河南省科技攻关计划(2009B230016)
- 作品数:7 被引量:16H指数:3
- 相关作者:赵丽李艳玲郭宏伟赵玉丛陈红英更多>>
- 相关机构:郑州牧业工程高等专科学校河南农业大学河南工业贸易职业学院更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划河南省高校青年骨干教师资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪伪狂犬病病毒SYBR-GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:6
- 2010年
- 根据GenBank中猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因的序列(EF552427),设计并合成1对引物。通过常规PCR扩增猪伪狂犬病病毒gE基因,将鉴定正确的gE基因片段克隆入pTG19-T载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒。以该阳性重组质粒为作为模板建立SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和溶解曲线,并做灵敏性试验、特异性试验和重复性试验。结果表明,标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,溶解曲线特异,相关系数为0.9999,最低检测的拷贝数为35.4拷贝/25μL,比常规PCR高10倍,特异性和重复性较好并能对样品进行定量检测等优点。本研究成功的建立了检测猪伪狂犬病病毒的SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR方法,为该病的早期诊断及定量分析猪伪狂犬病病毒感染程度奠定了基础。
- 赵丽崔保安陈红英赵玉丛郭宏伟
- 关键词:猪伪狂犬病病毒实时定量PCR
- 鸡大肠杆菌病的中药防治被引量:3
- 2012年
- 2010年8月份,河南南阳某鸡场肉鸡6000只,按常规免疫程序对鸡群进行禽流感、新城疫等疫病免疫。鸡群采取地面平养,自配饲料,鸡群密度较大,通风不良。饲养至7周龄时由于连续多天天气闷热加上垫料没有及时更换,部分鸡只表现精神、食欲不振,羽毛蓬乱,呼吸音异常,排黄绿或拉白色稀粪便,呈零星死亡。发病后,饲养员用红霉素、林可霉素饮水,氟哌酸原粉拌料均无明显效果,仍有不断死亡。
- 赵丽李艳玲
- 关键词:鸡大肠杆菌病中药防治鸡群密度地面平养自配饲料通风不良
- 一例鸡大肠杆菌病的诊治
- 2012年
- 1发病情况
2010年8月份,南阳市某鸡场肉鸡6 000只,按常规免疫程序对鸡群进行禽流感、新城疫等疫病免疫。鸡群采取地面平养,自配饲料,鸡群密度较大,通风不良。饲养至7周龄时由于连续多天天气闷热,加上垫料没有及时更换,部分鸡只表现精神、食欲不振,羽毛蓬乱,呼吸音异常,排黄绿或白色拉稀粪便,呈零星死亡。。发病后,饲养员用红霉素、林可霉素饮水,氟哌酸原粉拌料均无明显效罘,仍不断死亡。
- 赵丽李艳玲
- 关键词:鸡大肠杆菌病诊治鸡群密度地面平养自配饲料通风不良
- 生物制品中猪细小病毒污染的快速检测被引量:1
- 2013年
- 为了研究生物制品生产过程中污染病毒的快速检测,试验采用GenBank报道的猪细小病毒(PPV)基因组序列,设计合成1对引物,通过优化聚合酶链式反应(PCR)的条件,成功地从被PPV感染的生物制品细胞培养物中扩增出320 bp片段,回收该片段并酶切证实了该扩增片段的特异性。结果表明:该方法可以检测出10 fg的PPV基因组。说明本试验建立的PCR方法对生物制品生产过程中污染的外源PPV的检测具有快速、简便、经济、灵敏度高和特异性强的特点。
- 赵丽卢婷婷马小四
- 关键词:生物制品PCR
- 河南长白猪白细胞介素18基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量:1
- 2012年
- 为了获取河南长白猪白细胞介素18(IL-18)基因的表达产物,试验从6月龄河南长白猪脾脏分离的淋巴细胞中提取总RNA,然后进行RT-PCR扩增,对扩增产物克隆、测序后获得河南长白猪IL-18基因成熟蛋白序列。利用基因重组技术将河南长白猪IL-18成熟蛋白编码区(500 bp)定向插入原核表达载体pQE30中,构建重组表达质粒pQE-pIL-18,转化大肠杆菌M15,并用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导。结果表明:经序列分析,河南长白猪IL-18基因全长为500 bp;SDS-PAGE分析可检测到分子质量约为45 ku的重组蛋白。
- 段永兰赵丽
- 关键词:克隆原核表达
- 一例猪伪狂犬病的PCR诊断与防制被引量:4
- 2011年
- 2010年6月,河南省南阳某猪场发生一种妊娠母猪流产、部分猪产死胎,继而出现新生子猪死亡为特征的疾病。根据猪伪狂犬病病毒gE基因序列设计、合成1对引物,提取病死猪的肝、肺、脾、淋巴结的DNA,经聚合酶链反应(PCR)扩增,检测为猪伪狂犬病病毒阳性,结合病史和临床症状,诊断为猪伪狂犬病。对该猪场采取综合防制措施,取得了较好的效果。
- 赵丽郭宏伟
- 关键词:猪伪狂犬病病毒PCR防制
- 一例鸡大肠杆菌病的防治被引量:1
- 2011年
- 鸡大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌(Esche-richiacoli)所引起的一种传染病。该病病理变化复杂,主要表现为败血症、脐炎、气囊炎、全眼眼球炎、输卵管炎、腹膜炎、肉芽肿等症状。鸡大肠杆菌病是危害养鸡业的一种重要细菌性疾病,各种年龄、品种的鸡都有易感性,但主要危害雏鸡,尤其是肉雏鸡的易感性高,病死率几乎达100%,即使部分病鸡能治愈,但也会生长缓慢,饲料报酬低,给广大养殖户带来巨大的经济损失。
- 赵丽李艳玲
- 关键词:鸡大肠杆菌病致病性大肠杆菌细菌性疾病病理变化输卵管炎饲料报酬