湖南省自然科学基金(06JJ2048)
- 作品数:3 被引量:21H指数:2
- 相关作者:梁晓秋张杨刘小敏王晓娟吴艳更多>>
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- 三氧化二砷诱导人肝癌HepG_2细胞凋亡及细胞周期阻滞的研究被引量:7
- 2008年
- 目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用,以及诱导细胞凋亡和对周期分布的影响。方法采用MTT法、DNA ladder检测、流式细胞术等方法检测As2O3对人肝癌HepG2细胞的生长抑制,诱导细胞凋亡以及对细胞周期分布的影响。结果MTT法显示:As2O3对HepG2细胞有明显的生长抑制作用,且具有剂量和时间依赖性。12μmol/L As2O3作用HepG2细胞24、48、72 h后,DNA ladder检测,48、72 h均出现凋亡典型的DNA ladder条带;流式细胞仪分析显示:As2O3处理HepG2细胞24、48、72 h后,凋亡率分别为(9.74±1.22)%、(21.89±2.14)%、(42.72±0.83)%,均显著高于对照组细胞的凋亡率(0.98±0.11)%(P(0.01)。同时,流式细胞仪分析显示,As2O3对HepG2细胞有明显的S期和G2期阻滞作用。结论As2O3对人肝癌HepG2细胞S期和G1期阻滞并诱导细胞凋亡可能是其抗肿瘤的机制之一。
- 王晓娟刘小敏曾春亚张杨梁晓秋
- 关键词:三氧化二砷肝癌细胞周期
- PIG11与热休克蛋白60的相互作用介导肝癌HepG2细胞凋亡
- 2010年
- 为了探讨候选肝癌抑癌蛋白PIG11(p53-induced gene11,PIG11)诱导细胞凋亡的机制,首次在HepG2细胞株中鉴定了11个PIG11结合蛋白,热休克蛋白60(heat shock protein60,Hsp60)为其中之一.采用免疫共沉淀联合Western blot技术对Hsp60进行了验证.用Western blot检测其蛋白质表达,结果显示:pLXSN-PIG11-HepG2细胞中Hsp60蛋白表达较pLXSN-HepG2、HepG2细胞组下调(n=3,P<0.01).选取与Hsp60关系密切的Bax蛋白进行研究,Western blot结果显示PIG11高表达可引起胞浆Bax向线粒体转位.以上结果表明,PIG11蛋白能与HepG2细胞中的Hsp60结合,促进Hsp60-Bax的分离,引起Bax从胞液到线粒体转位,激活线粒体凋亡途径,这可能是其诱导HepG2细胞凋亡的主要机制之一.
- 刘小敏胡蓉梁晓秋王晓娟王燕张杨
- 关键词:HSP60HEPG2BAX
- 活性氧改变在PIG11高表达诱导人肝癌HepG_2细胞凋亡中的作用被引量:14
- 2009年
- 目的:探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)改变在PIG11蛋白高表达诱导人肝癌HepG2细胞凋亡中的作用。方法:本研究采用2’,7’-二氯氢化荧光素二脂(2’,7’-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)荧光探针标记PIG11蛋白高表达肝癌细胞株pLXSN-PIG11-HepG2细胞内ROS,用N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcystine,NAC)清除细胞内ROS后,FCM检测细胞内ROS水平的变化以及细胞凋亡率。结果:FCM测定结果显示,pLXSN-PIG11-HepG2细胞内ROS水平(15.60±0.92)明显高于pLXSN-HepG2细胞(4.90±0.70)和HepG2细胞(5.37±1.17),差异有统计学意义(P<0.01)。NAC(10 mmol/L)清除细胞内ROS后,FCM检测显示pLXSN-PIG11-HepG2细胞凋亡率较未清除前明显降低(P<0.01)。结论:PIG11高表达诱导细胞凋亡的机制可能与细胞内ROS水平升高有关。
- 刘小敏王晓娟张杨吴艳梁晓秋
- 关键词:活性氧细胞凋亡