国家自然科学基金(30973320)
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
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- 相关机构：中山大学昆明医科大学更多>>
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- 变异链球菌ldh-luc荧光报告株的生物学活性检测被引量：1
- 2014年
- 目的探讨本课题组前期所构建的变异链球菌(S.mutans)ldh-luc荧光报告株在浮游态及生物膜状态下的活性及代谢状态的有效性,为探讨抗菌剂对多菌种生物膜中S.mutans的作用提供研究基础。方法采用生长曲线、扫描电子显微镜、活菌菌落计数等方法研究浮游态及生物膜状态下S.mutans ldh-luc荧光报告株的生长活性及代谢状态,并测定荧光报告株的荧光活性。结果S.mutans ldh-luc荧光报告株和野生株生长趋势一致,生物膜内可培养活菌数无差别(4h:F=2.13,P>0.05;12 h:F=1.45,P>0.05;24 h:F=2.72,P>0.05;48 h:F=1.85,P>0.05),SEM检测结果显示4、12和24 h生物膜形成能力无差异;S.mutans ldh-luc荧光报告株从对数生长早期到平台早期荧光表达稳定,荧光量能实时反映活菌数量。结论S.mutans ldh-luc荧光报告株和野生株生长能力相似,具有稳定的荧光活性,荧光量能准确反映细菌活菌数量,提示可用S.mutans ldh-luc荧光报告株代替野生菌株进行相关实验研究,并可用于实时观测抗菌剂对其的作用。
- 霍丽珺凌均棨
- 关键词：变异链球菌生物膜
- 密度感应相关性变链素及其作用分析
- 2011年
- 细菌素是由某些细菌在代谢过程中产生的一类具有抗菌活性的蛋白质或多肽,变异链球菌产生的细菌素称为变链素。变链素可能与口腔生物膜中变异链球菌的致龋性及其在牙面的定植有关。目前已有多种变链素被分离、纯化并完成了基因序列和氨基酸序列的测定,变链素与密度感应调控系统的关系及在新型抗菌制剂研发中的应用价值已受到人们关注。本文就密度感应相关变链素及其作用的研究现状作一综述。
- 霍永标凌均棨
- 关键词：细菌素变链素密度感应变异链球菌
- 细菌素免疫蛋白调控变形链球菌抗菌敏感性及生物膜形成的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的观察细菌素免疫蛋白相关基因对变形链球菌抗菌敏感性及生物膜形成的影响，探讨细菌素免疫蛋白与细菌抗菌剂耐受性的关系，为生物膜抗菌敏感性的研究提供基础数据。方法筛选培养细菌素免疫蛋白基因突变株，绘制生长曲线。酶标仪检测不同质量浓度氨苄青霉素（0．04、0．05、0．06、0．07及0．08mg／L）、氟化钠（50、100、150、200及250mg／L）及不同质量分数的次氯酸钠（0．078％、0．156％、0．313％、0．625％及1．250％）作用下变形链球菌标准株、△immA-和△immB-突变株菌液的吸光度值。应用最小生物膜清除浓度（minimal biofilm eradicatin concentration，MBEC）桩钉96孔板以连续稀释法检测醋酸氯己定对3种菌株生物膜的MBEC。应用激光共聚焦扫描显微镜（confocal laser scanning microscope，CLSM）定量分析标准株和突变株生物膜结构。结果△immA-和△immB-突变株的迟缓期和稳定生长期均比标准株延时1h。氨苄青霉素为0．06ms／L时，标准株、△immA-突变株和△immB-突变株菌液吸光度值分别为0．334±0．016、0．027±0．016及0．047±0．018；氟化钠质量浓度为150mg／L时，3种菌株菌液吸光度值分别为0．254±0．018、0．129±0．011及0．167±0．01；当次氯酸钠质量分数为0．313％时，3种菌株菌液吸光度值分别为0．467±0．008、0．017±0．006及0．050±0．006，以上各组抗菌剂中，标准株与突变株吸光度值差异均有统计学意义（P〈0．01）。醋酸氯己定对3种菌株的MBEC分别为6．25、1．57及3．13mg／L。标准株生物膜厚度显著高于△immA-和△immB-突变株（P〈0．01）；标准株各层活菌比例均高于△immA-突变株（P〈0．05）；标准株中、外层活菌比例高于△immB-突变株（P〈0．01），但内层活菌比例差异无统计学意义（P=0．191）。结论细菌素免疫蛋白参与调控浮游细菌生长，尤其在生长初期�
- 霍永标麦俊妮凌均棨霍丽珺
- 关键词：生物膜
- 变形链球菌感受态形成的基因调控网络被引量：2
- 2015年
- 龋病至今仍然是人类最流行的口腔疾病,其发生、发展与牙菌斑生物膜的形成密不可分.变形链球菌是公认的主要致龋菌,它可以利用蔗糖产生大量黏性胞外多糖基质,实现在牙面的黏附和聚集,形成菌斑生物膜;同时迅速代谢多种糖后产酸,使牙体组织脱矿形成龋齿.作为口腔正常菌群之一,变形链球菌与一般外界侵入的致病菌不同,其产酸致龋能力取决于它对口腔不利环境因素的适应能力及牙菌斑微生态环境内共生菌群的协同或拮抗作用,即牙菌斑生物膜的微生态平衡.
- 凌均棨
- 关键词：变形链球菌基因调控网络牙菌斑生物膜感受态胞外多糖微生态环境
- 变形链球菌荧光报告株的构建和鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的探讨变形链球菌(S.mutans)荧光素酶(luc)基因报告株构建方法,拟为探讨抗菌剂对多菌种生物膜中S.mutans的作用提供研究基础。方法将S.mutans UA159乳酸脱氢酶(ldh)基因及其上游部分约1100000片段克隆至自杀质粒pFW5-luc的多克隆位点,构建重组质粒,并经酶切和测序证实。采用自然转化的方法,实现重组自杀质粒和S.mutans UA159同源序列的单次交换。结果经过聚合酶链反应(PCR)和测序分析,筛选出具有报告活性的S.mutans ldh-luc基因荧光报告株。结论成功构建了S.mutans ldh-luc基因荧光报告株。
- 霍丽珺刘红艳凌均棨黄湘雅
- 关键词：变形链球菌荧光素酶同源重组
