国家自然科学基金(30572054)
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 相关作者：李江张志愿田臻张春叶李蕾更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院上海市口腔医学重点实验室廊坊市人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会科研基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 涎腺腺样囊性癌细胞系中DNA甲基化研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨涎腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)细胞系中抑癌基因甲基化状况及其与 mRNA、蛋白表达之间的关系。方法甲基化特异性 PCR 法检测 ACC 细胞系 ACC-2、ACC-3、ACC-M 中 E-钙黏着蛋白(E-cadherin,E-cad)、p16、RASSF1A、DAPK、MGMT 基因启动子区的甲基化状况。应用 RT-PCR 方法和免疫组织化学方法检测 E-cad、p16在 mRNA 和蛋白水平的表达。结果 3个 ACC 细胞系中均检测到 E-cad、p16基因的甲基化,而没有 RASSF1A、DAPK、MGMT 基因的甲基化;mRNA 和蛋白水平均未检测到 E-cad 的表达,均检测到 p16的表达。结论 ACC 细胞系中,E-cad、p16基因启动子区的甲基化是常见事件,甲基化可能是 E-cad 基因失活的主要机制之一。
- 张春叶周晓健张志愿李江
- 关键词：涎腺DNA甲基化
- 正常涎腺组织中E-cadherin，p16，RASSF1 A，DAPK和MGMT基因甲基化检测
- 2013年
- 目的检测组织学正常的涎腺组织中5个抑癌基因的甲基化情况,为进行涎腺肿瘤的甲基化研究提供参照。方法甲基化特异性PCR(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)法分析60例组织学正常的涎腺组织中E-钙黏蛋白(cadherin),p16,RASSF1A,DAPK和MGMT基因启动子区的甲基化水平,并与前期研究中涎腺腺样囊性癌中的甲基化水平相比较,同时分析正常涎腺组织中E-cadherin(E-cad),p16,RASSF1A,DAPK和MGMT基因的甲基化与患者的性别、年龄及吸烟之间的关系。结果 13%(8/60)涎腺组织中发现存在甲基化,包括7%(4/60)E-cad,4%(2/60)p16,4%(2/60)RASSF1A,4%(2/60)DAPK,2%(1/60)MGMT。与之前腺样囊性癌中的结果比较,E-cad(P<0.01),p16(P<0.01),RASSF1A(P<0.01),DAPK(P<0.01)基因的甲基化在肿瘤组织及腺体组织中有明显差异。但涎腺组织中E-cad,p16,RASSF1A,DAPK和MGMT基因的甲基化与患者的性别、年龄及吸烟均无明显的相关性。结论正常的涎腺组织中E-cad,p16,RASSF1A,DAPK和MGMT基因的甲基化均为少发事件。
- 张春叶邓旭霞周美娟余宏男李蕾傅涵冰李江
- 关键词：E-钙黏蛋白RASSF1ADAPK
- 非编码核糖核酸与头颈部恶性肿瘤
- 2008年
- 非编码核糖核酸是一类具有重要生物学功能的核酸分子。目前,学术界仅对少数非编码核糖核酸的特性及其在细胞内的调控作用等有一定的认识,而对其他更多种类的非编码核糖核酸及其具体的生物学作用依然不甚明了。下面就非编码核糖核酸的主要分类、生物学意义和功能,以及非编码核糖核酸参与头颈部恶性肿瘤的发生及其在头颈部恶性肿瘤诊断、治疗中的应用作一简要综述。
- 黄枫豪李江
- 关键词：头颈部恶性肿瘤肿瘤发生
- 正常和腺样囊性癌涎腺中赖氨酸18位点乙酰化组蛋白H3表达的研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨赖氨酸18位点(lysine 18 site,lys18)乙酰化组蛋白H3(acetyl-histone H3)在涎腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)和正常涎腺中表达的意义。方法免疫组织化学Envision二步法检测60例ACC和49例正常涎腺中lys18乙酰化组蛋白H3的表达,分析其与ACC发生部位、组织学分级、临床分期、神经侵犯等肿瘤临床病理特征的关系。结果正常涎腺中导管细胞、腺泡细胞以及ACC肿瘤细胞中均有lys18乙酰化组蛋白H3阳性表达,表达位于细胞核。但lys18乙酰化组蛋白H3在ACC中的表达显著低于正常涎腺(χ2=46.745,P=0.000 1),且其表达与ACC的临床病理特征没有相关性(P>0.05)。结论组蛋白H3 lys18低乙酰化可能与ACC的肿瘤发生有关。
- 周荣睿韦晓玲汪黎明黄云亮李江
- 关键词：腺样囊性癌涎腺组蛋白乙酰化
- DNA甲基转移酶1抑制对涎腺腺样囊性癌细胞生长、侵袭及转移的影响
- 2009年
- 目的研究DNA甲基转移酶1（DNA methyltransferases 1，DNMT-1）表达抑制对涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma，SACC）细胞体内、体外的生物学影响，探讨DNMT-1在SACC发生、侵袭及转移中的作用。方法对前期实验建立的DNMT-1表达稳定抑制的ACC-M细胞（实验干扰组）、空载对照ACC—M细胞系（空载对照组）及ACC—M细胞系（空白对照组），在体外分别应用甲基噻唑基四唑（MTT）法生长曲线分析、流式细胞周期分析、平板克隆实验、体外侵袭能力分析等方法，体内对裸鼠皮下、尾静脉注射肿瘤细胞，综合分析评估DNMT-1表达抑制对ACC—M细胞体内增殖、侵袭及转移的影响。结果实验干扰组细胞倍增时间延长[（34．7±2．1）h]、细胞周期S期比例[（17．4±1．7）％]、克隆形成率[（43．0±1．3）％]降低，与空白对照组[分别为（26．2±3．1）h、（31．5±2．0）％、（71．0±4．7）％]及空载对照组[分别为（28．4±3．9）h、（39．0±2．0）％、（66．0±5．2）％]差异有统计学意义（P〈0．05）；各组体外侵袭能力的差异无统计学意义（P〉0．05）；体内DNMT-1表达稳定抑制的ACC—M细胞，其皮下成瘤率（6／10）、瘤体体积[（2．18±0．83）mm^3]、重量[（O．0156±0．0046）g]均显著低于空白对照组[分别为10／10，（155．44±1．67）mm^3、（0．0724±0．0157）g]及空载对照组[分别为10／10、（147．46±1．73）mm^3、（0．0729±0．0177）g]，差异均有统计学意义（P〈0．05）；各组的肺转移率差异无统计学意义（P〉0．05）；DNMT-1表达稳定抑制的ACC-M细胞，其肺转移瘤的个数[（2．0±0．5）个]、直径[（70．0±20．3）μm]均显著低于空白[（28．0±5．5）个、（195．0±25．4）μm]及空载（27．0±4．5）个、（190．0±19．9）μm]对照组，P〈0．05。结论抑制DNMT-1的表达能有效降低ACC细胞的生长、增殖及转移能�
- 黄枫豪田臻张春叶夏荣辉李江
- 关键词：肿瘤转移DNA甲基转移酶1
- 人工合成小干扰RNA抑制涎腺腺样囊性癌DNA甲基转移酶1的表达被引量：1
- 2007年
- 目的通过筛选针对涎腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)DNA 甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT-1)基因有效的小于扰 RNA(small interfering RNA,siRNA)序列和分析 RNA 干扰(RNA interference,RNAi)作用的时效、量效关系,为建立 ACC 稳定抑制 DNMT-1的表达载体,深入了解 DNMT 在 ACC 抑癌基因甲基化过程中的作用。方法设计并人工合成4对siRNA,脂质体介导分别转染 ACC 细胞系 ACC-2、ACC-3和 ACC-M 细胞,分别于转染后24、48和72 h,采用 PCR、RT-PCR 和 Western blot 方法检测各细胞系 DNMT-1的 mRNA 和蛋白表达,筛选有效的siRNA 干扰序列,同时设置 siRNA 不同浓度转染组,分析 RNAi 作用的量效关系。以 Cy3标记甘油醛-3-磷酸脱氢酶 siRNA 作为阳性对照组。结果 2对 siRNA 对3株 ACC 细胞系细胞 DNMT-1的 mRNA表达产生了抑制作用,它们分别使 ACC-2、ACC-3、ACC-M DNMT-1表达抑制67%、86%、92%和76%、76%、86%,抑制作用出现的时间为转染后24～48 h,维持24～48 h,与 siRNA 浓度成正比,Westernblot 检测符合 mRNA 的检测结果。结论得到了2对针对 ACC DNMT-1基因有效的 siRNA 干扰序列。它们能显著抑制涎腺 ACC 细胞系 DNMT-1的 mRNA 和蛋白表达,该抑制作用具有时间依赖性和浓度相关性。
- 田臻张志愿叶冬霞周晓健李江
- 关键词：甲基转移酶肿瘤抑制
- 涎腺腺样囊性癌DNA甲基转移酶与抑癌基因甲基化被引量：9
- 2006年
- 目的通过对DNA甲基转移酶(DNMT)在涎腺腺样囊性癌(ACC)中表达的检测,分析DNMT与ACC抑癌基因甲基化、生物学行为的相关性,探讨DNMT在ACC发生、发展中的作用。方法对60例ACC临床病理标本进行DNMT1、DNMT3b的免疫组化染色,显微镜观察,将观察结果与p16、RASSF1A、DAPK、MGMT、E-cadherin多个抑癌基因的甲基化状况、病理分级、临床分期进行比较,应用Fisher确切概率法进行统计学分析。结果①DNMT1在ACC中的阳性表达程度明显高于DNMT3b的阳性表达(P<0．01)。②DNMT1阳性表达随发生甲基化的抑癌基因个数的增加而增加,DNMT1高、低表达组与抑癌基因高、低甲基化组之间差异有统计学意义(P<0．05),与RASSF1A基因的甲基化呈相关性(P<0．01)。③DNMT1的阳性表达程度与ACC病理分级(P<0．05)、临床分期(P< 0．01)呈正相关,实性成分越多、分期越晚,表达越高。④未发现DNMT3b与抑癌基因的甲基化状况、病理分级、临床分期间的相关性。结论DNMT1可能是ACC体内对维持抑癌基因甲基化起主导作用的甲基化酶,与RASSF1A基因的甲基化、ACC病理分级、临床分期有相关性,在ACC的发生、发展中扮演着重要角色,有可能作为肿瘤预后的评估指标之一。
- 田臻张志愿李蕾李江
- 关键词：甲基化
