江西省自然科学基金(201221AB205025)
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
- 相关作者：万腊根胡意魏丹丹张世锟徐群飞更多>>
- 相关机构：南昌大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 体外定点突变PCR法构建abl T315I突变的重组质粒标准品被引量：1
- 2013年
- 目的利用聚合酶链反应(PCR)定点突变技术构建含人类abl基因第6号外显子片段的野生型及含T315I突变型重组质粒,作为检测abl T315I基因突变的阳性对照和阴性对照标准品。方法先设计包括突变位点的两对引物,以健康人外周血基因组DNA为模板,扩增获得野生型和突变型abl基因第6号外显子片段,将其插入pSG5M-flag载体质粒中,并将所获重组质粒分别进行酶切与测序鉴定,通过紫外分光光度计检测标本的浓度和纯度。结果DNA测序表明在预期位点上发生突变,abl基因第315位氨基酸密码子由苏氨酸(Thr)残基突变为异亮氨酸(Ile)残基,所构建abl基因野生型和突变型质粒,经酶切和测序鉴定与目的片段完全一致。结论PCR技术诱导定点突变准确、高效。所构建含野生型和T315I突变的abl基因重组质粒,可为检测abl基因T315I突变提供阴性和阳性对照以及质控品,同时也为T315I突变的相关研究奠定了基础。
- 石淙张长林简正伟江梅闻芳万腊根
- 关键词：定点突变阳性对照
- 尿液干化学和尿有形成分分析显微镜复检规则的建立与验证被引量：7
- 2013年
- 目的建立尿干化学分析和尿干化学联合尿有形成份分析仪作尿液分析的显微镜复检规则。方法通过对1039份尿液标本同时作尿干化学分析、尿沉渣分析和显微镜镜检,参考显微镜镜检阳性标准确定各项设定的镜检规则的真阳性率、假阳性率、真阴性率和假阴性率。结果Uritest-500B分析尿PRO、BLD、WBC、NIT四项联合镜检规则的真阳性率、假阳性率、真阴性率、假阴性率分别为95.33%、27.13%、72.87%、4.67%;UF-1000i作尿沉渣RBC、WBC、CAST三项联合镜检规则的真阳性率、假阳性率、真阴性率和假阴性率分别为96.20%、55.57%、44.43%、3.80%;Uritest-500B联合UF-1000i建立的镜检规则作尿液分析时,其真阳性率、假阳性率、真阴性率和假阴性率分别为95.97%、54.43%、45.57%、4.03%。结论PRO、BLD、WBC、NIT阳性要求镜检可作为Uritest-500B作尿液分析时的镜检规则;RBC、WBC、CAST超出参考区间可作为UF-1000i作尿沉渣分析时的镜检规则;规则1、规则2和规则3三者联合可作为尿干化学仪和尿沉渣分析仪联合作尿液分析时的镜检规则。
- 徐群飞魏丹丹张世锟胡意万腊根
- 关键词：尿分析化学分析显微镜检查尿沉渣分析仪
