辽宁省科技厅资助项目(20062109)
- 作品数：1 被引量：11H指数：1
- 相关作者：刘月萍张喆祝儒刚吕淑霞胡英更多>>
- 相关机构：沈阳农业大学辽宁省疾病预防控制中心辽宁大学更多>>
- 发文基金：沈阳市科技局资助项目辽宁省科技厅资助项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程更多>>
- 扩增内标在副溶血弧菌多重PCR检测方法中的应用被引量：11
- 2010年
- 建立扩增内标存在下同时检测副溶血弧菌tlh基因和trh基因的多重PCR方法。以细菌16SrDNA片段为扩增内标对照(internal amplification control,IAC),副溶血弧菌不耐热溶血毒素(thermolabile hemolysin,TLH)基因tlh和相对耐热直接溶血毒素(thermostable related hemolysin,TRH)基因trh为检测基因,设计引物,并优化多重PCR体系。特异性及灵敏度试验结果表明:该多重PCR体系检测致病性副溶血弧菌表现出极好的特异性。纯培养条件下,扩增内标存在时tlh基因和致病基因trh的检测灵敏度分别为1.3×102 cfu.mL-1和1.3×103 cfu.mL-1;人工污染牡蛎样品,不经富集培养,扩增内标存在时tlh基因和致病基因trh的检测灵敏度分别为2.6×103 cfu.mL-1和2.6×104 cfu.mL-1;经过6h的富集培养,tlh基因和trh基因的检测限均能达到2.6×102 cfu.mL-1。该检测体系特异性强、灵敏度高,并且扩增内标的存在可排除PCR检测致病性副溶血弧菌可能导致的假阴性结果,可提高检测的速度和精准度。
- 吕淑霞祝儒刚刘月萍张喆胡英
- 关键词：多重PCR副溶血弧菌特异性灵敏度
