山西省自然科学基金(2006011108)
- 作品数：21 被引量：29H指数：4
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- 小鼠胚胎心流出道心内膜垫的形成与融合
- 2013年
- 目的观察不同发育时期小鼠胚胎心流出道心内膜垫的发育过程。方法对胚龄9-12d小鼠胚胎心脏连续切片进行HE染色和免疫组化染色。结果胚龄10d,流出道远端心胶质内开始观察到间充质细胞。胚龄11d,两侧流出道心内膜垫形成,心内膜垫内部分间充质细胞染色呈α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性。胚龄12d,两侧流出道心内膜垫内部分间充质细胞聚集形成致密漩涡状结构,随着心内膜垫融合,两侧漩涡状结构融合。结论小鼠胚胎流出道心内膜垫形成于胚胎发育第11天,第12天融合,间充质细胞参与心内膜垫融合。
- 张涛杨艳萍李海荣崔慧林郭蕊郭立军乔从进
- 关键词：小鼠胚胎流出道Α-平滑肌肌动蛋白
- 心肌细胞凋亡不参与小鼠胚胎心脏流出道的缩短机制研究
- 2008年
- 目的探讨小鼠胚胎心脏流出道缩短的机制。方法用抗α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)抗体、抗活性Caspase-3(Cas-3)抗体对25只胎龄10～12 d(E10～12)小鼠胚胎心脏连续切片进行免疫组织化学过氧化物酶-抗过氧化物酶复合体(PAP)法染色。结果小鼠胚胎心脏流出道绝对长度于胎龄第12天8:00后开始缩短,至20:00流出道远端心肌界已退至半月瓣水平。在流出道缩短前及缩短过程中,流出道心肌细胞未见Cas-3阳性细胞。结论同鸡胚一样,心肌细胞凋亡不是小鼠胚胎心脏流出道缩短的主要机制。
- 李海荣杨艳萍曹锡梅景雅乔从进王彤
- 关键词：小鼠胚胎辅肌动蛋白免疫组织化学
- 小鼠胚胎心脏流出道嵴的发育被引量：3
- 2010年
- 目的探讨小鼠胚胎心脏流出道嵴内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞的来源及流出道嵴融合时间充质细胞超微结构的变化。方法用抗α-SMA、抗α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)单克隆抗体、PlexinA2探针,对胚龄10～14d小鼠胚胎心脏切片进行免疫组织化学和原位杂交染色;透射电镜观察胚龄12.5d时小鼠心流出道嵴的融合过程。结果胚龄10～11d,小鼠神经管及其周围、动脉囊和弓动脉壁可见PlexinA2阳性细胞,并沿动脉囊壁迁入流出道嵴内,部分细胞同时表达α-SMA。胚龄12d,PlexinA2阳性细胞分布在脊神经节、咽前间充质、主肺动脉隔以及主、肺动脉壁。主肺动脉隔显α-SMA强阳性,但动脉壁仅见少量α-SMA阳性细胞。胚龄12.5d,流出道嵴内致密间充质细胞团形成并开始融合,PlexinA2表达较弱,α-SMA表达呈强阳性。在流出道嵴融合开始后,嵴表面的内皮细胞带形成继而断裂消失,由含微丝少、排列稀疏的间充质细胞取代。两侧致密细胞团逐渐靠拢、融合。有的间充质细胞内含较多线粒体和微丝,细胞之间形成细胞连接点;有的间充质细胞含微丝少,细胞膜间断融合。结论流出道心内膜垫内α-SMA阳性间充质细胞来自神经嵴;内皮细胞-间充质细胞转化可能参与了流出道嵴融合;致密细胞团内间充质细胞富含微丝束和细胞连接点或发生细胞膜融合有助于流出道嵴的融合。
- 杨艳萍赵瑞庆李海荣崔慧林乔从进张涛景雅
- 关键词：胚胎免疫组织化学小鼠
- 骨形态发生蛋白-2在小鼠胚胎心流出道发育中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨骨形态发生蛋白-2（BMP-2）在小鼠胚胎心流出道发育过程中的作用。方法 对胚龄9d（E9）-E15（各胚龄取3-7只）小鼠心连续石蜡切片,用抗α-横纹肌肌动蛋白（α-SCA）抗体、抗胰岛素增强子结合蛋白（ISL-1）抗体、抗增殖细胞核抗原（PCNA）抗体、抗BMP-2抗体进行免疫组织化学染色。结果 E9,流出道心胶质内无细胞,心肌增殖活性低,BMP-2弱表达于流出道心肌、心内膜及心包腔背侧壁。E9-11,流出道增长,心包腔背侧壁ISL-1阳性细胞至流出道远端分化为心肌细胞后增殖逐渐减弱。E10-11,流出道嵴内间充质细胞逐渐增加,可见BMP-2、PCNA阳性细胞;流出道BMP-2表达逐渐增强达高峰,向两端延伸逐渐减弱,动脉端可及心包反折处。E12,流出道缩短,BMP-2表达减弱。E13-15,流出道隔逐渐肌化,BMP-2在心脏近大血管部心肌呈较弱表达。E10-13,流出道远段心肌呈低增殖活性,近段及右心室心肌增殖成小梁致右心室形成及扩大。结论 BMP-2诱导第二生心区（SHF）细胞分化为心肌细胞添加至心动脉端,参与心流出道嵴的发育。BMP-2抑制流出道心肌增殖,流出道近段BMP-2表达减弱重启了心肌细胞增殖,致右心室形成及流出道缩短。低水平的BMP-2可能诱导流出道隔间充质细胞向心肌分化。
- 屈旭宽洪肖杨景雅杨艳萍许智慧崔慧林乔从进李海荣
- 关键词：胚胎骨形态发生蛋白-2增殖细胞核抗原
- 小鼠胚胎心脏各部分化发育成熟差异研究
- 2008年
- 目的探讨α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和中间丝结蛋白与小鼠胚胎心脏分化发育成熟的关系。方法用免疫组化方法对胎龄9-19d小鼠胚胎心脏连续切片进行染色。结果胎龄9d,原始心室和流出道α-SCA、α-SMA表达较强,而结蛋白表达较弱。心房α-SCA、α-SMA的表达限于背侧壁和腹侧壁,静脉窦仅见少许α-SCA弱阳性细胞。心房和静脉窦则无结蛋白表达。胎龄10d,心房和心室膨出,心脏各部均表达较强的α-SCA、α-SMA和结蛋白。α-SCA、α-SMA和结蛋白的表达于胎龄12d达高峰。之后,α-SMA和结蛋白表达逐渐下降,但在右心室和流出道表达持续时间较长。结论α-SCA、α-SMA和结蛋白在小鼠胚胎心脏表达的时空特征表明小鼠胚胎心脏不同部位心肌分化发育成熟不同步。
- 李海荣杨艳萍曹锡梅景雅王彤乔从进
- 关键词：心脏发育Α-SMA结蛋白小鼠
- 小鼠胚胎呼吸内胚层形态发生与咽前间充质发育及流出道分隔的关系被引量：6
- 2013年
- 目的探讨呼吸内胚层与咽前间充质细胞发育的关系及对小鼠胚胎心流出道分隔的影响。方法45只胚龄8—13d小鼠胚胎心连续石蜡切片，用抗胰岛因子1（ISL-1）、抗α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、抗音猬因子（音速波状蛋白，Shh）、抗patched（Ptc1）、抗patched2（Ptc2）、抗smoothened（Smo）及抗心肌肌球蛋白重链（MHC）抗体进行免疫组织化学及免疫荧光染色。结果胚龄8～9d，ISL-1阳性细胞分布在心包腔背侧壁及前肠两侧间充质，并延伸至原始心管动脉端，心管心肌显较强的Ptc1和Ptc2阳性表达。胚龄10～13d，呼吸内胚层向腹侧延伸，Ptc1和Ptc2呈较强表达，ISL-1阳性咽前间充质细胞围绕呼吸内胚层形成对称的特征性锥体形结构，经动脉囊背侧壁伸入动脉囊腔，形成主肺动脉隔。胚龄12d，主肺动脉隔ISL-1阳性表达基本消失，大部分细胞转变为OL-SMA阳性细胞。结论呼吸内胚层的分化发育与咽前ISL-1阳性间充质细胞的发育聚集密切耦联。发育中的呼吸内胚层可能作为组织中心，通过Shh信号通路对ISL-1阳性细胞的聚集提供位置信息。呼吸内胚层的正常腹侧延伸不但可诱导ISL-1阳性细胞的正常迁移和流出道的正常分隔，对流出道的正常形态发生及有效的肺循环建立起重要作用。
- 李慧超景雅师亮杨艳萍李海荣乔从进乔爱秀蔡玉瑾
- 关键词：音猬因子小鼠
- 小鼠胚胎气道平滑肌发育的形态学观察
- 2012年
- 目的探讨肌特异性蛋白质在小鼠胚胎气道平滑肌的表达特点。方法用抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、抗α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)和抗结蛋白(Desmin)单克隆抗体,对胎龄10～18d小鼠胚胎连续石蜡切片进行免疫组织化学显色。结果胎龄11～12d,前肠分隔为腹侧的气管和背侧的食管。胎龄12d,气管起始段后壁出现α-SMA阳性细胞,提示气管平滑肌开始发育,随着向气管下段延伸,α-SMA阳性逐渐减弱,肺静脉周围仅见极少量散在的α-SMA和α-SCA阳性细胞。胎龄13d,气管平滑肌α-SMA表达增强,并开始表达较弱的α-SCA和Desmin。胎龄14d,互为镜像的"C"形α-SMA阳性平滑肌表达出现在左、右支气管壁,α-SCA和Desmin的表达强度弱于α-SMA,此时肺静脉壁呈α-SMA强阳性表达。胎龄15d,α-SMA阳性平滑肌出现在细支气管壁。胎龄17～18d,平滑肌发育已延伸至终末细支气管,并显α-SMA阳性表达,而α-SCA和Desmin表达强度开始减弱。结论气道平滑肌发育始于胎龄12d气管上段,逐渐向下段延伸,胎龄18d,延伸至终末细支气管;Desmin的表达标志着平滑肌细胞骨架结构形成和气道平滑肌逐渐发育成熟,有助于气道平滑肌缓慢收缩功能的完善;气道平滑肌的发育早于肺静脉管壁平滑肌。
- 曹锡梅杨艳萍李海荣景雅
- 关键词：胚胎气道平滑肌发育免疫组织化学
- 小鼠胚胎心流出道近段心室化形成右心室小梁部被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨小鼠胚胎心流出道快速缩短及右心室形成机制。方法用抗α-横纹肌肌动蛋白（ SCA）、抗肌球蛋白重链（ MHC）抗体标记心肌，抗GATA-4抗体标记心肌及其前体细胞，抗α-平滑肌肌动蛋白（ SMA）抗体标记早期心肌细胞，抗增殖细胞核抗原（PCNA）抗体显示增殖细胞，抗人／鼠活性Caspase-3（CAS-3）抗体检测凋亡早期细胞，对胚龄9d（ E9）～E12（不同胚龄胚胎各取3～5只）小鼠胚胎心连续切片行免疫组织化学染色。结果E11时动脉囊及流出道远端心肌界退却至心包腔内，GATA-4、SCA、SMA染色示第二生心区前体细胞不断分化为心肌细胞添加在心动脉端使流出道延长。小鼠胚胎心流出道于E12缩短，缩短前及缩短过程中全长未检测到CAS-3阳性细胞。 E10～12时右心室及流出道近段心肌不断增生形成小梁并侵入邻近的流出道嵴内，流出道近端嵴逐渐小梁状心肌化改建为右心室壁；E12时近段间充质性流出道嵴内出现散在的SCA、SMA阳性心肌细胞及与流出道心肌相延续的SCA、SMA弱阳性心肌细胞流，这些结果表明近段流出道心肌小梁化、流出道嵴小梁状肌化形成了右心室小梁部。结论小鼠胚胎流出道近段心室化致右心室小梁部形成及流出道快速缩短，心肌细胞凋亡及转分化对流出道快速缩短的作用甚微。
- 李海荣杨艳萍王晶晶曹锡梅刘慧霞崔慧林张涛景雅
- 关键词：胚胎GATA-4Α-平滑肌肌动蛋白
- 小鼠胚胎流出道心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞的分布被引量：1
- 2009年
- 背景:早期胚胎心脏流出道心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞参与了流出道的分隔,但在流出道分隔中的分布规律及作用机制仍然不明。目的:观察心内膜α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞在流出道分隔过程中分布的时空规律,探讨其与流出道分隔的关系。设计、时间及单位:单一样本观察,于2006-06/2007-12在山西医科大学组织胚胎学教研室完成。材料:鼠龄3个月的雌性中国昆明小鼠30只,体质量30～32g。方法:妊娠小鼠经乙醚麻醉,收集9～16d胎龄胚胎共32只,制作心脏切片。连续切片每10片取1片做苏木精-伊红染色,其余9片进行免疫组织化学染色。主要观察指标:抗α-平滑肌肌动蛋白、抗结蛋白、抗α-横纹肌肌节肌动蛋白单克隆抗体在胎龄9～16d小鼠胚胎心脏流出道的表达。结果:胎龄10d,可见α-平滑肌肌动蛋白阳性主肺动脉隔形成,同时,α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞沿弓动脉壁迁入流出道心胶质。胎龄11d,流出道心内膜内,α-平滑肌肌动蛋白阳性和α-平滑肌肌动蛋白阴性间充质细胞聚集形成流出道嵴。胎龄12～13d,主肺动脉隔将半月瓣远端流出道分隔为升主动脉和肺动脉干,主肺动脉隔分化为升主动脉和肺动脉干相对的内侧壁。胎龄13d后,半月瓣以下,流出道嵴愈合形成流出道隔,将流出道近段分为左右心室流出道。流出道隔中可见部分α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞聚集呈漩涡状。间充质性流出道隔形成与其肌性化相伴随。结论:流出道心内膜和主肺动脉隔的α-平滑肌肌动蛋白强阳性细胞来自神经嵴。流出道不同部位的α-平滑肌肌动蛋白阳性神经嵴细胞功能不同,与流出道其他细胞成分相互作用,完成流出道的分隔和重建。
- 杨艳萍李海荣曹锡梅景雅崔慧林
- 关键词：Α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞
- 连接蛋白43在小鼠胚胎心的时空表达规律
- 2012年
- 目的：探讨连接蛋白43（Cx43）在小鼠胚胎心的时空表达规律及意义。方法：用抗Cx43、抗心肌肌球蛋白重链（MHC）和抗横纹肌肌节肌动蛋白（αa-SCA）对胚龄9～17d小鼠胚胎心连续切片进行免疫组织化学或免疫荧光显色；免疫印迹检测胚龄11、13、15、10d和17d小鼠胚胎心组织中Cx43的含量变化。结果：胚龄9～10d，仅在左心室腹侧壁及原始小梁最先检测到Cx43弱阳性表达。随着发育，Cx43在心房心室阳性范围逐渐扩展，阳性表达逐渐增强。而在某些特定部位，如窦房结、房室管、房室结和房室束等始终未见Cx43阳性染色。结论：Cx43在胚胎心的时空表达模式与心工作心肌和传导系心肌的发育及兴奋传导功能相适应。
- 乔爱秀景雅蔡玉瑾冯雅琴杨艳萍李海荣师亮
- 关键词：连接蛋白43发育免疫组织化学免疫印迹
