国家自然科学基金(81050020)
- 作品数：7 被引量：41H指数：4
- 相关作者：刘艳丽伍伟锋陈德伟林风辉陈明光更多>>
- 相关机构：广西医科大学第一附属医院福建医科大学广西医科大学更多>>
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- MicroRNA-21和146b在病毒性心肌炎小鼠中的表达和意义被引量：10
- 2014年
- 目的:研究小鼠病毒性心肌炎(VMC)模型中microRNA-21(miR-21)和microRNA-146b(miR-146b)基因表达,探究其在VMC发病中的变化及意义。方法:用柯萨奇病毒B3(CVB3)建立Balb/c VMC小鼠模型,实验组注射100TCID 50病毒液0.1ml,对照组注射等量磷酸盐缓冲液。在注射的第0、1、2、4周分别采用实时定量PCR法检测2组小鼠心肌组织miRNA-21和miR-146b表达水平。结果:与对照组比较,实验组小鼠心肌组织miR-21和miR-146b水平自第1周开始稳定表达,第2周时达峰值,并至少维持至第4周;实验组各时间点的表达量均高于对照组相应时间点(均P<0.05)。结论:miR-21和miR-146b在VMC小鼠心肌组织中表达明显增高,提示miR-21和miR-146b可能参与了VMC的发病过程。
- 刘艳丽伍伟锋
- 关键词：心肌炎MICRORNAMIR-21
- 微小RNA-21在小鼠慢性病毒性心肌炎心肌纤维化中的作用被引量：16
- 2018年
- 目的研究微小RNA-21（miR-21）对小鼠慢性病毒性心肌炎（CVMC）心肌纤维化的影响及其可能机制。方法雄性4周龄Balb/c小鼠40只按照随机数字表法分为磷酸盐缓冲液（PBS）组、CVMC组、CVMC＋miR-21抑制剂组和CVMC＋同型对照组，每组各10只。首次注射柯萨奇B3病毒（CVB3）液或PBS定为第0天，研究总时间为42 d。CVMC组、CVMC＋miR-21抑制剂组和CVMC＋同型对照组的小鼠均于第0、14和28天经腹腔注射100TCID50的CVB3液0.1、0.15和0.2 ml/只，同时点PBS组小鼠注射相同剂量的PBS。CVMC＋miR-21抑制剂组和CVMC＋同型对照组小鼠在第14和28天注射病毒液后分别经尾静脉注射miR-21抑制剂0.1 ml/只或同型对照0.1 ml/只。42 d后行超声心动图检查评估小鼠心功能，然后无菌留取小鼠心脏，观察心肌绿色荧光蛋白（GFP）的表达，同时行苏木素伊红及Masson染色观察心肌病理学特征，并计算心肌病理积分（PS）及胶原容积积分（CVF），实时荧光定量逆转录聚合酶链反应测定小鼠心肌中miR-21、Ⅰ型胶原（COL1-A1）及Ⅲ型胶原（COL3-A1）mRNA的表达，Western blot法测定心肌中转化生长因子-β1（TGF-β1）和母亲DPP同源物7（Smad7）蛋白的表达。结果（1）超声心动图检查结果：CVMC组和CVMC＋同型对照组小鼠左心室收缩末期内径（LVESD）、左心室舒张末期内径（LVEDD）均明显高于PBS组（P均〈0.05），左心室射血分数（LVEF）明显低于PBS组（P〈0.05）。CVMC＋miR-21抑制剂组小鼠LVESD、LVEDD均低于CVMC组和CVMC＋同型对照组（P均〈0.05），LVEF明显高于CVMC组和CVMC＋同型对照组（P均〈0.05）。（2）心肌病理学检测结果：CVMC＋miR-21抑制剂组和CVMC＋同型对照组小鼠心肌切片在荧光显微镜下可见GFP表达。CVMC组和CVMC＋同型对照组小鼠心脏肿大僵硬，镜下可见心肌散在坏死灶，周围少量炎性细胞浸润，间质成纤维细胞增生明显，胶�
- 薛贻敏陈明光陈德伟伍伟锋刘艳丽林风辉
- 关键词：心肌炎心肌纤维化微小RNA-21
- MicroRNA-21与自身免疫性疾病的研究进展被引量：2
- 2014年
- 微小RNA（microRNAs，miRNAs）是一类内源性的单链非编码小RNA，长度约16～25个核苷酸。它们通过与靶信使RNA的3’UTR碱基互补配对，形成RNA诱导沉默复合体（RNA—inducedsilencingcomplex，RISC），抑制蛋白质的翻译或促进信使RNA分解，从而对靶基因的表达起着反向调节作用。研究发现，miRNAs与免疫系统疾病密切相关。microRNA一21在自身免疫性疾病方面的作用已引起广泛关注。本文主要对microRNA一21与自身免疫性疾病关系研究进展进行综述。
- 刘艳丽伍伟锋
- 关键词：MICRORNAS自身免疫性疾病MICRORNA-21
- microRNA-451和辅助性T淋巴细胞17亚群在病毒性心肌炎小鼠中的变化及意义被引量：5
- 2014年
- 目的通过观察microRNA-451(miR-451)及辅助性T淋巴细胞17(Th17)亚群在病毒性心肌炎小鼠中的变化,进一步探讨其在病毒性心肌炎小鼠发病过程中的作用及意义。方法实验组注射柯萨奇病毒B3病毒液0.1 mL建立Balb/c病毒性心肌炎小鼠模型,对照组注射等量磷酸盐缓冲液。在注射后第0、7、14和28天流式细胞法检测小鼠脾脏Th17亚群比例(Th17/CD4+),荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测心肌组织中miR-451的表达量。结果实验组7 d亚组小鼠脾Th17/CD4+高于0 d亚组,28 d亚组最高,与对照组相应时点亚组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组7 d亚组小鼠心肌miR-451的表达量低于0 d亚组,14 d亚组小鼠心肌miR-451的表达量最低,28 d亚组心肌miR-451的表达量较14 d亚组增高。除0 d组外,实验组各亚组miR-451表达水平均较对照组各相应时点明显降低(均P<0.05)。miR-451的表达与Th17亚群比例无相关(r=-0.26,P>0.05)。结论 miR-451和Th17参与了病毒性心肌炎的发病过程。miR-451参与病毒性心肌炎小鼠的发病过程并不依赖于Th17的变化。
- 刘艳丽伍伟锋
- 关键词：病毒性心肌炎
- MicroRNA-146b在病毒性心肌炎小鼠血清中的表达及其意义被引量：1
- 2015年
- 目的研究病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠血清micro RNA-146b(mi R-146b)浓度,探究其在VMC发病中的变化及其意义。方法用柯萨奇病毒B3(CVB3)建立Balb/c VMC小鼠模型,实验组注射100 TCID50病毒液0.1 m L,对照组注射等量磷酸盐缓冲液。在注射的第0、1、2、4和6周分别采用实时定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测两组小鼠血清mi R-146b浓度,同时用酶联免疫吸附试验法检测血清中白细胞介素(interleukin,IL)-17和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的浓度。结果实验组相应时间点小鼠血清mi R-146b浓度均高于对照组,差异均有统计意义(P<0.05)。血清mi R-146b浓度和血清IL-17与TNF-α浓度呈正相关(r=0.37,P<0.05;r=0.68,P<0.05)。结论 mi R-146b在VMC小鼠血清中表达明显增高,与IL-17和TNF-α呈正相关,提示循环中的mi R-146b可能通过IL-17和TNF-α而参与了VMC的发病过程。
- 刘艳丽伍伟锋
- 关键词：心肌炎MICROMI
- 小鼠microRNA-21慢病毒抑制载体的构建及鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的构建microRNA-21(miR-21)慢病毒抑制载体,为研究miR-21在小鼠体内的功能及作用机制打下基础。方法利用miR-21前体并将其克隆入LV3pGLV-H1-GFP质粒中,经酶切及测序鉴定,利用脂质体将鉴定的阳性重组LV3pGLV-H1-GFP-miR-21抑制载体、PG-P1-VSVG和pCMV-dR3个质粒转染到HEK-293T细胞,将所得病毒感染293T细胞,检测病毒滴度,并将制备的病毒颗粒感染乳鼠心肌细胞和尾静脉注射小鼠,检测miR-21在小鼠体内的表达。结果酶切及测序结果证明成功构建了LV3pGLV-H1-GFP-miR-21重组质粒,并成功包装成慢病毒,病毒滴度为2.4×109TU/ml,重组病毒成功感染心肌细胞,同时在Balb/c小鼠心脏有表达。结论成功构建miR-21慢病毒抑制载体,获得高效表达miR-21的慢病毒颗粒,为miR-21的进一步研究奠定了基础。
- 覃玉桃刘艳丽伍伟锋
- 关键词：MICRORNA绿色荧光蛋白
- TGF-β、IL-6和IL-17在小鼠病毒性心肌炎中的表达被引量：9
- 2013年
- 目的:研究转化生长因子-β(TGF-β)、白介素6(IL-6)及白介素17(IL-17)在小鼠病毒性心肌炎(VMC)中的动态变化,初步探讨其在VMC中的作用及其意义。方法:建立VMC模型,在不同时间点(0、1、2、4、6周)处死小鼠,RT-PCR检测其心肌组织TGF-β、IL-6和IL-17mRNA表达,酶联免疫双夹心抗体法检测血浆蛋白表达。结果:与对照组比较,实验组小鼠TGF-β、IL-6和IL-17mRNA和蛋白水平自1周开始升高,TGF-β和IL-6在2周时达峰值,IL-17在4周时达峰值,实验组各时间点均高于对照组各时间点(P<0.05)。结论:TGF-β、IL-6和IL-17在VMC小鼠心肌组织中高表达,提示TGF-β、IL-6和IL-17参与了VMC的发病过程。
- 刘艳丽伍伟锋薛贻敏高梦莎
- 关键词：心肌炎柯萨奇病毒白介素-17转化生长因子-Β白介素-6
