广东省自然科学基金(10151051501000101)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：李伟忠闫怡轩黄艳青廖汶晓张磊涛更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院中山大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目南方医科大学南方医院院长基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 塞来昔布增强口腔癌化疗敏感性与阻滞周期进程的相关性被引量：6
- 2013年
- 目的探讨塞来昔布增强口腔癌细胞化疗敏感性与其阻滞细胞周期进程及调节P-gp之间的相关性。方法塞来昔布10、20、40、80μmol/L和/或长春新碱0.375、0.75、1.5、3μmol/L处理KB/VCR细胞后,分别采用MTT法检测KB/VCR细胞生长抑制率;流式细胞术检测细胞周期分布情况;Western blot检测周期相关蛋白Cyclin D1、p21WAF1/CIP1及P-gp的蛋白表达。结果塞来昔布浓度较低时(<20μmol/L)对KB/VCR生长增殖无明显影响,但小剂量的塞来昔布10μmol/L可显著增强VCR对KB/VCR细胞的毒性作用,并呈时间依赖性。塞来昔布与长春新碱联合作用于KB/VCR细胞24、48、72 h后,其生长抑制率分别为(37.53±2.05)%、(46.67±3.17)%及(54.02±1.53)%,显著高于塞来昔布和长春新碱单独用药组(P均<0.01)。塞来昔布与VCR联合应用能改变细胞周期分布,与VCR组相比,联合用药组G0/G1期细胞数量增加(56.08±0.46)%,S期和G2/M期细胞数目降低[S期:(22.83±0.20)%;G2/M期:(21.09±0.66)%]。此外,与VCR组细胞相比,联合用药能显著降低Cyclin D1的表达,增强p21WAF1/CIP1的表达,并且Cyclin D1蛋白水平的降低及p21WAF1/CIP1蛋白水平的上升伴随着P-gp蛋白的下调。结论塞来昔布下调节P-gp而增强KB/VCR细胞对化疗药物的敏感性可能与Cyclin D1和p21WAF1/CIP1蛋白变化引起的细胞周期阻滞有关。
- 廖汶晓闫怡轩黄艳青李伟忠
- 关键词：环氧化酶-2塞来昔布P糖蛋白KB
- TIMP-2基因过表达抑制成釉细胞瘤侵袭性生长的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的探讨基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)基因转染体外培养的人成釉细胞瘤(AM)细胞侵袭性生物学行为的改变,进一步研究MMP-2、TIMP-2与AM局部侵袭性的关系。方法 pcDNA3.1(+)/GFP-TIMP-2质粒转染人AM细胞。空白对照组:不加任何处理因素;脂质体对照组:加入4μL Lipo-fectamine 2000和250μL Opti-MEMⅠ混合物;转染阴性载体对照组(P0):转染2μg阴性对照质粒pcDNA3.1(+)/GFP;实验组:分别转染不同浓度的质粒pcDNA3.1(+)/GFP-TIMPI 1μg(P1)、2μg(P2)、3μg(P3)。倒置相差荧光显微镜观察转染情况,流式细胞仪测定转染效率。明胶酶谱法检测基质蛋白酶-2(MMP-2)的活性。逆向明胶酶谱法检测TIMP-2的活性。RT-PCR分析MMP-2以及TIMP-2 mRNA的表达。Western blot分析MMP-2及TIMP-2蛋白的表达情况。三维培养观察分析细胞生长状况。Transwell微侵袭分析。结果与空白对照组比较,不同浓度质粒转染组的MMP-2均有不同程度的抑制,差异有显著性(P<0.05);72 h MMP-2抑制率为54.38%。TIMP-2的活性均有不同程度的增加,差异有统计学意义(P<0.05);72 h的TIMP-2增加率为43.75%。MMP-2蛋白表达水平P2明显低于P1、P3组,差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组比较,转染72 h后,不同质粒组的MMP-2蛋白表达水平的抑制率分别为16.1%、45.3%及39.6%。不同浓度组的TIMP-2蛋白表达水平的增加率分别为26.1%、61.3%及32.6%。在Transwell中培养72 h后,各对照组之间细胞的细胞计数差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,质粒转染组Transwell下室细胞的细胞数明显减少(P<0.05)。两组的相对侵袭抑制率分别为53.7%及46.9%。结论 TIMP-2基因转染AM细胞后,TIMP-2的mR-NA及蛋白表达增加,蛋白活性亦增加;MMP-2 mRNA表达量无明显改变,其蛋白表达量及活性降低。细胞的侵袭性被部分抑制,可能机制是TIMP-2基因过表达使MMP-2活性降低所致。TIMP-2及MMP-2以及两者的关系可能是影响AM局�
- 张磊涛李伟忠黄洪章
- 关键词：成釉细胞瘤基质金属蛋白酶组织抑制剂-2
- 塞来昔布对耐长春新碱细胞株KB/VCR增殖影响及其机制的探讨被引量：2
- 2011年
- 目的:观察选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对口腔癌耐长春新碱细胞株KB/VCR细胞增殖的影响及对P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法:将KB/VCR细胞分为长春新碱组、塞来昔布组、长春新碱联合塞来昔布用药组及对照组,采用MTT法检测对KB/VCR细胞的生长抑制作用,蛋白质印迹法检测P-gp蛋白的表达,流式细胞术检测细胞内Rho123的蓄积。结果:长春新碱与塞来昔布联合用药组对细胞生长抑制作用明显高于长春新碱组和塞来昔布组(P均<0.01)。长春新碱与塞来昔布联合用药组及塞来昔布组细胞的P-gp表达水平显著低于长春新碱组和对照组。长春新碱与塞来昔布联合用药组及塞来昔布组细胞内Rho123的荧光强度显著高于长春新碱组和对照组。结论:COX-2抑制剂塞来昔布可显著增强KB/VCR细胞对长春新碱的敏感性,其作用机制可能与下调P-gp的表达,增加细胞内长春新碱的蓄积有关。
- 闫怡轩李伟忠
- 关键词：环氧化酶-2塞来昔布
