广西科技厅资助项目(0592007-1G)
- 作品数：9 被引量：32H指数：4
- 相关作者：陈维平赵文婧李琴寇亚丽胡利霞更多>>
- 相关机构：广西医科大学新乡市中心医院桂林医学院附属医院更多>>
- 发文基金：广西科技厅资助项目广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 心肌组织裂解液诱导骨髓间充质干细胞向心肌组织样结构的分化被引量：7
- 2012年
- 背景:体内实验提示骨髓间充质干细胞所处的微环境对其分化的方向有着重要的影响。目的:体外诱导骨髓间充质干细胞分化形成心肌组织样结构。方法:选用生长良好的第3代骨髓间充质干细胞,以心肌组织裂解液连续培养4周,倒置显微镜下连续观察细胞形态特征的变化规律,收集诱导后的组织行苏木精-伊红染色,电镜观察其超微结构。采用波形蛋白、Ⅷ因子相关抗原进行免疫组织化学染色。结果与结论:以心肌组织裂解液连续诱导培养4周。第12天部分"竹节样"细胞融合形成多核肌管样结构,第14天肌管样结构出现有节律性的收缩,搏动频率为90～110次/min;透射电镜下细胞内可见肌节样结构,部分肌细胞具自律性搏动的功能特点;苏木精-伊红染色可见大量肌束样结构。提示心肌组织裂解液可模拟心肌组织微环境,有效促使骨髓间充质干细胞分化为具有典型形态结构特征和相应功能活动的心肌细胞,同时诱导部分骨髓间充质干细胞分化为结缔组织细胞、内皮样细胞,与心肌细胞共同形成心肌组织样结构。显示在特定微环境的适宜条件下,骨髓间充质干细胞具有多向分化、发育形成多种功能上密切相关的细胞,形成组织样结构的趋势。
- 赵文婧李琴吴卓陈维平
- 关键词：体外诱导分化间充质干细胞心肌
- 不同诱导剂定向诱导BMSCs分化为胰岛样结构的比较被引量：1
- 2018年
- 为了探讨骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）定向诱导分化成胰岛样结构的变化规律,本研究以胰腺组织裂解液为诱导剂,同时采用尼克酰胺诱导剂作为对照,以双硫腙染色筛选诱导所获得的细胞团,采用Mallory染色鉴别胰岛细胞,RT-PCR检测Insulin基因的表达。实验结果表明：诱导形成的胰岛样结构具有结缔组织样被膜包裹,Mallory染色可见胰岛样结构内有α、β样细胞,RT-PCR可检测到胰岛样结构内Insulin基因表达的阳性细胞。以上结果说明：胰腺组织裂解液能更好地模拟体内胰腺组织结构的微环境,诱导BMSCs分化为多种细胞,最终形成比较复杂的胰岛样结构。本研究结果为BMSCs定向诱导分化成胰腺细胞,提供了新的思路和方法。
- 王慧丰吴丽情徐亦辰韦雅淑刘红静赵文婧陈维平
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 生物蛋白胶复合骨髓间充质干细胞修复兔多层软组织缺损被引量：1
- 2011年
- 背景:符合软组织生理结构的生物蛋白胶适合作为修复软组织缺损的载体材料。目的:观察生物蛋白胶复合骨髓间充质干细胞修复软组织缺损的可行性。方法:在新西兰大白兔大腿处造成深达肌肉层,直径大于3cm的软组织缺损。将24只新西兰大白兔随机分为3组,实验组将同种异体来源的骨髓间充质干细胞复合生物蛋白胶注射到软组织缺损处,对照组将生物蛋白胶注射到软组织缺损处,模型组造模后不注射。结果与结论:术后14,21d创面收缩率,实验组>对照组>模型组(P<0.01);愈合时间,实验组<对照组<模型组(P<0.01)。结果显示以生物蛋白胶为载体复合骨髓间充质干细胞能快速的修复多层软组织缺损。
- 谢富荣林春博严冬雪杨渊
- 关键词：生物蛋白胶软组织缺损创面愈合
- 胰腺干细胞体外培养扩增的方法被引量：1
- 2011年
- 背景:胰腺干细胞在体外培养时极易分化,很难获得足够数量的胰腺干细胞。目的:探讨一种简便易行的胰腺干细胞体外扩增培养方法。方法:分离新生昆明小鼠胰腺,原代培养三四天,成纤维细胞中出现呈集落生长的胰腺干细胞后,以0.02%EDTA消减成纤维细胞的数量,降低其比例后继续培养,待细胞铺满培养瓶底的80%时,重复三四次,逐渐提高胰腺干细胞的数量。检测胰腺干细胞特异性标志Nestin。尼克酰胺诱导胰腺干细胞分化;双硫腙染色对胰岛样细胞团进行检测。结果与结论:消减胰腺成纤维细胞的数量及比例后,胰腺干细胞可持续表现出活跃的分裂增殖能力,胰腺干细胞的数量显著增加;细胞保持球形、单个大核、细胞质折光性强、表达(Nestin)。扩增的胰腺干细胞,以尼克酰胺诱导后分化为胰岛样细胞团,双硫腙染色阳性。提示,减少共培养中成纤维细胞的比例和数量,有利于胰腺干细胞的增殖,获得较多数量的胰腺干细胞。扩增后的胰腺干细胞仍保持未分化状态,在适当的体外诱导条件下能分化为胰岛样结构,具有一定的分化潜能。
- 寇亚丽胡利霞李琴赵文婧陈维平
- 关键词：胰腺干细胞扩增NESTIN胰岛样细胞团体外诱导
- 间充质干细胞分化为心肌细胞过程中细胞形态变化与Nkx2.5表达相关性的初步研究被引量：6
- 2015年
- 体外BMSCs分化为心肌细胞过程中,细胞在形态及相关基因的表达上发生明显的变化。本研究以心肌组织裂解液诱导BMSCs,观察分化过程中细胞形态变化,根据心肌细胞发生过程中细胞形态变化规律,选定5个检测点,行PCR检测细胞中Nkx2.5的表达,以探究分化过程中细胞形态变化与相关基因表达规律及其之间的相关性。实验结果表明BMSCs分化为心肌细胞的过程中,细胞形态变化呈现明显规律:由单个大核,胞浆饱满,折光性好的纺锤形;逐渐演变为短杆状;形成突起并连接成网状结构;细胞端相接呈"竹节样"改变;最后形成肌管样结构;诱导前细胞不表达Nkx2.5,诱导过程中随着细胞形态的不断变化Nkx2.5持续表达并逐渐增强。说明间充质干细胞分化为心肌细胞的过程中,Nkx2.5表达相对量的变化与细胞的形态变化可能有一定的相关。
- 刘玲珑吴卓赵文婧吴丽情徐亦辰陈维平
- 关键词：心肌细胞NKX2.5细胞形态
- 低渗结合自然沉降法分离兔骨髓间充质干细胞及其鉴定被引量：8
- 2011年
- 背景:骨髓间充质干细胞数量极少,10万个骨髓有核细胞中才有1个骨髓间充质干细胞,如何成功分离并鉴定骨髓间充质干细胞是研究中的关键工作。目的:建立完善的骨髓间充质干细胞体外分离培养体系,从细胞的形态、表型和功能方面鉴定骨髓间充质干细胞。方法:低渗原理去除杂细胞,结合自然沉降分离骨髓间充质细胞,并对其形态学特征进行光镜观察。对骨髓间充质细胞的表型进行流式细胞仪检测。并将骨髓间充质细胞向成骨细胞和脂肪细胞进行诱导分化,行形态学观察和碱性磷酸酶、Vonkossa、Ⅰ型胶原、油红O染色检测。结果与结论:实验分离获取的骨髓间充质细胞经表型鉴定为:CD29(+),CD45(-);向成骨细胞诱导后,碱性磷酸酶、矿化结节染色及Ⅰ型胶原检测均为阳性;向脂肪细胞诱导后,油红O染色阳性。结果表明实验分离的骨髓间充质细胞为类成纤维细胞样非造血类干细胞,此类细胞具有向成骨细胞和脂肪细胞分化的功能。
- 林春博杨渊陈维平
- 关键词：骨髓间充质干细胞自然沉降细胞形态细胞表型细胞功能
- 胰腺组织裂解液诱导骨髓间充质干细胞分化为胰岛样结构的鉴定被引量：3
- 2019年
- 背景:目前,体外已成功将骨髓间充质干细胞定向诱导分化为能够分泌胰岛素的胰岛样细胞团,但是对细胞的形态变化规律、胰岛样细胞团中内分泌细胞的类型及其相互关系的研究报道较少。目的:观察骨髓间充质干细胞定向分化为胰岛样结构过程中细胞的形态变化、内分泌细胞的组成及分布规律。方法:取生长良好的第3代骨髓间充质干细胞,扩增培养至细胞集落汇合占据瓶底面积80%,加入胰腺组织裂解液连续诱导培养。以双硫腙染色方法对骨髓间充质干细胞定向分化形成的细胞团进行初步筛选,Mallory染色鉴别胰岛内分泌细胞的类型及其分布;采用免疫荧光细胞化学染色法检测胰岛内分泌细胞中胰岛素、C肽、胰高血糖素和生长抑素蛋白表达。结果与结论:①双硫腙染色显示,随着诱导时间延长,阳性细胞数量逐渐增多;②Mallory染色显示,胰岛样细胞团内α样细胞位于周边,β样细胞分布在中央及周边,成纤维样细胞分布在周围;③免疫荧光染色显示,胰岛样细胞团内有胰岛素、C肽、胰高血糖素和生长抑素阳性细胞;④结果表明,在特定的微环境条件下,骨髓间充质干细胞能分化为胰岛样结构,内含α、β、δ样细胞,周围有类成纤维细胞包绕。
- 刘红静王慧丰韦雅淑赵文婧陈维平
- 关键词：骨髓间充质干细胞诱导分化内分泌细胞间质干细胞细胞分化胰岛
- 心肌组织裂解液诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化被引量：14
- 2011年
- 背景:干细胞具有"环境依赖性分化"特性,以心肌组织裂解液模拟心肌微环境诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞方向分化的研究甚少。目的:观察心肌组织裂解液对大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞方向分化的影响。方法:选用生长良好的第2代骨髓间充质干细胞,加入诱导液连续培养5周,连续观察细胞形态学特征的变化规律,采用α-Actin进行免疫细胞化学染色观察干细胞是否向肌细胞方向分化,收集诱导后的细胞行苏木精-伊红染色观察是否存在闰盘,并通过电镜观察其超微结构。结果与结论:加入诱导液后大部分细胞呈"竹节样",α-Actin免疫细胞化学染色阳性,表明间充质干细胞向肌细胞方向分化;苏木精-伊红染色可见闰盘,透射电镜下见排列整齐明暗相间的肌丝,扫描电镜下可见胞浆内有纤维状结构,说明"竹节样"细胞具有心肌细胞的典型形态结构特点。连续诱导12d多个区域出现成片的、具有自律性搏动的多核肌管结构。心肌组织裂解液可模拟心肌细胞的微环境,诱导骨髓间充质干细胞分化为具有典型形态结构特征和相应功能活动的心肌样细胞。
- 李琴赵文婧寇亚丽胡利霞陈维平
- 关键词：心肌骨髓间充质干细胞心肌样细胞
- 小鼠胚胎神经干细胞体外培养及鉴定的实验研究
- 2009年
- 目的:探讨小鼠胚胎神经干细胞体外分离培养增殖及分化,为进一步的实验研究提供基础。方法:分离孕13～15d的小鼠胚胎脑组织,在加入碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮细胞生长因子(EGF)的B27无血清培养基中克隆培养,并用10%的胎牛血清诱导其贴壁分化,应用免疫荧光染色方法行巢蛋白(Nestin),β-微管蛋白(β-tublin),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色,对神经干细胞(NSCs)及其分化的细胞进行鉴定。结果:分离培养的细胞可形成典型的神经球,并传代。细胞表达神经巢蛋白,并可诱导分化为神经细胞和神经胶质细胞。结论:小鼠胚胎神经干细胞能够在体外适宜的条件下大量增殖,并且具有多向分化潜能。
- 宫晓洁黎靖宇孙莉陈维平
- 关键词：神经干细胞分化小鼠
