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宫颈HPV感染分子生物学检测技术的比较性研究进展被引量：4: 2013年; 已知HPV病毒型别众多且易发生高频突变，故临床检验很难做到完全、准确的检出．现已上市的多种检测HPV的方法，优劣各异，而目前唯有分子生物学检测法获得了国内外临床使用许可。但分子生物学检测技术本身又具有一些问题，如引物的结合区段、检测通量及检测成本等，这些问题使检测设计难以顾全，同时它也没能解决检测HPV型别全覆盖和型别绝对特异等问题。下面就HPV分子生物学检测方法的研究进展进行综述。; 付冰冰肖长义; 关键词：宫颈HPV感染 HPV型别 HPV病毒检测试剂盒

微环境与肝癌发病机制的研究进展被引量：11: 2015年; 肝细胞癌是一种在微环境刺激因素作用下由肝细胞基因组积累的突变所导致的常见原发性肝癌。肿瘤微环境是一个动态系统,由肿瘤细胞、间质组织、细胞外基质、组织低氧及饮食、胃肠道微生物群落和微泡等组成,肝脏微环境在肝细胞癌发生,发展和治疗中起重要作用,研究肝细胞癌微环境可为发现肿瘤生成机制和肝细胞癌治疗新靶点提供新的借鉴。; 杜义江肖长义; 关键词：肝细胞癌微环境炎性反应肝硬化信号通路

宫颈癌HeLa细胞内HPV L1蛋白表达的观察被引量：10: 2013年; 目的:通过观察电镜下所见的人宫颈癌细胞株——HeLa细胞胞质内包涵体类物质的性质,了解人乳头瘤病毒(HPV)阳性宫颈癌细胞内HPV主要外壳蛋白(L1)的表达规律。方法:培养HeLa细胞,采用ELISA、光镜和电镜的免疫组织化学、Western blot方法,以HPV18 L1小鼠单克隆抗体对细胞内L1的表达情况进行检测,同时用反转录PCR方法检测细胞内L1 mRNA的存在。结果:ELISA检测显示,HeLa细胞裂解液内有HPV L1的存在。HRP标记的光镜免疫组织化学显示,培养的HeLa细胞呈现强的HPV L1阳性反应。电镜下观察,可见部分培养的HeLa细胞胞质内有团块状包涵体样物质,这些团块由大小均匀的颗粒样物质密集而成。这些颗粒性物质可为HPV L1抗体携带的胶体金颗粒标记。Western blot检测结果显示,HeLa细胞裂解液在56 kD区域,出现了一条L1特异阳性条带,说明HeLa细胞内有HPV18 L1的存在。反向PCR方法检测显示细胞内有L1 mRNA的存在。结论:电镜下所见到的培养的宫颈癌细胞株HeLa细胞胞质内的包涵体类物质,系由HPV18 L1构成,说明HeLa细胞能够表达L1。; 李慧弘肖长义袁太宁许雪梅黎家华李红军; 关键词：HELA细胞宫颈癌

宫颈HPV多型别感染的常见型别研究进展被引量：2: 2016年; 子宫颈上皮内人乳头瘤病毒(HPV)的持续感染是导致子宫颈癌发生的重要因素。近年来的HPV的多型别感染在各种研究中得到证实,其中高危型别中的HPV 16型、18型以及低危型别中的HPV 6型在HPV多型别感染中最常见。HPV的多型别感染是个体易感性的结果,同时也是肿瘤易感的关键点。本文就HPV多型别感染的常见型别作一综述,从而为进一步的研究HPV与肿瘤易感性的关系作铺垫。; 成帆肖长义杜义江; 关键词：HPV 宫颈病变宫颈癌

L1C-末端共同序列多肽抗体检测宫颈液基细胞学标本中人乳头瘤病毒被引量：2: 2014年; 目的确定由人乳头瘤病毒(HPV)主要外壳蛋白L1 C-末端保守序列多肽诱导的多肽抗体对宫颈脱落细胞内的HPV是否具有良好的检测能力。方法收集宫颈脱落细胞,一式两份,一份采用巢氏PCR检测HPV DNA,另一份以兔抗多肽纯化抗体和小鼠抗多肽抗血清为探针做夹心法ELISA检测标本中的HPV L1,比较两种方法对HPV的检出率差异。用多肽抗体对部分标本做免疫细胞化学检测。结果对收集到的269例宫颈脱落细胞标本用MY09/11引物扩增,检出HPV DNA阳性标本30例,检出率为11.15%;对MY09/11扩增后结果为阴性的标本再用引物GP5+/6+进行扩增。又检出阳性标本51例,检出率为21.34%。将两个PCR检测合计,共检测到81例HPV DNA阳性标本,HPV DNA总检出率为30.11%。对263例脱落细胞标本进行ELISA检测,共检出阳性标本91例,HPV阳性检出率为34.60%,与PCR检测结果相比差异无统计学意义。免疫细胞化学检测结果表明多肽抗体能够特异性地显示有HPV感染的宫颈脱落细胞。结论HPV L1多肽抗体对宫颈脱落细胞内HPV的感染具有良好的检出能力,该抗体在开发用于宫颈癌预防性筛查的HPV检测试剂盒方面具有一定的潜力。; 孙伟肖长义李志英叶红王雅琴袁太宁李红军; 关键词：宫颈脱落细胞

细胞上皮-间质转化发生的分子机制及临床意义被引量：4: 2015年; 上皮细胞间质化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）是上皮细胞通过特定程序从黏附细胞形态向具有间质表型游离细胞形态转化,并获得侵入细胞外基质能力的一系列转化过程。这种后天获得运动能力的细胞在移行过程中可再次向上皮细胞或其他细胞类型转变,即间质细胞上皮化（mesenchymal-epithelial transition,MET）。; 杜义江肖长义; 关键词：信号通路微RNAS 分子机制

非生殖器部位脂溢性角化病组织中HPV L1蛋白及HPV16、18 DNA的检测及意义被引量：2: 2012年; 目的观察非生殖器部位脂溢性角化病(SK)组织中HPV L1蛋白及HPV16、18 DNA的表达变化,并探讨其意义。方法分别采用免疫组织化学法、PCR法检测43例SK组织、15例正常皮肤组织中的HPV L1蛋白(HPV1、6、11、16、18、31)及HPV16、18 DNA。结果 SK组织中HPV L1蛋白阳性20例(46.51%),正常皮肤组织中HPV L1蛋白阳性4例(26.67%);两组阳性表达率比较,P>0.05。SK组织及正常皮肤组织中,均未检测到HPV16、18 DNA。结论非生殖器部位SK组织中并不存在HPV16、18 DNA,其发病与高危型HPV无关;但是非生殖器部位SK组织中有HPV1、6、11、31中某一型或者某几型L1蛋白的存在,属于非特异性感染。; 陈国仙肖长义; 关键词：脂溢性角化病

CaSki细胞内HPV L1蛋白的表达: 2015年; 目的了解含人乳头瘤病毒(HPV)基因组的宫颈癌Ca Ski细胞中HPV晚期衣壳蛋白1(L1)的表达。方法以多价HPV L1小鼠单克隆抗体做探针,采用ELISA、免疫组化、Western blotting等方法,检测Ca Ski细胞内L1蛋白的表达;采用RT-PCR法检测细胞内L1 mRNA的表达。结果 Ca Ski细胞呈HPV L1阳性反应,显示细胞内有HPV L1蛋白存在;Ca Ski细胞内有L1 mRNA存在。结论包含HPV16混合基因组的Ca Ski细胞可以表达L1蛋白。; 杜义江肖长义叶红汤桂成黎家华; 关键词：人乳头瘤病毒

HPV L1 C-末端保守序列多肽抗血清对临床标本中不同型别HPV的检测被引量：1: 2014年; 目的测试自行制备的HPV L1C-末端保守序列多肽抗血清对外阴及宫颈病变标本中人乳头瘤病毒(HPV)的检出能力。方法收集女性外阴及宫颈病变标本,以MY09/11为通用引物行HPV通用PCR检测,在此基础上以GP5+/6+为内引物行HPV的巢式PCR检测。PCR扩增产物用微孔板杂交法确定HPV型别。标本同时用多肽抗血清行ELISA检测,并对不同型别HPV阳性的标本行Western bolt检测。结果临床标本的HPV检出率,通用引物PCR为70.3%(64/91),巢式PCR为86.8%(79/91),ELISA检测为84.6%(77/91),ELISA法的检出率与巢式PCR相当,高于通用引物PCR。对7个不同型别HPV阳性标本的Western bolt检测,多肽抗血清显示了良好的多价反应性。结论该HPV L1C-末端保守序列多肽抗血清对外阴及宫颈病变标本中的HPV具有良好的检出能力,对多型HPV具有良好的多价反应能力。; 马卿莲肖长义李志英叶红王雅琴袁太宁李红军; 关键词：抗血清宫颈病变

人乳头瘤病毒多型别感染与子宫颈病变的关系的研究进展被引量：2: 2013年; 由于检测技术的进步,近几年来的研究显示,子宫颈上皮内人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的多型别感染(infection with multiple types)呈现明显增高的检出态势。宫颈组织HPV多型别感染的情况已受到越来越多关注。本文作者就几种不同标本类型——宫颈脱落细胞,宫颈活检组织和宫颈肿瘤,根据研究者采用的不同检测方法——商用检测试剂盒及实验室研究性检测,对不同宫颈病变HPV多型别检出的研究情况进行了综述。; 杜义江肖长义; 关键词：人乳头瘤病毒宫颈病变

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湖北省自然科学基金(2011CDC002)

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