国家自然科学基金(30210103904)
- 作品数：17 被引量：57H指数：5
- 相关作者：苏敏田东萍吴丛梅李晓昀黄天华更多>>
- 相关机构：汕头大学复旦大学汕头大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 食管癌变过程中mtDNA的D环区变异分析
- 2010年
- 目的:研究食管癌变过程中的mtDNA的D环区异常。方法:显微切割获得食管上皮从正常到恶变为癌的过程不同阶段病理标本(6例正常食管上皮、11例单纯增生上皮、11例非典型增生上皮、6例原位癌和11例浸润癌组织),以及直接肉眼取材获得的24例浸润癌组织。D环区直接测序,卡方检验比较不同阶段中D环区变异情况。结果:在食管上皮由正常恶变为癌的过程不同阶段检测到25个突变频率较高(>25%)的位点,其中16 093T→C、249缺失A突变在各阶段的分布有统计学意义(P<0.05),主要分布于正常食管上皮和单纯增生上皮。146、152、199、16 129和16 217位点突变虽然在各阶段的分布无统计学意义,却均是连续见于食管上皮从增生到恶变为癌的过程中的频率较高的突变。结论:在食管癌变过程中存在多个频率较高的D环区突变,初步提示可能是多个位点的突变导致了D环区的不稳定,从而促进了食管上皮的癌变。
- 李晓昀苏敏张国红田东萍林文婷
- 关键词：食管癌
- 三种食管鳞癌细胞系的染色体异常研究被引量：1
- 2005年
- 目的:分析食管鳞癌(ESCC)细胞系的染色体异常,为将来寻找食管癌相关基因提供线索。方法:采用比较基因组杂交法(CGH)分析3种ESCC细胞系的染色体DNA拷贝数改变情况。结果:9q(3/3)、3q(2/3)、5q(2/3)、5p(2/3)、8q(2/3)、12p(2/3)和20q(2/3)为常见的染色体增加区。4q(2/3)和6q(2/3)是常见的染色体丢失区。结论:这些常见的染色体异常有助于寻找和定位食管癌相关基因。
- 李晓昀苏敏Chin SFFitzgerald RCCaldas C
- 关键词：食管癌染色体比较基因组杂交
- 食管癌细胞系CSEC的建立及其生物学特性被引量：2
- 2006年
- 目的建立人食管癌细胞系为潮汕沿海地区食管癌研究提供实验模型。方法采用胶原酶消化法建立人食管癌细胞系CSEC。研究培养细胞的形态特点、生长特征、对Sc id小鼠的致瘤性、细胞遗传学特点及肿瘤相关标志物(AE 3、p53)的表达。结果细胞系CSEC在体外持续稳定生长超过13个月,已传至80代以上,群体倍增时间为39.6小时。CSEC细胞具有鳞状细胞的形态和结构特点,胞浆富含张力原纤维束,细胞间可见桥粒。Sc id小鼠移植瘤的组织学形态与患者的原发肿瘤一致。细胞系CSEC呈近四倍体核型,染色体结构改变常见而且复杂。肿瘤相关标志物(AE 3、p53)呈强阳性表达。结论人食管癌细胞系CSEC是一分化较高且生物学特性稳定的鳞状细胞癌细胞系,可为食管癌的发病机制和治疗研究提供有价值的实验模型。
- 卢善明苏敏田东萍邓汪东郑燕銮
- 关键词：食管肿瘤细胞系
- 慢性炎症介导的基底膜改变在食管上皮癌变中的作用被引量：11
- 2005年
- 背景与目的:基底膜对于食管上皮的分化、增殖和极性具有调节作用,其完整性的改变在上皮癌变过程中具有重要意义。本实验着重研究在食管上皮癌变过程中基底膜改变与上皮增殖的关系,探讨慢性炎症引起的基底膜改变在食管癌发生中的作用及可能机制。方法:采用过碘酸-雪夫氏(periodicacide-chiffstain,PAS)特殊染色观察200例食管癌手术标本癌旁组织、10例癌组织基底膜变化形态学类型与上皮炎症分数和增生类型的关系,对其中的51例基底膜变化典型标本进行层粘连蛋白(laminin,LN)、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)、Ki-67免疫组织化学染色,观察LN改变与上皮细胞增殖变化的关系。结果:单纯增生、非典型增生、原位癌上皮和浸润癌基底膜可出现点状缺失、片状缺失、带状缺失、分支增厚等不同类型的形态学改变,基底膜的改变与食管上皮炎症分数具有相关性(rs=0.795,P<0.05);基底膜改变区邻近上皮细胞高表达PCNA、Ki-67(P<0.01)。结论:食管慢性炎症反应引起的基底膜改变与食管上皮细胞异常增生相关。
- 张国红苏敏田东萍
- 关键词：食管上皮基底膜PASLAMININ癌变
- pETNF-P16质粒的构建及其在食管癌细胞中的辐射诱导表达特性
- 2004年
- 目的 构建重组质粒pETNF P16并研究其在食管鳞状细胞癌细胞系EC970 6中X射线照射诱导表达特性和基因 放射治疗食管癌的可行性。方法 构建重组质粒pETNF P16 ,通过脂质体介导转染EC970 6细胞。利用ELISA ,Westernblot和免疫细胞化学的方法检测pETNF P16在被转染的EC970 6细胞中的X射线照射诱导表达特性。结果 成功构建真核载体pETNF P16并转染EC970 6细胞。在不同剂量X射线照射后被转染细胞中TNFα的表达量明显高于 0Gy组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。 2GyX射线照射后 2～ 4 8hTNFα和P16的表达量明显高于对照组 (P <0 0 5或P <0 0 0 1)。在正常的EC970 6细胞中没有P16的表达 ,在转染组和辐射诱导组中P16有较强的表达。结论 在pETNF P16质粒转染的EC970 6细胞中X射线可诱导TNFα和P16的表达增强。本研究结果为临床食管癌基因
- 吴丛梅黄天华谢庆东李德锐吴德生徐小虎
- 关键词：X射线照射TNFΑEC细胞表达量质粒
- 低剂量辐射联合pEgr-P16基因治疗诱导食管癌细胞凋亡的研究被引量：5
- 2005年
- 目的:研究大剂量(2Gy)和低剂量(0.075Gy)X射线诱导pEgr P16重组质粒稳定转染的食管癌细胞株EC9706凋亡的作用。方法:将脂质体包裹的pEgr P16重组质粒,转染食管癌细胞系EC9706中,经G418筛选,获得稳定表达的细胞;采用Westernblot方法检测不同剂量X射线诱导后P16的表达;观察不同剂量X射线照射后,EC9706细胞凋亡率的变化。结果:pEgr P16重组质粒转染EC9706细胞,并获得稳定转染的细胞;2Gy和0.075GyX射线照射均可诱导P16表达增强;稳定转染的细胞经2Gy和0.075GyX射线照射,细胞凋亡率明显高于假照射(0Gy)组(P<0.05～0.01)。结论:0.075GyX射线照射可诱导稳定转染的EC9706细胞中P16表达增强,使诱导细胞凋亡率提高。
- 吴丛梅黄天华吴德生谢庆东李德锐陈秀如徐小虎
- 关键词：低剂量辐射基因治疗EC9706细胞X射线诱导食管癌细胞系
- pEgr-TNFα基因联合放疗抑制食管癌细胞生长的实验研究被引量：2
- 2006年
- 背景与目的：研究pEgr-TNFα重组质粒在稳定转染的食管癌细胞中的辐射诱导表达，及其联合放射治疗抑制食管癌细胞生长的效果。材料与方法：将脂质体包裹的pEgr-TNFα重组质粒，转染食管癌细胞系EC9706中，经G418筛选，获得稳定表达的细胞；采用ELISA方法检测0．075Gy和2Gy剂量x射线诱导后TNFα的表达；观察该工种剂量X射线照射后，EC9706细胞的增长情况。结果：pEgr-TNFα重组质粒转染EC9706细胞，并获得稳定转染的细胞；大剂量x射线照射和低剂量X射线照射均可诱导TNFα表达增强，为对照组的6～6．3倍（P〈0．01）；稳定转染的细胞经0．075Gy和2GyX射线照射，8d后细胞数明显低于未转染细胞组（P〈0．01）和稳定转染的假照射组（P〈0．01）。结论：体外pEgr-TNFα基因．放射联合治疗有明显的抑制食管癌细胞生长的作用。
- 吴丛梅黄天华吴德生谢庆东李德锐陈秀如徐小虎
- 关键词：X射线照射食管癌细胞低剂量照射
- 重组质粒pEgr-P16在EC9706细胞中的辐射诱导凋亡作用被引量：1
- 2004年
- 背景与目的 :研究pEgr_P16重组质粒在食管癌细胞系EC9706中的辐射诱导凋亡作用。 材料与方法 :pEgr_P16重组质粒通过脂质体介导转染人食管癌EC9706细胞 ,定量RT -PCR检测2Gyγ射线照射后被转染细胞中P16的表达和细胞凋亡率的变化。结果 :对照组无P16蛋白表达 ,转染质粒组细胞接受2Gyγ射线照射后2～24hP16表达量与时间呈曲线关系 ,在22h时P16的mRNA水平最高 ;P16基因联合放射可诱导食管癌细胞凋亡 ,凋亡率高于单纯照射组和单纯基因诱导组。结论 :γ射线可诱导 pEgr_P16重组质粒在人EC9706细胞中表达并显著提高EC9706细胞的凋亡率。本研究结果为食管癌基因
- 吴丛梅黄天华谢庆东李德锐陈秀如吴德生徐小虎
- 关键词：EGR-1启动子Γ射线P16表达凋亡
- pEgr-MDA7重组质粒辐射诱导特性的检测
- 2006年
- 背景与目的克隆人MDA7cDNA基因,构建pEgr-MDA7重组质粒并检测其在人食管癌细胞系EC9706中经辐射诱导后mRNA水平。材料与方法从人外周血mRNA中克隆人MDA7cDNA基因,连接到Egr-1启动子的下游构建成pEgr-MDA7重组质粒,利用脂质体介导转染人EC9706细胞,用定量PCR方法检测不同剂量X射线照射后被转染细胞中MDA7的mRNA水平。结果测序结果证实MDA7cDNA基因序列正确,酶切鉴定证实pEgr-MDA7重组质粒构建正确。被pEgr-MDA7重组质粒转染的人食管癌EC9706细胞经不同剂量X射线照射后,MDA7基因mRNA水平均高于未照射组。结论X射线可诱导pEgr-MDA7重组质粒在人EC9706细胞中表达增强。
- 吴丛梅黄天华吴德生谢庆东徐小虎
- 硒-甲基硒代半胱氨酸对人食管癌EC109细胞Ki-67及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响被引量：10
- 2004年
- 目的 :探讨硒 甲基硒代半胱氨酸 (MSC)对人食管癌细胞系EC10 9细胞增殖及Bcl 2 Bax蛋白表达的影响。方法 :用荧光染色、免疫组化及免疫蛋白印迹等技术 ,在MSC的不同浓度 (0、 1、 2、 4、 8、 16 μg mL)与时间 (6、 12、 2 4、 4 8h)的作用下 ,观察其对EC10 9细胞形态的影响以及细胞核增殖抗原Ki 6 7及凋亡相关蛋白Bcl 2 Bax的表达。结果 :细胞主要表现出固缩 ,生长密度降低 ,凋亡小体形成并被吞噬等形态改变 ,未见明显细胞毒性作用。各实验组的Ki 6 7标记指数均明显低于对照组 (P <0 0 1) ,Bcl 2 Bax表达比值降低 ,并呈明显的时间和浓度依赖性。结论 :MSC有抑制EC10 9细胞系增殖及下调Bcl 2
- 裴小娟苏敏田东萍
- 关键词：食管癌EC109细胞KI-67BCL-2BAX
