA水平。结果 与对照组相比 :(1)饮酒组大鼠空腹血糖、空腹血胰岛素和口服糖耐量 2h血糖未见差异 ;(2 )饮酒组大鼠骨骼肌细胞基础和胰岛素刺激后糖摄取能力显著下降 (P <0 . 0 5 ) ;(3 )饮酒组大鼠骨骼肌glut4mRNA水平显著下降 (饮酒组 :△CT =5 . 3 7± 0 .2 4,对照组 :△CT =4. 86± 0 .3 1,P <0 .0 1) ;(4 )饮酒组大鼠骨骼肌IR、IRS1和IRS2mRNA及蛋白水平明显增加 (P <0 . 0 5 )。结论 长期摄入乙醇可以通过下调glut4表达而损害大鼠骨骼肌胰岛素敏感性 ,而胰岛素受体及其底物 1、2表达呈代偿性上调。
- 完强高聆刘毅王芙蓉任萌赵家军
- 关键词：分子表达胰岛素刺激2H血糖BLOT法PCR测定
- 长期酒精灌胃对大鼠肝脏糖原含量和肝组织的影响被引量：3
- 2007年
- 目的观察长期酒精灌胃对Wistar大鼠肝组织糖原含量及结构的影响。方法48只大鼠随机分4组,按酒精灌胃剂量分为A组:0.5 g/(kg.d)、B组:2.5 g/(kg.d)、C组:5 g/(kg.d)及对照D组(生理盐水等容量灌胃)进行观察比较。5个月后取肝组织,行一般性体质参数、肝组织HE染色、PAS染色及肝糖原含量(M2酶标仪,比色法)等测定。结果与对照组比较,酒精灌胃鼠的体重、肝重均有降低,B、C组降低明显;肝组织糖原定量分析显示,A、B、C 3组糖原含量均明显降低,酒精灌胃剂量与肝组织糖原含量呈明显相关性(P<0.001),大剂量C、B组糖原降低显著;HE染色显示,酒精灌胃大鼠的肝细胞脂滴空泡增大、增多,炎性细胞浸润;PAS染色显示糖原颗粒明显减少,B、C组明显。结论长期酒精灌胃明显降低Wistar大鼠肝细胞内糖原储备水平,造成的肝细胞脂肪变及炎性病变对肝组织结构有明显的损伤作用。
- 陈少华赵家军冯丽侯晓磊张伟于慧高玲
- 关键词：肝组织糖原WISTAR大鼠
- 长期酒精灌胃对大鼠肝GSK-3β及AMPK水平的影响
- 2010年
- 目的探索长期饮酒对大鼠肝内糖原合成酶激酶-3(GSK-3)、磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响。方法用AMPK激动剂(AICAR)注射大鼠,观察其对糖原、GSK-3β、AMPK的影响。取Wistar大鼠48只,随机分为A、B、C、D组,给予酒精灌胃,对应酒精剂量分别为5g/kg.d、2.5g/kg.d、0.5g/kg.d及0(生理盐水),20周后取其肝组织测GSK-3β、AMPK(AMPKα,P-AMPKα)、GLUT4蛋白和AMPK、GLUT4mRNA的表达以及切片组织GSK-3β的荧光表达。结果注射AICAR大鼠的肝糖原含量增高,GSK-3β、AMPK也较原水平有所变化。服酒精各组GSK-3β荧光信号强,A组更明显,蛋白表达增强;而酒精各组P-AMPKα蛋白表达均明显降低(P均<0.01);GLUT4mRNA和蛋白也降低(P均<0.05)。结论大鼠长期酒精灌胃可能影响GSK-3β、AMPK水平,继而降低肝糖原水平。
- 陈少华于慧王汝霞冯丽张伟赵家军高聆
- 关键词：酒精糖原合成酶激酶-3糖原
