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肠道病毒71型疫苗候选株和疫苗标准的研究被引量：15: 2011年; 肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）属小RNA病毒科肠道病毒属,主要引起手足口病（hand-foot-and-mouth disease,HFMD）和中枢神经系统疾病。1969年在美国加里福尼亚分离出首株EV71[1]。近年来EV71在亚太地区持续流行[2-9],特别是1998年在中国台湾地区大流行后，开始引起人们的重视。我国大陆地区2008—2010年报告的HFMD病例数、严重病例和死亡数呈逐年上升趋势，; 梁争论; 关键词：肠道病毒71型疫苗基因型

肠道病毒71型基因工程疫苗研究进展: 2012年; 近年来,手足口病（hand foot and mouth disease,HFMD）在我国呈持续流行态势,其中肠道病毒71型（enterovirus71,EV71）感染易导致严重和死亡病例,造成巨大的社会负担,HFMD已成为政府和社会高度关注的公共卫生问题。; 李玫颖姚昕梁争论; 关键词：肠道病毒71型手足口病基因工程疫苗

鼠疫F1抗原和V抗原双组分候选疫苗的免疫学评价被引量：1: 2012年; 目的通过由提取的鼠疫F1抗原和重组鼠疫V(rV)抗原组成的鼠疫候选疫苗免疫豚鼠,对其免疫效果进行评价。方法将豚鼠随机分成5个试验组,在免疫后不同时间点采血进行抗体检测、MTT法淋巴细胞增殖试验以及皮肤迟发型超敏反应(DTH)检测。结果抗体检测结果显示,双组分鼠疫候选疫苗能诱导较强的体液免疫应答;MTT细胞增殖结果显示,脾脏淋巴细胞特异性增殖不明显;中剂量组、高剂量组针对F1和rV抗原DTH阳转率均为100%。结论双组分鼠疫候选疫苗能诱导豚鼠体液免疫和细胞免疫应答,该疫苗有希望成为我国新一代鼠疫疫苗。; 魏东汪洁英常娅莉卢锦标王秉翔胡丽娜王国治; 关键词：鼠疫疫苗体液免疫细胞免疫

用于鼠疫疫苗纯菌检查的噬菌体裂解法的建立被引量：1: 2013年; 目的建立用于鼠疫疫苗纯菌检查的噬菌体裂解法,并与现行的直接接种纯菌检查方法进行比较.方法使用鼠疫噬菌体裂解在细菌分类学上与鼠疫杆菌相近的细菌及常见的污染细菌,确定鼠疫噬菌体对鼠疫杆菌裂解的特异性.分别将小肠结肠炎耶尔森菌和大肠杆菌定量掺入鼠疫疫苗来制备模拟污染鼠疫疫苗,采用噬菌体裂解纯菌检查方法检测模拟污染鼠疫疫苗,并将检测结果与现行的直接接种纯菌检查方法的检测结果进行比较.结果鼠疫噬菌体能特异性地裂解鼠疫杆菌,对在细菌分类学上与鼠疫杆菌相近的细菌以及常见的污染细菌无裂解作用.对模拟污染鼠疫疫苗中的小肠结肠炎耶尔森菌和大肠杆菌的检出限,噬菌体裂解法均为1CFU/剂疫苗（50μl疫苗）,现行的直接接种法分别为50和5 CFU/剂疫苗（50μl疫苗）.结论噬菌体裂解纯菌检查方法具有较好的敏感性和特异性,可用于鼠疫疫苗的质量控制.; 魏东李恪梅王国治; 关键词：细菌噬菌体

肠道病毒71型实验室诊断研究进展: 2012年; 肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)为手足口病(Handf,oot and mouth disease,HFMD)和相关疾病的主要病原体,多感染婴幼儿,少数病例可以并发呼吸道感染和心肌炎、无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹等严重疾病,可致残、致死。因此EV71实验室诊断对EV71引起疾病的治疗和防控具有重要意义。本文将从核酸检测、抗体检测及其他检测等三部分对EV71的实验室诊断方法研究进展进行了综述。; 吴星梁争论; 关键词：肠道病毒71型核酸抗体

肠道病毒71型中和抗体检测用标准病毒候选株的筛选及制备被引量：10: 2012年; 目的筛选并制备肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)中和抗体检测用标准病毒候选株,规范EV71中和抗体检测方法。方法通过对亲本株与非亲本株交叉中和试验,进行相应的几何平均滴度(GMT)比较,从10株EV71毒株中筛选出具有理想亲本中和能力、又具有较广泛交叉中和作用的毒株。筛选出的毒株按《中国药典》三部(2010版)相关要求,冷冻干燥后制备1批符合我国疾病流行特征的标准病毒候选株,联合3家实验室对候选株的病毒滴度进行协作标定,并初步应用于人血清样品的检测。结果筛选出交叉中和能力强、分离、传代背景清晰的EV71 V03株(523-07T)作为候选病毒株;制备的候选病毒株分装精确度、水分含量、无菌检查、支原体检查、其他外源因子检查等项目均符合《中国药典》三部(2010版)相关要求;经联合标定,候选毒株的平均病毒滴度为4.83 lgTCID50/ml(95%CI:4.53～5.12 lgTCID50/ml),变异系数为3.16%;应用候选毒株和中和抗体定值标准品检测EV71自然感染人血清样品,可将实验室间检测差异由4.4倍降至1.6倍。结论初步筛选出的候选株EV71/523-07T株具有理想的亲本株中和作用,又具有较广泛的交叉中和特性,有望成为EV71中和抗体检测的标准毒株候选株。; 毛群颖郭增兵郝春生于丹高帆董承红安文琪高强谢忠平李秀玲梁争论; 关键词：手足口病中和抗体

EV71动物模型及其在疫苗研究中的应用被引量：3: 2011年; 人肠道病毒71型（EV71）是引起手足口病（hand-foot-mouth disease,HFMD）的主要病原体之一,主要引起5岁以下婴幼儿手-足-口部疱疹,一般症状轻,但少数患儿出现无菌性脑膜炎、脑干脑炎等多种重症中枢神经症状,病程进展迅速,; 毛群颖姚昕梁争论; 关键词：人肠道病毒71型手足口病疫苗

XTT法检测鼠疫疫苗活菌含量被引量：1: 2012年; 目的通过XTT方法检测鼠疫疫苗中的活菌含量,并与传统培养法的菌落形成单位计数结果进行比较,探讨在应急使用情况下以XTT方法快速检测鼠疫疫苗活菌含量的可行性。方法利用已知活菌含量的鼠疫疫苗参考品制备活菌含量与XTT有色产物吸光度值之间的参比曲线,根据未知样品的吸光度值,在线性方程中求出未知样品的活菌含量。同时将该检测方法的结果与传统培养法活菌含量结果进行比较分析。结果 XTT法能反应鼠疫疫苗制品中的活菌含量,在一定的浓度范围内,活菌含量与有色产物吸光度值之间有较好的线性关系,相关系数达到0.999 9,应用该方法对3批鼠疫疫苗样品活菌含量进行检测,其结果与培养法菌落形成单位(CFU)结果无统计学差异(P>0.05),该实验可在2h左右完成。结论 XTT法能够反应鼠疫疫苗中的活菌含量,实验耗时短,为鼠疫疫苗活菌含量提供一种新的检测方法。; 魏东汪洁英王国治; 关键词：鼠疫疫苗活菌数

吡喹酮治疗血吸虫感染小鼠后IFN-γ和IL-4及T细胞的变化被引量：1: 2014年; 目的观察血吸虫感染小鼠经吡喹酮治疗后血清中细胞因子IFN-γ和IL-4的水平，及脾细胞中特异性T细胞数量的变化。方法将90只6～8周龄BALB／c小鼠随机分成3组，分别为感染组、治疗组和对照组，每组30只。感染组和治疗组小鼠经腹部感染血吸虫尾蚴（约25条／鼠）。治疗组小鼠于感染后6周经口给予吡喹酮治疗，300mg／（kg·d）×3d。分别在治疗后4、6、8和12周，对各组小鼠进行称重，采血并分离血清，ELISA检测血清细胞因子IFN-γ和IL-4水平。无菌取小鼠脾脏，制备脾细胞悬液，经日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）刺激后，用酶联免疫斑点法（ELISPOT）分别检测分泌IFN-γ和IL-4的特异性T淋巴细胞的增殖水平。结果治疗组小鼠体重在治疗后4～12周均显著大于感染组（P〈0．05），与对照组间差异无统计学意义（P〉0．05）。ELISA结果表明，治疗后4周，治疗组血清中IFN-γ和IL-4水平与感染组间差异无统计学意义（P〉0．05），而治疗后6、8和12周，治疗组的IFN-γ（0．038＋0．013、0．028±0．001和0．027±0．007）和IL-4（0．051±0．020、0．045＋0．019和0．043±0．016）水平均显著低于感染组（IFN．1：0．057±0．004、0．060±0．023和0．052±0．017，IL-4：0．150±0．014、0．148±0．014和0．123±0．017）（P〈0．05），而治疗组和感染组的IFN-γ和IL-4水平均显著高于对照组（P〈0．05）。ELISPOT结果显示，在治疗后4周和6周，治疗组脾细胞中IFN-γ特异性淋巴细胞数量与感染组间差异无统计学意义（P〉0．05），而治疗后8周和12周治疗组细胞数量（39．9±22．8和38．5±6．2）显著低于感染组（141．9±39．3和（06．8±28．6）（P〈0．05）；治疗组脾细胞中IL-4特异性淋巴细胞数量在治疗后4周显著高于感染组（P〈0．05），而后开始减少，治疗后8周和12周（111．3±14．3和113．0±44．2）显著低于感; 刘向芹田喜凤张瑾辛晓芳张影; 关键词：吡喹酮 Γ干扰素白细胞介素4 酶联免疫斑点试验

氢氧化铝佐剂对肠道病毒71型灭活疫苗诱导小鼠细胞免疫应答的影响被引量：9: 2012年; 目的评价氢氧化铝佐剂对肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)灭活疫苗诱导小鼠细胞免疫应答的影响。方法用含铝佐剂及无佐剂EV71灭活疫苗免疫BALB/c小鼠,并设生理盐水对照组。于加强免疫后7 d采血,进行小鼠脾单个核细胞(Mononuclear cell,MNC)的分离及CD8+T细胞的去除,采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测经EV71疫苗原液或VP2-36刺激后的小鼠脾MNC分泌IFNγ水平;应用液相芯片技术(LUMINEX)检测经EV71疫苗原液刺激后的小鼠脾MNC分泌IL-2、IL-4、IL-5、IL-6和IL-10水平;采用体外微量中和试验法检测小鼠血清中和抗体效价。结果 BALB/c小鼠经2次免疫后,铝佐剂疫苗组小鼠脾MNC的IFNγSFC值显著高于无佐剂疫苗组(P均<0.05);铝佐剂疫苗组分泌IL-6和IL-10水平显著高于无佐剂疫苗组(P均<0.05);铝佐剂与无佐剂疫苗组小鼠血清EV71中和抗体阳转率均达到100%,铝佐剂疫苗组诱导的中和抗体效价显著高于无佐剂疫苗组(P<0.01)。结论 EV71灭活疫苗可诱导BALB/c小鼠产生特异性IFNγ、IL-2、IL-6和IL-10应答,铝佐剂可同时增强EV71灭活疫苗的Th1和Th2类免疫应答。; 王一平李玫颖高帆邵杰毛群颖姚昕程刚游松梁争论; 关键词：肠道病毒A型佐剂

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国家科技重大专项(2009ZX10004-804)

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