福建出入境检验检疫局科研基金(FK2003-02)
- 作品数：3 被引量：29H指数：2
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- 发文基金：福建省农科院青年科技人才创新基金福建出入境检验检疫局科研基金国家质检总局科技计划项目更多>>
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- 玉米及其制品中转基因成分的单一PCR及多重PCR检测被引量：13
- 2005年
- 采用CTAB法提取玉米及其制品的总DNA,用PCR方法检测其中的转基因成分如花椰菜花叶病毒(Cauliflowermosaicvirus,CaMV)35S启动子、根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)胭脂碱合成酶基因(nos)终止子、根癌农杆菌CP4菌株的EPSPS基因、吸水链霉菌(Treptomyceshygroscopicus)bar基因及苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种(Bacillusthuringiensissubsp.kurstaki)cryIA(b)基因,筛选到阳性样品,并建立了几组玉米内源zein基因和转基因成分之间的多重PCR检测方法。结果表明,建立的多重PCR方法用于同时检测玉米内源基因和转基因成分是可行的,值得推广;虽然我国还未有已获准商品化生产的转基因玉米,但国外转基因玉米已流入福建省。
- 邵碧英陈文炳
- 关键词：玉米转基因成分PCR多重PCR
- 转基因大豆中外源基因的二重PCR检测被引量：1
- 2005年
- 用CTAB法提取转基因大豆(Roundup Ready品系)的总DNA.根据行业标准SN/T 1195-2003,合成用于扩增花椰菜花叶病毒(Cauliflowerm osaic viru,s CaMV)35S启动子的引物S1和S2、根癌农杆菌(Agrobacterium tum efaciens)CP4菌株EPSPS基因的引物Ea、ER和Eb.应用这5条(2组)引物对转基因大豆进行二重PCR检测时,扩增得到2个新片段,分别与片段S1ER、S1Eb大小一致.将片段S1ER、S1Eb进行克隆并测序,序列已在GenBank上登录,接受号分别为AY592954和AY596948.序列分析结果表明,片段S1ER含有CaMV 35S启动子和矮牵牛叶绿体转运肽序列(CTP)的部分序列,片段S1Eb含有CaMV 35S启动子部分序列、CTP和CP4 EPSPS基因的部分序列,原用于扩增CP4 EPSPS基因的引物中,仅引物Eb位于CP4 EPSPS基因中.重新合成扩增CP4 EPSPS基因的引物E1和E2,建立的二重PCR方法不仅适合于转基因RoundupReady大豆,还适合于其它植物中的CaMV 35S启动子和CP4 EPSPS基因的同时检测.
- 邵碧英陈文炳江树勋李寿崧
- 关键词：大豆二重PCR
- 大豆及腐竹中转基因成分的多重PCR分析被引量：19
- 2004年
- 采用CTAB法提取大豆干样、新鲜毛豆及腐竹中的总DNA,内源LECTIN基因扩增结果均为阳性,表明提取到的DNA中不存在抑制PCR的物质.应用花椰菜花叶病毒(Cauliflowermosaicvirus,CaMV)35S启动子和根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因(NOS)终止子的二重PCR分析,筛选到7个含转基因成分的样品.半嵌套式PCR检测结果表明阳性样品中的外源目的基因为来自根癌农杆菌CP4菌株的EPSPS基因.最后成功进行了扩增内源LECTIN基因、CaMV35S启动子和NOS终止子的三重PCR分析,以及内源LECTIN基因和EPSPS基因的二重PCR分析,得到预期结果.多重PCR方法具有快速、简便、准确等特点,在植物产品的转基因成分检测上具有重要的应用价值.
- 邵碧英陈文炳江树勋李寿崧
- 关键词：大豆根癌农杆菌终止子套式PCR检测转基因成分
