国家自然科学基金(30873022)
- 作品数：7 被引量：28H指数：2
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- 胰岛素样生长因子2的基因组印迹及与肿瘤关系的研究进展被引量：12
- 2010年
- 王书奎
- 关键词：胰岛素样生长因子2基因组印迹肿瘤靶向治疗
- 联合检测血清F-PSA、T-PSA、F/T对前列腺癌的诊断意义
- 2009年
- 目的:探讨F-PSA、T-PSA及F-PSA/T-PSA(F/T)比值在前列腺癌诊断中的价值。方法:采用全自动免疫荧光分析仪检测50例正常健康体检者,78例前列腺癌患者(PCa)以及184例良性前列腺增生患者(BPH)血清中F-PSA、T-PSA及F/T比值,并对各组数值结果进行比较分析。结果:结果显示PCa组血清F-PSA、T-PSA高于BPH组及正常对照组(P<0.01,P<0.01);而F/T值低于BPH组及正常对照组(P<0.01,P<0.01)。T-PSA处于4-10ng/ml时,PCa组T-PSA水平与BPH组比较无显著性差异(P>0.05),但PCa组F/T值显著低于BPH组,两者间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:联合检测F-PSA、T-PSA及F/T比值对PCa的鉴别诊断及高危人群的筛查均具有重要意义。
- 李国敏潘玉琴何帮顺张丽荣王波王书奎
- 关键词：前列腺癌良性前列腺增生F-PSAT-PSA
- IGF2基因组印迹系统人重组腺病毒载体的构建与鉴定
- 2009年
- 目的:构建携带IGF2印迹系统的腺病毒载体,并验证其在肿瘤细胞及正常细胞中的功效,为IGF2印迹在肿瘤靶向治疗中的应用提供理论基础。方法:将人源的IGF2印迹系统启动子H19、增强子enhancer及甲基化区域CTCF克隆至穿梭质粒pDC-312中构建IGF2基因印迹系统,从pDC-315-EGFP质粒中扩增出EGFP片段插入到构建好的IGF2印迹系统中,然后与腺病毒骨架Ad5通过脂质体Lipofectamine 2000介导共转染HEK293细胞,包装成有感染能力的腺病毒Ad-H19-CTCF-enhancer-EGFP,命名为Ad-EGFP;构建好的腺病毒分别感染IGF2基因印记保持的细胞MCF-7和GES-1及IGF2基因印迹丢失的细胞HRT-18,荧光显微镜下观察EGFP在三种细胞中表达的差异。结果:转染腺病毒载体的HEK293细胞表达EGFP随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应,EGFP在HRT-18细胞中有大量表达,在MCF-7和GES-1细胞中不表达或仅有少量表达。结论:成功构建了携带IGF2基因印迹系统的腺病毒载体,证明其在IGF2基因印迹丢失的肿瘤细胞中特异性的表达,在正常细胞及IGF2基因印迹保持细胞中不表达,为IGF2基因印迹系统应用于肿瘤细胞的靶向治疗提供了理论基础。
- 张丽荣渠利利王波何帮顺潘玉琴徐勇飞朱蝉王书奎
- 关键词：基因印迹IGF2靶向治疗
- 甲状腺功能异常患者血清同型半胱氨酸及血脂水平检测的临床意义被引量：1
- 2009年
- 目的:研究原发性甲状腺功能减退症患者和甲状腺功能亢进患者血清同型半脱氨酸(Hcy)、血脂水平与心血管疾病的关系。方法:检测29例原发性甲减者、35例甲亢患者以及30例健康体检者(对照组)的空腹血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、Hcy、甘油三酯(TG)、总胆固醇(Tch)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,并对其进行相关分析。结果:原发性甲减患者Hcy、TG、Tch、LDL-C水平明显高于对照组(p<0.01、0.01、0.01、0.01),而HDL-C水平却与对照组相比明显降低(p<0.01);相关分析表明,甲减患者Hcy与FT3、FT4水平间呈显著负相关(r=-0.432、-0.354,p<0.01、0.01),与TG、Tch水平呈显著正相关(r=0.339、0.452,p<0.01、0.01);而与HDL-C、LDL-C均无相关性。甲亢组Hcy和Tch水平较正常对照组明显降低(p<0.01、0.01),Hcy与FT4水平间呈显著负相关(r=-0.408,p<0.01)。结论:血清同型半胱氨酸水平可能对判断甲状腺功能有辅助作用;甲状腺激素水平影响了Hcy及血脂水平的代谢;血清Hcy水平升高是甲减患者易患心血管疾病的危险因素。
- 吴在荣张丽荣潘玉琴何帮顺王波王书奎
- 关键词：同型半胱氨酸甲状腺激素甲减甲亢
- 重组腺病毒Ad-DT-A靶向治疗胰岛素样生长因子2基因组印迹丢失的肿瘤细胞株被引量：1
- 2011年
- 目的构建携带胰岛素样生长因子2（IGF2）印迹系统的重组腺病毒，探讨其用于肿瘤靶向治疗的可行性。方法采用聚合酶链反应（PCR）扩增H19enhancer、DMD以及H19启动子序列，并克隆至pDC-312中；扩增出增强型绿色荧光蛋白（EGFP）和白喉毒素A（DT．A）片段，分别插入到构建好的重组质粒中，构建成重组腺病毒穿梭质粒。重组腺病毒穿梭质粒与Ad5共转染，产生重组腺病毒Ad—EGFP和Ad—DT—A。以Ad—EGFP分别感染正常IGF2印迹（MOI）细胞GES．1和MCF-7以及IGF2印迹丢失（LOI）细胞HCT-8，荧光显微镜下观察各组细胞中EGFP的表达。通过检测腺病毒衣壳蛋白hexon基因的表达证实腺病毒的感染，采用逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）和Western blot方法检测Ad—DT—A感染后各组细胞中DT—A基因的表达；采用四甲基偶氮唑蓝（M1Tr）法和流式细胞术检测Ad—DT—A体外抗肿瘤效应。构建皮下移植瘤裸鼠模型，研究Ad-DT-A在体内的抑瘤作用。结果所构建重组腺病毒Ad-EGFP感染各组细胞后，EGFP蛋白仅在IGF2LOI细胞HCT。8中表达。各组细胞经Ad—DT—A感染后，DT-A基因仅在HCT-8细胞中表达；且HCT-8细胞以每个细胞10PFU的Ad．DT-A感染72h后，其增殖活力降低至（75．4±6．4）％，凋亡率升高至（20．8±5．9）％。Ad-DT-A多点注射人HCT-8移植瘤内，Ad—DT—A能够有效抑制移植瘤的生长，抑瘤率达36．4％。结论成功构建了携带IGF2印迹系统和DT-A基因的重组腺病毒。重组腺病毒Ad—DT-A能够有效杀伤IGF2LOI肿瘤细胞，为依赖IGF2LOI的肿瘤靶向治疗开拓了新的途径。
- 潘玉琴何帮顺朱蝉渠利利徐勇飞王书奎
- 关键词：GES-1细胞靶向治疗重组腺病毒
- IGF2的生物学特性及其与疾病关系的研究进展被引量：14
- 2010年
- 胰岛素样生长因子-2(insulin-like growth factor 2,IGF2)基因是最早发现的内源性印迹基因,其表达、调控不遵循孟德尔遗传规律。IFG2是一种多功能细胞增殖调控因子,在细胞的分化、增殖、胚胎的生长发育以及肿瘤细胞增殖中具有重要的促进作用。现就IGF2基因结构与定位、表达机制、生物学意义及其与疾病发生的关系等作一综述。
- 朱婵徐勇飞渠利利王书奎
- 关键词：胰岛素样生长因子2基因组印迹肿瘤
- CD147-shRNA对胃癌细胞CD147表达的抑制作用
- 2010年
- 目的:构建CD147-shRNA重组质粒并检测其对胃癌细胞SGC7901内源性CD147表达的抑制作用。方法:构建靶向CD147的siRNA表达载体pSilencer-CD147siRNA,稳定转染至SGC7901细胞中,通过Real-time PCR和Western blot法检测转染细胞中CD147表达水平的变化。结果:酶切鉴定和测序证实成功构建pSilencer-siRNA1,pSilencer-siRNA2和pSilencer-negative,转染后SGC7901中CD147表达水平显著降,而以pSilencer-siRNA2抑制作用最为显著。结论:构建pSilencer-CD147siRNA成功,并筛选出基因抑制效果抑制最佳的pSilencer-siRNA2,为进一步实验打下了基础。
- 渠利利王波徐勇飞何帮顺潘玉琴朱婵王书奎
- 关键词：RNA干扰CD147胃癌
