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国家自然科学基金(30470984)

作品数:5 被引量:9H指数:2
相关作者:张义正吴波张希根何川颜永红更多>>
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发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
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文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学

主题

  • 4篇基因
  • 2篇蛋白
  • 2篇漆酶
  • 2篇毛栓菌
  • 2篇克隆
  • 2篇黄孢原毛平革...
  • 2篇基因表达
  • 2篇基因克隆
  • 2篇CDNA文库
  • 2篇粗毛栓菌
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质印迹
  • 1篇乙醇
  • 1篇乙醇脱氢酶
  • 1篇印迹
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光定量
  • 1篇荧光定量PC...
  • 1篇酵母
  • 1篇酵母双杂交

机构

  • 4篇四川大学

作者

  • 4篇张义正
  • 2篇吴波
  • 2篇何川
  • 2篇张希根
  • 1篇吴近名
  • 1篇陈月红
  • 1篇邵欢欢
  • 1篇姜权
  • 1篇张昆
  • 1篇冯红
  • 1篇曹庆华
  • 1篇胡国库
  • 1篇颜永红
  • 1篇谭雪梅

传媒

  • 1篇应用与环境生...
  • 1篇遗传
  • 1篇四川大学学报...
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇Genomi...

年份

  • 1篇2014
  • 2篇2009
  • 1篇2008
  • 1篇2006
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
黄孢原毛平革菌乙醇脱氢酶基因的克隆和表达被引量:2
2009年
乙醇是黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)在限氧培养条件下重要的代谢物之一,为了更好的理解P.chrysosporium在低氧条件下的代谢机制,文章从P.chrysosporium中克隆到一个长1071 bp的乙醇脱氢酶基因PCAdh1 cDNA,该基因编码一个由356个氨基酸组成的蛋白质,它与其他生物的乙醇脱氢酶的氨基酸序列的相似性很低,但酶催化活性位点序列却高度保守。将PCAdh1在大肠杆菌中表达,并获得有酶活性的重组蛋白。纯化的蛋白质用于制备抗体。半定量RT-PCR和Western blot分析结果显示,在限氧条件的培养过程中,PCAdh1基因在mRNA水平和蛋白水平上都保持相对稳定,表明该基因的表达是组成型的;但从菌丝体提取的粗蛋白中的乙醇脱氢酶活性却随着培养时间的增加及氧气含量的持续降低而逐渐升高,这暗示P.chrysospo-rium中存在其他低氧诱导型乙醇脱氢酶基因的表达。
何川吴近名张希根吴波张义正
关键词:黄孢原毛平革菌乙醇脱氢酶基因克隆基因表达RT-PCR蛋白质印迹
粗毛栓菌漆酶基因的克隆、序列分析及荧光定量PCR分析
2014年
本研究通过提取不同培养条件下的粗毛栓菌总RNA,利用RT-PCR的方法克隆到1个新的漆酶基因,命名为Tglac3,编码区长1,560bp,预测编码519个氨基酸残基,其分子量为56.6kDa,理论等电点为5.77.用荧光定量RT-PCR法分析了该漆酶基因在不同培养条件下的表达水平,结果显示,高浓度的碳源和氮源均能诱导Tglac3基因的表达.
陈月红曹庆华邵欢欢张昆谭雪梅张义正
关键词:粗毛栓菌漆酶基因克隆荧光定量PCR
黄孢原毛平革菌酵母双杂交cDNA文库的构建及应用被引量:4
2006年
作为研究木质素降解系统的模式微生物黄孢原毛平革菌,迄今还没有蛋白-蛋白相互作用方面的报道.本研究利用酵母双杂交技术构建了低氮培养基中培养2d和3d的酵母双杂交cDNA文库,分别得到2.5×105和3.0×105个重组子.以14-3-3蛋白为钓饵筛选3d cDNA文库,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp缺陷培养基平板上共获得了约600个单克隆,进一步分析发现,有30个克隆可激活3个报告基因.分离自这些克隆中的质粒DNA能转化大肠杆菌.利用HaeⅢ和Sau3AⅠ限制酶切分析可将它们分为4类.序列测定和同源分析结果表明,其中一类为14-3-3蛋白基因,提示14-3-3蛋白可形成二聚体,另外3类在GenBank没有明显同源的基因.通过SBASE网站预测,编号为Y2H333的克隆含有一个OB-fold核酸结合结构域(OB-fold nucleic acid binding domain).这些研究结果表明,所构建的黄孢原毛平革菌cDNA酵母杂交文库是成功的,14-3-3蛋白在黄孢原毛平革菌中能以蛋白-蛋白相互作用的形式发挥功能.
胡国库颜永红姜权吴波冯红张义正
关键词:黄孢原毛平革菌酵母双杂交CDNA文库
粗毛栓菌cDNA文库的构建和漆酶基因的表达分析被引量:3
2009年
粗毛栓菌(Trametesgallica)能够分泌多种胞外氧化酶并且快速降解木质纤维素.为了快速高效分离鉴定粗毛栓菌木质纤维素降解酶相关基因,用Trizol试剂提取不同培养条件下粗毛栓菌总RNA,用CreatorTM SMARTTM cDNA Library Construction Kit和Advantage 2PCR Kit成功构建了该菌全长cDNA文库.原始文库滴度为1.5×105cfu,重组率达99%,插入片段在0.7~2.0kb之间,平均大小约1kb.随机取16个重组子进行测序,全长cDNA序列完整性率为85.7%;并筛选到1个漆酶基因,编码区长1551bp,预测的蛋白质由517个氨基酸残基组成,分子量为55.41kD,等电点为4.76.用半定量RT-PCR法分析了该漆酶基因在不同培养条件下的表达水平.结果显示,高浓度的碳源,氮源,Cu2+均能诱导此基因的表达,该结果为漆酶基因的表达调控机制的深入研究奠定了基础.
张希根何川张义正
关键词:粗毛栓菌CDNA文库漆酶基因表达
SCGPred:A Score-based Method for Gene Structure Prediction by Combining Multiple Sources of Evidence
2008年
Predicting protein-coding genes still remains a significant challenge. Although a variety of computational programs that use commonly machine learning methods have emerged,the accuracy of predictions remains a low level when implementing in large genomic sequences. Moreover,computational gene finding in newly se-quenced genomes is especially a difficult task due to the absence of a training set of abundant validated genes. Here we present a new gene-finding program,SCGPred,to improve the accuracy of prediction by combining multiple sources of evidence. SCGPred can perform both supervised method in previously well-studied genomes and unsupervised one in novel genomes. By testing with datasets composed of large DNA sequences from human and a novel genome of Ustilago maydi,SCG-Pred gains a significant improvement in comparison to the popular ab initio gene predictors. We also demonstrate that SCGPred can significantly improve predic-tion in novel genomes by combining several foreign gene finders with similarity alignments,which is superior to other unsupervised methods. Therefore,SCG-Pred can serve as an alternative gene-finding tool for newly sequenced eukaryotic genomes. The program is freely available at http://bio.scu.edu.cn/SCGPred/.
Xiao LiQingan RenYang WengHaoyang CaiYunmin ZhuYizheng Zhang
关键词:基因结构基因组序列基因预测机器学习方法
共1页<1>
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