甘肃省科技攻关计划(GS022-A43-137)
- 作品数：9 被引量：45H指数：4
- 相关作者：魏虎来张亚莉马艳云陈静郭璐更多>>
- 相关机构：兰州大学皖南医学院西北民族大学更多>>
- 发文基金：甘肃省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- NAC拮抗As2O3对外周血淋巴细胞的毒性作用被引量：1
- 2011年
- 目的探讨N-乙酰-L-半胱氨酸(N acetylcysteine,NAC)拮抗As2O3对人淋巴细胞的毒性作用及机制。方法从正常人外周血中分离淋巴细胞,台盼蓝染色检测细胞活性;FITC-Annexin-V/PI染色检测细胞凋亡;电镜观察形态学改变;流式细胞术观察细胞内ROS水平及Bcl-2表达水平。结果 As2O3抑制人外周血淋巴细胞的增殖,细胞呈现典型的凋亡细胞特征性形态学改变,FITC-Annexin-V/PI染色发现凋亡细胞增多,同时,细胞内ROS水平增高和Bcl-2蛋白的表达水平下降。NAC与As2O3联合作用于淋巴细胞,细胞增殖抑制和凋亡均明显降低,细胞内ROS水平明显降低,Bcl-2蛋白表达水平回升。结论 As2O3对人淋巴细胞有明显的毒性效应,NAC可通过清除细胞内ROS和促进Bcl-2蛋白的表达而拮抗As2O3对淋巴细胞的毒性。
- 李彩丽魏虎来苏海翔
- 关键词：淋巴细胞
- 三氧化二砷对淋巴细胞的毒性作用及机制研究被引量：8
- 2006年
- 目的研究As2O3对人外周血淋巴细胞的毒性作用,探讨As2O3损伤淋巴细胞的机制。方法从正常人外周血中分离淋巴细胞,台盼蓝染色检测细胞活性;FITG-Annexin-V／PI染色检测细胞凋亡;电镜观察形态学改变;流式细胞术观察细胞bcl-2表达水平。结果 1-50 μmol／L As2O3对正常人外周血淋巴细胞的生长有明显的抑制作用,其抑制效应随着As2O3浓度的增高和作用时间的延长而增强,24、48、72 h的半数抑制浓度分别为7．74、4．81和3．19μmol／L。经10μmol／L As2O3处理的淋巴细胞出现细胞体积缩小、胞质浓缩、染色质聚集、固缩、沿核膜内侧分布呈新月形等典型的凋亡细胞特征性形态改变;2．0—10．0μmol／L As2O3可显著降低淋巴细胞bcl-2蛋白的表达水平。结论 As2O3对人外周血淋巴细胞有明显的毒性效应,主要作用机制为通过抑制bcl-2表达而诱发细胞凋亡。
- 李彩丽魏虎来易娟苏海翔
- 关键词：三氧化二砷淋巴细胞细胞凋亡BCL-2
- 三氧化二砷诱导K562/ADM耐药细胞凋亡中活性氧的作用被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨三氧化二砷(As2O3)诱导K562/ADM细胞凋亡中活性氧(ROS)的作用和其与耐药基因mdr1及其编码的P-糖蛋白(P-gp)表达的关系。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法检测K562/ADM细胞增殖活性;AnnexinⅤ/PI染色法检测细胞凋亡;RT-PCR检测mdr1基因mRNA的表达;流式细胞术测定P-gp表达、ROS活性和细胞内阿霉素(ADM)含量。结果:As2O3显著抑制K562/ADM细胞的增殖,AnnexinⅤ/PI双染检测显示凋亡细胞明显增加;ROS活性明显下降;mdr1mRNA和P-gp表达明显降低,P-gp功能受抑,细胞内ADM含量显著增高。结论:As2O3抑制K562/ADM耐药细胞的增殖活性和促进其凋亡,其机制可能为通过降低细胞ROS水平、抑制mdr1/P-gp的表达和功能,进而逆转mdr1/P-gp介导的多药耐药和凋亡抑制。
- 张亚莉魏虎来郭璐
- 关键词：三氧化二砷多药耐药活性氧P-糖蛋白
- 三氧化二砷诱导K562／ADM细胞内质网应激反应性凋亡的机制研究被引量：2
- 2009年
- 内质网应激反应性凋亡途径是不同于经典的线粒体途径和死亡受体途径的细胞凋亡通路。三氧化二砷（As2O3）对白血病以及其他实体肿瘤均具有良好的抗肿瘤效应，且与常规化疗药物无交叉耐药性。我们的前期研究证实As2O3可通过内质网应激反应性凋亡途径诱导白血病多药耐药（MDR）细胞凋亡，并调控多种耐药和凋亡相关基因的表达。本研究中我们以白血病MDR细胞K562／ADM为模型，探讨As2O3诱发耐药白血病细胞内质网应激反应性凋亡的可能机制。
- 陈静马艳云王蓓易娟李林静魏虎来
- 关键词：K562/ADM细胞细胞凋亡通路内质网应激三氧化二砷反应性耐药白血病细胞
- 三氧化二砷经内质网应激反应诱导K562/ADM耐药细胞凋亡被引量：5
- 2009年
- 目的探讨三氧化二砷(As2O3)能否通过内质网应激反应性凋亡途径诱发耐药白血病细胞凋亡。方法采用细胞形态学和AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡,电镜观察凋亡细胞内质网和线粒体形态结构变化;流式细胞术(FCM)测定线粒体跨膜电位(Δψm)、细胞内Ca2+和细胞色素c(Cyt c)含量及caspase-3活性;Western blot法检测GRP78/Bip蛋白表达。结果2、5μmol/L As2O3诱导K562/ADM细胞发生凋亡过程中,内质网明显扩张和脱颗粒,线粒体内外膜融合,嵴紊乱,肿胀,内膜扩张呈空泡样变。线粒体Δψm降低,细胞质Ca2+和Cyt c水平明显升高,caspase-3活性显著增强,GRP78蛋白表达增高。结论As2O3可诱导K562/ADM细胞发生内质网应激反应,通过内质网-线粒体途径诱导耐药白血病K562/ADM细胞凋亡。
- 马艳云陈静易娟李林静魏虎来
- 关键词：三氧化二砷内质网应激多药耐药白血病
- 三氧化二砷对K562/ADM耐药细胞凋亡抑制的逆转作用被引量：4
- 2007年
- 目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导白血病K562/ADM耐药细胞凋亡的分子机制。方法:采用MTT比色法检测K562/ADM耐药细胞增殖活性,细胞形态学和annexinV /PI双染色检测细胞凋亡,RT-PCR检测mdr1、bcl-2和caspase-3基因mRNA的表达水平,流式细胞法(FCM)测定P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和bcl-2蛋白表达及caspase-3活性。结果:As2O3显著抑制K562/ADM耐药细胞的增殖;经As2O3处理后细胞形态上出现典型的凋亡改变,annexinV /PI双染显示凋亡细胞明显增加;mdr1mRNA表达和P-gp合成明显降低,凋亡抑制基因bcl-2mRNA及其蛋白bcl-2表达下调,caspase-3mRNA表达和caspase-3活性显著增强。结论:As2O3诱导K562/ADM耐药细胞凋亡,其主要机制可能为As2O3抑制mdr1和bcl-2基因表达,逆转耐药白血病细胞因bcl-2和P-gp高表达所介导的凋亡抑制。
- 张亚莉魏虎来孙利军
- 关键词：三氧化二砷多药凋亡抑制
- 三氧化二砷诱导白血病K562细胞凋亡与线粒体和内质网的作用被引量：2
- 2009年
- 目的:研究三氧化二砷(Arsenic trioxide,As2O3)诱导白血病K562细胞凋亡的机制以及线粒体和内质网的作用。方法:采用MTT比色法测定细胞增殖活性,细胞形态学和AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡,电镜观察凋亡细胞内质网和线粒体形态结构变化;流式细胞术(FCM)测定线粒体跨膜电位(Δψm)、细胞内Ca2+浓度、活性氧(ROS)水平、细胞色素c(Cytc)含量及Caspase-3活性;RT-PCR检测GRP78 mRNA表达,Western blot法检测GRP78/Bip蛋白表达。结果:2mol/L和5mol/LAs2O3显著抑制K562细胞的增殖和诱导其凋亡。As2O3诱导K562细胞发生凋亡过程中,线粒体内外膜融合,嵴紊乱,肿胀,内膜扩张呈空泡样变,内质网明显扩张和脱颗粒;线粒体Δψm降低,细胞内Ca2+浓度、Cytc释放和ROS水平明显升高,Caspase-3活性显著增强;GRP78 mRNA和蛋白表达无明显改变。结论:线粒体和内质网均参与As2O3诱导K562细胞的凋亡过程,但不能触发内质网应激反应性凋亡。
- 马艳云陈静易娟王蓓魏虎来
- 关键词：三氧化二砷K562细胞线粒体内质网细胞凋亡
- 三氧化二砷诱导K562／ADM细胞凋亡过程中对bcl-2、survivin、ROS表达的影响被引量：11
- 2008年
- [目的]探讨As2O3诱导白血病K562/ADM耐药细胞凋亡的分子机制。[方法]采用MTT比色法检测K562/ADM增殖活性;细胞形态学和AnnexinⅤ/PI双染色检测细胞凋亡;RT-PCR检测bcl-2、survivin和caspase-3基因mRNA的表达水平;流式细胞法(FCM)测定bcl-2、caspase-3蛋白表达。激光共聚焦显微镜(LCSM)观察细胞内活性氧(ROS)产生情况。[结果]As2O3显著抑制K562/ADM细胞的增殖;经As2O3处理后细胞形态上出现典型的凋亡改变,AnnexinⅤ/PI双染显示凋亡细胞明显增加;凋亡抑制基因bcl-2、survivinmRNA及bcl-2蛋白表达下调,caspase-3 mRNA表达和caspase-3活性显著增强,ROS活性下降。[结论]As2O3诱导K562/ADM耐药细胞凋亡,与bcl-2和survivin表达下调,caspase-3活化有关,而与活性氧的氧化损伤无关。
- 张亚莉魏虎来孙利军
- 关键词：三氧化二砷BCL-2SURVIVINCASPASE-3细胞凋亡
- 三氧化二砷诱导K562/ADM细胞凋亡中mdr1和Survivin基因的表达被引量：14
- 2006年
- 目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)诱导白血病多药耐药K562/ADM细胞凋亡过程中mdr1和Sur vivin基因的表达变化。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性,细胞形态学、DNA片段化和细胞周期改变观察K562/ADM细胞凋亡;流式细胞术(FCM)测定Caspase3活性;RT PCR检测Sur vivin和mdr1mRNA的表达。结果:ATO可抑制K562/ADM细胞增殖,并出现典型凋亡形态改变,DNA电泳出现梯状条带(DNAladder);细胞周期分析显示,2～5μmol/LATO作用24h,细胞被阻滞在G2/M期,G1期细胞减少;72h时Sub G1期细胞分别为25.6%和52.9%。2～5μmol/LATO作用24～48h,mdr1mRNA和SurvivinmRNA表达水平明显下降,48h时mdr1mRNA的抑制率分别为83.4%和87.8%,SurvivinmRNA为21.6%和68.6%。ATO作用后,Caspase3活性明显增强,活化Caspase3由17.9%增加到47.4%。结论:ATO降低K562/ADM细胞mdr1和Survivin基因表达,解除P gp和Survivin对Caspases的抑制效应而促进耐药细胞凋亡。
- 张亚莉魏虎来郭璐
- 关键词：三氧化二砷多药耐药凋亡SURVIVINCASPASE-3
