中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010JB04)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 相关作者：李泽君颜丕熙姬希文张七斤李雪松更多>>
- 相关机构：天津市生机集团股份有限公司中国农业科学院上海兽医研究所内蒙古农业大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达被引量：9
- 2012年
- 本研究利用RT-PCR方法扩增鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)奉贤株(FX2010)的结构蛋白E基因,并将其克隆至原核表达载体pET32a(+),构建重组表达质粒pET32a-E。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导进行表达。SDS-PAGE和Western blot试验检测结果表明,E基因在大肠杆菌中得到了表达,并且可与抗DTMUV的多克隆抗体发生特异性反应。E基因的成功表达为DTMUV的诊断试剂盒、疫苗等的研制奠定基础。
- 姬希文李雪松边延峰李国新颜丕熙张七斤李泽君
- 关键词：E基因克隆
- 高增殖性能犬流感CIV-PR8重组病毒的制备被引量：2
- 2012年
- 为获得高效表达犬流感病毒(CIV)HA和NA抗原的疫苗株,本实验通过反向遗传操作技术将A/canine/Zhejiang/01/2010(H3N2)犬流感病毒(简称ZJCIV)的HA和NA基因与A/Puerto Rico/8/34(H1N1)病毒(PR8)的6个内部基因进行重组,拯救并获得了一株重组病毒CIV-PR8。分别用含100 EID50的CIV-PR8和ZJCIV感染SPF鸡胚,含2×103TCID50的CIV-PR8和ZJCIV感染MDCK细胞,不同时间段取病毒样品测定血凝效价和TCID50值。两者比较表明,CIV-PR8分别在接种后36 h和48 h时血凝效价达到峰值,鸡胚尿液中效价可达210,为野生病毒株的16倍;细胞上清血凝价可达28,为野生病毒株的4倍;病毒增殖曲线表明通过鸡胚扩增和细胞扩增,CIV-PR8的滴度均高于野生病毒株ZJCIV。结果表明,拯救的CIV-PR8增殖能力明显高于野生病毒株ZJCIV,该重组病毒有望成为犬流感疫苗研制的候选病毒株。
- 周洁文滕巧泱闫丽萍边延峰张旭徐大伟石迎周雨霞李泽君
- 关键词：血凝效价病毒滴度
