黑龙江省国际合作项目(WH05B02)
- 作品数：2 被引量：15H指数：2
- 相关作者：高玉龙王笑梅高宏雷邓小芸王晓艳更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所东北农业大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省国际合作项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的原核表达与抗原性分析被引量：7
- 2006年
- 目的表达鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)弱毒株VP2蛋白并检测其抗原活性。方法以IBDV强毒致弱株Gt株基因组RNA为模板,应用RT-PCR方法扩增VP2基因,并将其克隆入pUC18载体,经PCR、酶切及测序鉴定正确后,将其亚克隆到原核表达载体pET30a中,并经酶切、PCR、测序鉴定,阳性重组表达质粒转化E.coliBL21(DE3)菌,经IPTG诱导后,表达产物用SDS-PAGE及Westernblot检测。结果阳性重组表达质粒转化E.coliBL21(DE3)后,经诱导表达了目的蛋白,表达量占菌体总蛋白的15%。Westernblot检测表达蛋白可与IBDV阳性血清发生反应,而与阴性对照血清不发生反应。结论已成功表达了鸡传染性法氏囊病毒弱毒株VP2蛋白,且具有良好的抗原性。
- 高玉龙高宏雷邓小芸杨虹王晓艳祁小乐付朝阳王笑梅
- 关键词：传染性法氏囊病毒VP2原核表达抗原性
- 鸡传染性法氏囊病病毒vp2基因在杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性研究被引量：8
- 2007年
- 将鸡传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株vp2基因克隆到载体pFastBac HTA中,构建重组转座载体pFVP2,然后将其转化DH10Bac感受态大肠杆菌,将vp2基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体BacmidVP2;通过脂质体转染将其转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacVP2。用Western blot和间接免疫荧光试验分析表明IBDV VP2蛋白在Sf9昆虫细胞获得正确表达,所表达的重组VP2蛋白分子量约50 Ku。以rBacVP2感染Sf9细胞裂解物免疫3周龄SPF鸡,在免疫后7 d可检测到ELISA抗体;免疫后14 d可检测到琼脂免疫扩散抗体。攻毒试验表明,初次免疫后14 d对IBDV超强毒株的攻击保护率为75%,2次免疫后14 d对其的攻击保护率为100%。
- 高玉龙高宏雷王晓艳李俊山邓小芸刘伟王笑梅
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因杆状病毒免疫原性
