广东省科技计划工业攻关项目(2009B030801160)
- 作品数：2 被引量：11H指数：1
- 相关作者：刘韬黄红兵陈倩超毕惠嫦邓多更多>>
- 相关机构：中山大学中山大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省中医药管理局基金广东省医院药学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 建立用大鼠肝微粒体快速考察药物体外CYP3A1活性抑制的方法被引量：1
- 2012年
- 目的研究酮康唑对大鼠肝微粒体细胞色素P450同工酶3A1(CYP3A1)活性的作用,建立一种用大鼠肝微粒体快速考察药物体外CYP3A1活性抑制的方法。方法采集大鼠肝微粒体,随机分为对照组和药物处理组。酮康唑药物处理组分别加入不同浓度的酮康唑,对照组只加入培养液,混匀后放入37℃培养箱中孵育15 min,然后加入CYP 3A1底物睾酮,继续孵育10 min,最后加入内标物氢化可的松。用HPLC法测定睾酮经大鼠肝微粒体温孵后生成6-β羟基睾酮的量,代表CYP3A1的活性。结果各个处理组与对照组的比较差异均有显著性差异(P<0.05);提示在一定浓度范围内,大鼠同工酶CYP3A1的相对活性百分比随着酮康唑浓度的增加而逐渐减低,各处理组与对照组比较差异均有显著性意义(P<0.5)。半数抑制浓度(IC50)值为3.25μg/ml。结论酮康唑对大鼠肝微粒体细胞色素P450同工酶3A1的活性有强抑制作用,建立的通过大鼠肝微粒体快速考察药物体外CYP3A1探针抑制的方法重复性和稳定性均良好,为评价新药对大鼠肝微粒体CYP3A1的活性的体外作用提供可靠的检测手段。
- 梁蔚婷黄红兵刘韬
- 关键词：酮康唑肝微粒体细胞色素P450CYP3A4
- BCA法测定Sprague-Dawley大鼠肝微粒体蛋白浓度
- 目的建立酶标仪检测大鼠肝微粒体蛋白浓度的方法。方法大鼠尾静脉连续3d.注射0.9%氯化钠注射液2ml,第4d解剖大鼠,取肝脏,应用差速离心法提取大鼠肝微粒体,用BCA法测定肝微粒体蛋白浓度。结果蛋白标准曲线范围在0-0....
- 邓多陈倩超刘韬潘莹毕惠嫦黄红兵
- 关键词：肝微粒体蛋白浓度
- 文献传递
- 二喹啉甲酸检测法测定Sprague-Dawley大鼠肝微粒体蛋白浓度被引量：10
- 2010年
- 目的建立酶标仪检测大鼠肝微粒体蛋白浓度的方法。方法大鼠尾静脉连续3 d注射0.9%氯化钠注射液2 ml,第4 d解剖大鼠,取肝脏,应用差速离心法提取大鼠肝微粒体,用二喹啉甲酸检测（BCA）法测定肝微粒体蛋白浓度。结果蛋白标准曲线范围在0~0.5mg/ml,回归方程为Y=0.091 9＋0.868X,（R=0.998）。低、中、高浓度回收率分别为101.33%,110.67%,101.17%,日内和日间精密度分别为6.52%,0.53%,1.95%和3.01%,7.23%,0.74%。结论本实验建立的BCA蛋白测定法准确可靠,重复性和稳定性均良好,相比较传统的蛋白测定方法,更为迅速,具有较强的抗干扰的能力,为研究用药后肝微粒体酶活性的改变提供可靠的检测手段。
- 邓多陈倩超刘韬潘莹毕惠嫦黄红兵
- 关键词：肝微粒体蛋白浓度
