北京市自然科学基金(7072085)
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
- 相关作者：栗占国苏茵周云杉代琛贤孙晓云更多>>
- 相关机构：北京大学北京肿瘤医院欧蒙医学实验诊断股份公司更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人肌纤生成调节因子1真核表达载体的构建及其在乳鼠心肌细胞中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建人肌纤生成调节因子1全长的真核表达质粒,并观察其在HEK293T细胞系及Sprague-Daw-ley乳鼠心肌细胞中的表达。方法从NCBI GenBank数据库中克隆得到人肌纤生成调节因子1基因(AF417001)全长序列,与真核表达载体质粒pcDNA3.1/Myc-His(-)B连接并转化大肠杆菌XL1-Blue,筛选阳性克隆,T7引物测序,转染细胞后以逆转录聚合酶链反应、Western Blotting方法检测人肌纤生成调节因子1的表达。结果pcDNA3.1/Myc-His(-)B-hMR-1质粒经测序证实目的基因序列正确,无碱基突变。该质粒转染到HEK293T细胞系和乳鼠心肌细胞后人肌纤生成调节因子1的转录水平及表达水平明显增高。结论成功构建了人肌纤生成调节因子1全长的真核表达载体并确定了简便有效的乳鼠心肌细胞瞬时转染方法。
- 王晓礽刘秀华李婷韩文玲
- 关键词：质粒构建乳鼠心肌细胞
- 神经相关性自身抗体检测在神经精神性狼疮中的意义被引量：1
- 2008年
- 目的探讨神经相关性自身抗体在系统性红斑狼疮（SLE）和神经精神性狼疮（NPSLE）患者血清或脑脊液中的敏感性和特异性，评价其在NPSLE诊断中的意义。方法利用间接免疫荧光法分别以成神经瘤细胞株（SK—N—SH）、神经胶质瘤细胞株（U251）以及C57BL／10小鼠的大脑及脊髓切片为底物检测121例s㈨患者、34例疾病对照组和34名健康对照组的血清及24例NPSLE患者和22例疾病对照组的脑脊液中抗神经元细胞抗体、抗神经胶质细胞抗体、抗脑抗体及抗脊髓抗体。结果SLE患者血清中抗神经元细胞抗体、抗脑抗体及抗脊髓抗体的阳性率（17．4％、25．6％和29．8％）明显高于类风湿关节炎（RA）患者以及正常对照组（P〈0．05或P〈0．01），在SLE诊断中的特异性分别为98．5％、95．6％和100％；抗神经元细胞抗体、抗脑抗体及抗脊髓抗体均与SLE疾病活动性指数（SLEDAI）积分呈正相关，并与NPSLE患者的癫痫发作、头痛、急性意识障碍以及情绪失调、焦虑等症状的发生有关；NPSLE患者血清的抗神经元细胞抗体、抗脑抗体和抗脊髓抗体的阳性率（27．8％、38．9％和61．1％）明显高于无中枢神经系统受累的SLE患者（P〈0．05或P〈0．01）；NPSLE患者的脑脊液中抗脑抗体、抗脊髓抗体的阳性率均为29．2％，与疾病对照组比较，差异具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；在NPSLE诊断中的特异性分别为100％和95．5％。结论抗神经元细胞抗体、抗脑抗体及抗脊髓抗体对SLE诊断的特异性较高，但敏感性偏低；3种抗体均与SLE疾病活动性相关；血清中抗神经元细胞抗体、抗脑抗体及抗脊髓抗体是NPSLE诊断的较特异性抗体，抗脊髓抗体可能是诊断NPSLE较敏感的指标之一；脑脊液中的抗脑抗体、抗脊髓抗体对NPSLE的诊断更具有特异性。
- 邵晓凤李永哲苏茵赵卫崔巍粟占国
- 关键词：红斑狼疮神经精神性狼疮间接免疫荧光法
- 干扰素调节因子5在系统性红斑狼疮的表达及临床相关性研究被引量：1
- 2008年
- 目的比较干扰素调节因子5（IRF5）mRNA在系统性红斑狼疮（SLE）患者和健康对照组的表达水平，分析IRF5表达与SLE疾病活动性及自身抗体和临床症状的相关性。方法Fico11密度梯度离心法分离SLE患者及健康对照外周血单个核细胞（PBMC）,Trizol法分离提取总RNA，反转录mRNA为cDNA；实时定量聚合酶链反应（PCR）法测定SLE患者和正常对照组IRF5表达量；并分析SLE患者IRF5表达量与疾病活动性及临床症状的相关性。结果SLE组1RF5表达量（2．1±2．2）高于正常对照组（1．5±1．2），但差异无统计学意义（P=0.161）；SLE患者IRF5表达量与其疾病活动指数（SLEDAI）显著相关（r=0．616，P〈0.01）；SLE患者中抗dsDNA抗体阳性组IRF5表达量（3．2±2．8）明显高于抗体阴性组（1．3±1．6），差异有统计学意义（P=-0.018）；SLE患者有发热、神经精神症状者IRF5表达量明显高于无此类临床症状者。结论IRF5在SLE患者中表达偏高，且与SLEDAI显著相关，其可能通过调节下游基因的转录表达诱导免疫失调，并由此参与SLE的发病过程。
- 代琛贤孙晓云贾汝琳苏茵栗占国
- 关键词：红斑狼疮干扰素-Α
- 血小板减少的系统性红斑狼疮患者骨髓巨核细胞数量与临床特点的关系被引量：3
- 2012年
- 目的分析血小板减少的系统性红斑狼疮（SEE）患者的临床、实验室特点，探讨骨髓巨核细胞数量对患者临床特征的影响。方法回顾性分析北京大学人民医院住院102例血小板减少的SLE患者，以无血小板减少的140例SLE患者为对照，比较2组在器官受累、疾病活动度、骨髓象、免疫学特征及疗效方面的差别。统计学方法采用r检验和t检验。结果75例患者血小板减少发生在SLE确诊前后1年之间。血小板减少发生在SLE确诊前的患者中，血小板下降程度更为显著。有血小板减少的SLE患者脏器受累比例较高，主要包括神经系统和肺，但2组在总体SLE疾病活动指数（SLEDAI）评分方面的差异无统计学意义。根据骨髓巨核细胞数量分组，16例患者巨核细胞减少，无巨核细胞减少的患者34例。巨核细胞减少组的患者无论在疾病活动度、脏器受损等临床特点方面与无巨核细胞减少组差异无统计学意义。血小板减少的近期治疗效果也与骨髓巨核细胞数量无相关性。结论合并血小板减少的SLE患者容易合并其他重要脏器受损。
- 刘栩贾园周云杉任立敏张学武苏茵栗占国
- 关键词：红斑狼疮血小板减少巨核细胞疾病活动度
- 慢性移植物抗宿主病狼疮小鼠模型免疫学特征分析被引量：5
- 2008年
- 目的：诱导及鉴定慢性移植物抗宿主病（cGVHD）狼疮小鼠模型,分析其肾病变特点及狼疮相关免疫学特征。方法：选取6 -8周龄（C57BL/10×DBA/2）F1雌性小鼠,随机分为两组,模型组12只,对照组7只,分别于第0、3、8天经尾静脉注射DBA/2雌鼠胸腺和脾的淋巴细胞（模型组）或磷酸盐缓冲液（对照组）。利用考马斯亮蓝法监测小鼠尿蛋白变化;检测小鼠血清的抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体、抗核小体抗体及抗可提取核抗原（ENA）抗体;利用流式细胞技术分析CD4＋CD25＋调节T细胞的变化;应用实时定量PCR法测定两组小鼠外周血单个核细胞（PBMC）中Foxp3的表达量;于12周末分别用PAMS染色及直接免疫荧光法检测小鼠的肾病理变化。结果：模型组小鼠的尿蛋白自第6周明显增高,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。模型组小鼠血清中ANA抗体阳性率于第8、12周时明显高于对照组;随小鼠周龄增加,模型组小鼠抗dsDNA抗体及抗核小体抗体的滴度增高,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。12周时模型组外周血CD4＋CD25＋调节T细胞的比例明显低于对照组（P=0.002）,但两组间外周血PBMC Foxp3的表达量差异无统计学意义（P〉0.05）。模型组小鼠肾病理的PASM染色可见典型狼疮肾炎病理改变,直接免疫荧光检测可见IgG广泛沉积;而对照组小鼠肾无以上表现。结论：cGVHD模型鼠不仅出现了类似人类狼疮肾炎的尿蛋白变化,血清中还出现多种自身抗体,CD4＋CD25＋调节T细胞明显异常,其肾病理呈典型的狼疮肾炎改变。因此,cGVHD模型鼠可作为一种比较好的系统性红斑狼疮相关基础研究及新疗法的动物模型。
- 代琛贤孙晓云苏茵栗占国
- 关键词：移植物抗宿主病
- 淋巴瘤患者血清中抗磷脂自身抗体的临床及免疫学意义被引量：6
- 2011年
- 目的了解淋巴瘤患者血清中抗磷脂抗体（APL）的阳性率及水平，探讨抗磷脂抗体淋巴瘤患者中的临床和免疫学意义。方法应用ELISA法检测129例淋巴瘤、46例系统性红斑狼疮（SLE）、38例类风湿关节炎（RA）、24例原发性干燥综合征（pSS）及58名健康对照的血清中的抗心磷脂抗体IgG／M／A和抗B：糖蛋白I抗体IgG／M／A，分析其与淋巴瘤患者一般情况、临床特点、免疫学表型及血栓事件的关系。结果（1）抗磷脂抗体在淋巴瘤患者血清中的阳性率为40．3％（52／129），其中抗心磷脂抗体阳性率11．6％（15／129），抗p2糖蛋白I抗体阳性率32．6％（42／129）。抗心磷脂抗体及抗β2糖蛋白I抗体在淋巴瘤患者血清中的水平及阳性率均明显高于健康对照组（P〈0．05），而与SLE、RA、pSS组的抗体水平相仿（P〉0．05）。（2）T或NK／T细胞淋巴瘤中抗磷脂抗体阳性率明显高于B细胞淋巴瘤（P〈0．05）。（3）抗磷脂抗体阳性与阴性的淋巴瘤患者中血栓事件的发生率差异无统计学意义。（4）抗磷脂抗体阳性淋巴瘤患者的无事件生存时间短于抗磷脂抗体阴性者。结论抗磷脂抗体在淋巴瘤患者血清中的阳性率及抗体水平均较健康人群明显升高，与SLE等自身免疫病患者无明显差别。抗磷脂抗体多见于T或NK／T细胞来源的非霍奇金淋巴瘤。抗磷脂抗体可能与淋巴瘤患者的无事件生存时间有关。
- 周云杉应志涛李茹朱军栗占国
- 关键词：非霍奇金淋巴瘤霍奇金病
- 抗核糖体P蛋白及亚型抗体在系统性红斑狼疮临床诊断中的价值被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨抗核糖体P蛋白(Rib-P)及亚型(Rib-P0、P1和P2)抗体在系统性红斑狼疮(SLE)中的诊断价值。方法:分别检测375例SLE患者血清中的抗Rib-P、P0、P1和P2抗体,分析抗Rib-P系列抗体在SLE诊断中的意义。结果:(1)抗Rib-P、P0、P1和P2抗体的敏感性分别为:32.8%、39.4%、55.1%和37.4%,特异性分别97.7%、97.7%、95.5%和94.9%。SLE患者血清中抗Rib系列抗体的敏感性和特异性无统计学差异。(2)抗Rib-P0、P1、P2抗体在133例抗Rib-P抗体阴性的SLE中阳性率分别为18.0%、36.1%和15.8%。抗dsDNA抗体或抗Sm抗体阴性的SLE中有20.3%～44.6%的抗Rib-P系列抗体呈阳性。(3)抗Rib-P0,P1,P2蛋白抗体中阳性组狼疮精神损害的发生率均高于阴性组(P<0.05)。其中抗Rib-P和P2抗体阳性组的发生率显著高于阴性组(P<0.01)。结论:抗Rib-P蛋白及亚型抗体均为SLE特异性的自身抗体,该系列抗体对抗dsDNA抗体或抗Sm抗体阴性的SLE患者诊断有参考意义,并且与狼疮精神损害相关。
- 李晶沈滢贾汝琳王秀杰陈小三王大海朱雷迟晓峰栗占国
- 关键词：抗体P1P2系统性红斑狼疮
- Variation in STAT4 is associated with systemic lupus erythematosus in Chinese Northern Han population被引量：4
- 2010年
- 背景最近的研究在不同人口为全身的豺狼座 erythematosus (SLE ) 作为危险性基因识别了信号变换器和抄写 4 的使活跃之物(STAT4 ) 。以便检验在在有 SLE 的病人的基因 STAT4 rs7574865 的单个核苷酸多型性( SNP )的等位基因分发是否与在中国北汉的健康控制的那些不同人口，我们调查了 STAT4 rs7574865 的变体是否与 SLE.Methods 的任何特定的临床的特征被联系我们在在有 SLE 和 497 健康控制的 252 个病人的 STAT4 rs7574865 的 genotyped SNP 。所有题目从中国汉人口的北部分。在 rs7574865 的遗传型被聚合酶链反应(PCR ) 和直接在在那里的 DNA samples.Results PCR 产品定序的后果决定是在在在 SLE 病人和健康控制之间的 rs7574865 的 SNP 的分发的重要差别。与健康控制相比，当 GG 遗传型在为性和年龄调整以后被用作引用遗传型时，在在 rs7574865 和 SLE 的风险的遗传型之间有重要关联。在 SLE 病人的 T 等位基因的频率是强烈比健康控制的显著地高。而且，在在在男、女的 SLE 病人之间的 rs7574865 的 SNP 的分发有重要差别，当时与健康控制相比。在在男病人的 rs7574865 的 T 等位基因的频率比男健康控制或女病人的显著地高。在在 STAT4 rs7574865 和 SLE.Conclusions 的临床的特征的 T 等位基因的频率之间没有重要关联在 STAT4 的 SNP rs7574865 强烈在中国北汉人口与 SLE 的风险被联系。在 STAT4 rs7574869 的遗传型和 T 等位基因是为 SLE 的危险性因素，特别为男 SLE 病人。
- SU YinZHAO YiLIU XuGUO Jian-pingJIANG QuanLIU Xiang-yuanZHANG Feng-chunZHENG YiLI Xiao-xiaSONG HuiHUANG Ci-boHUANG Yan-hongWANG TianPAN Si-siLI ChunLIU XiaZHU LeiZHANG Chun-fangLI Zhan-guo
- 关键词：汉族人群等位基因频率PCR产物
