福建省科技计划项目(K04059)
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 相关作者：郑树法康德智林元相连葆强林章雅更多>>
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- 高免疫原性胶质瘤细胞疫苗体外诱导Th-1漂移研究被引量：2
- 2009年
- 目的观察高免疫原性即膜型热休克蛋白70（HSP70）及主要组织相容性抗原复合体I类分子（MHC-I）双高表达人多形性胶质母细胞瘤U251（GBMU251）细胞疫苗在体外诱导Th-1漂移现象。方法GBMU251分别以500U／mL IFN-γ诱导48h、43℃热休克2h、500U／mLIFN—γ诱导48h＋43℃热休克2h诱导其MHC-I类分子、膜型HSP70高表达，随后经丝裂霉素（MMc）灭活制成细胞疫苗。体外刺激健康捐献者外周血单个核细胞（PBMCs）作为效应细胞，进行肿瘤特异性杀伤试验：FCM检测疫苗刺激前后PBMCs CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞比例变化；ELISA法检测效应细胞攻击靶细胞后的IFN-γ、1L-2的分泌情况。结果体外刺激后，HSP70和MHC-I类分子双高表达的U251细胞疫苗CD4^＋、CD8^＋比例相对于MHC—I类分子单高表达或HSP70分子单高表达细胞疫苗组明显增加，体外IFN-γ，和IL-2分泌量亦增加，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论高免疫原性即HSP70和MHC-I类分子双高表达U251细胞疫苗体外诱导产生Th-1漂移现象，推测足其体外抗瘤作用的重要机制之一。
- 林章雅康德智郑树法林元相连葆强
- 关键词：U251细胞HSP70
- 高免疫原性胶质瘤细胞疫苗体外抗瘤时靶细胞超微结构变化
- 2009年
- 目的观察高免疫原性人多形性胶质母细胞瘤(GBM)U251细胞疫苗体外诱发产生效应细胞杀伤靶细胞的超微结构变化。方法以500U/mL干扰素-γ(IFN-γ)诱导48h+热43℃休克2h诱导膜型热休克蛋白70(HSP70)及主要组织相容性抗原复合体I类分子(MHC-I)双高表达,经丝裂霉素(MMC)灭活制成高免疫原性细胞疫苗。体外刺激健康捐献者外周血单个核细胞(PBMCs)作为效应细胞(MHC-HSP-CTL),进行肿瘤特异性杀伤试验;MTT比色法检测其杀伤活性;透射电镜观察靶细胞受攻击后情况。结果MHC-HSP-CTL对野生型U251细胞特异性的杀瘤活性明显高于HSP70分子单高表达的细胞疫苗刺激组(HSP-CTL)、MHC-I类分子单高表达的细胞疫苗刺激组(MHC-CTL)以及野生型对照组(W-CTL)(P<0.05),透射电镜显示靶细胞受到攻击后出现不同程度凋亡样坏死和胀亡样坏死,胀亡样坏死细胞在高免疫原性细胞疫苗刺激的效应细胞组较多。结论介导细胞胀亡是高免疫原性即膜型HSP70和MHC-I类分子双高表达疫苗的U251细胞疫苗一种重要主动特异性抗瘤机制。
- 郑树法康德智林元相连葆强
- 关键词：热休克蛋白质70癌症疫苗
- 膜型MHC-Ⅰ类分子高表达的GBM U251细胞疫苗的研制及其体外抗瘤作用
- 2016年
- 目的探索膜型MHC-Ⅰ类分子高表达人多形性胶质母细胞瘤(GBM)U251细胞疫苗的制备方法及其体外诱导的抗瘤作用机制。方法U251胶质瘤细胞加入0~2000U·mL^(-1)不同浓度梯度的重组人IFN-γ干预48h;流式细胞仪(FCM)检测不同浓度梯度的重组人IFN-γ诱导后的U251细胞胞膜MHC-Ⅰ类分子表达变化情况;取诱导MHC-Ⅰ类分子高表达最高的IFN-γ干预方案作为疫苗的制备方法;体外刺激健康捐献者PBMCs作为效应细胞,MTT比色法检测其对野生型及IFN-γ诱导48h后靶细胞的特异性杀伤活性,同时以抗人HLA-A,B,C行特异性杀伤试验的阻断试验;ELISA法检测效应细胞攻击靶细胞后的IFN-γ、IL-2的分泌情况;FCM检测疫苗刺激前后PBMCs CD4^+、CD8^+T淋巴细胞比例变化。结果 500U·mL^(-1)IFN-γ诱导48h U251细胞胞膜的MHC-Ⅰ类分子表达率最高,达89.9%;高表达膜型MHC-Ⅰ类分子U251细胞疫苗9在体外具有明显特异性的杀瘤活性的诱导能力(P<0.05);体外可分泌大量的IFN-γ和L-2(P<0.05);CD4+、CD8+明显增高(P<0.05)。结论500U·mL^(-1) IFN-γ诱导48h是U251细胞胞膜MHC-Ⅰ类分子体外诱导表达的最佳方案;膜型MHC-Ⅰ类分子高表达的U251细胞疫苗休外具有特异性的抗瘤作用,其杀瘤活性与膜型MHC-Ⅰ类分子表达上调有关。
- 谢雪玲
- 关键词：多形性胶质母细胞瘤MHC-I细胞疫苗
- 高免疫原性胶质瘤细胞疫苗的体外抗瘤作用被引量：3
- 2008年
- 热休蛋白70（HSP70）与主要组织相容性抗原复合体Ⅰ类分子（MHC—Ⅰ）是参与内源性抗原提呈的两类重要分子。本研究旨在观察模型HSP70及MHC—Ⅰ类分子高表达人多形性胶质母细胞瘤GBM U251细胞疫苗体外诱导的抗瘤作用。
- 康德智郑树法林元相连葆强
- 关键词：体外抗瘤作用免疫原性主要组织相容性HSP70类分子
- IFN-γ和热干预对U251胶质瘤细胞的MHC-Ⅰ类分子和HSP70表达的影响
- 2009年
- 目的观察重组人干扰素-γ(IFN-γ)和热干预对人多形胶质母细胞瘤(GBM)U251细胞胞膜主要组织相容性抗原复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)类分子和热休克蛋白70(HSP70)分子表达的影响。方法将U251细胞分为3个干预组:IFN干预组(IFN-γ500U/ml诱导48h),热干预组(43℃热休克2h),联合干预组(IFN-γ500U/ml诱导48h+43℃热休克2h),分别行相应诱导干预。流式细胞仪(FCM)检测不同干预因素处理后的U251细胞胞膜MHC-Ⅰ类分子和HSP70表达情况。结果IFN干预组、热干预组、联合干预组U251细胞胞膜MHC-Ⅰ及HSP70表达率分别为(89.92±3.45)%和(5.11±1.89)%、(78.89±2.02)%和(42.18±3.85)%、(96.00±2.63)%和(53.61±4.24)%。结论双因素(IFN-γ500U/ml诱导48h+43℃热休克2h)联合干预是U251细胞胞膜MHC-Ⅰ类分子和HSP70双高表达的最佳体外诱导方案。
- 郑树法康德智林元相连葆强
- 关键词：热休克反应主要组织相容性复合物热休克蛋白质70
