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湖南省科技计划项目(2011SK2014)

作品数:6 被引量:13H指数:3
相关作者:刘如石许凤邱义兰李桑刘胜姿更多>>
相关机构:湖南师范大学生物技术有限公司湖南农业大学更多>>
发文基金:湖南省科技计划项目国家自然科学基金长沙市科技计划项目更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇单克隆
  • 2篇单克隆抗体
  • 2篇原核表达
  • 2篇微生物
  • 2篇抗体
  • 2篇克隆
  • 1篇代谢
  • 1篇单克隆抗体制...
  • 1篇蛋白
  • 1篇电洗脱
  • 1篇药物
  • 1篇药物代谢
  • 1篇杂交
  • 1篇杂交瘤
  • 1篇杂交瘤细胞
  • 1篇沼气
  • 1篇沼气池
  • 1篇诊断标志物
  • 1篇脂质
  • 1篇脂质代谢

机构

  • 6篇湖南师范大学
  • 1篇湖南农业大学
  • 1篇生物技术有限...

作者

  • 5篇刘如石
  • 4篇邱义兰
  • 4篇许凤
  • 3篇刘胜姿
  • 3篇李桑
  • 2篇邱果
  • 2篇吴俊文
  • 2篇李烨
  • 1篇田云
  • 1篇易银沙
  • 1篇王雷
  • 1篇吴莎莎
  • 1篇孙一兵
  • 1篇卢向阳
  • 1篇李小曼
  • 1篇童金英
  • 1篇郭向荣
  • 1篇颜亨梅
  • 1篇方俊
  • 1篇张琳

传媒

  • 3篇激光生物学报
  • 2篇生命科学研究
  • 1篇生物工程学报

年份

  • 1篇2015
  • 1篇2014
  • 1篇2013
  • 3篇2012
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
抗HCMV Pp65蛋白单克隆抗体的制备及性质研究被引量:1
2014年
人类巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)是一种机会性感染疱疹病毒,在人群中感染比较常见,但在免疫缺陷个体与新生儿中可引起严重的疾病。HCMV Pp65是HCMV活动感染的主要标志,也是临床检验检测HCMV感染的重要靶标。为研发抗HCMV Pp65蛋白单克隆抗体作为临床免疫检测HCMV感染的关键原料,本研究采用重组表达的HCMV Pp65蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠淋巴结细胞与sp2/0细胞融合,采用间接ELISA法筛选阳性克隆与效价测定,再用Western blotting进行抗体特异性鉴定,最后用免疫捕获PCR和免疫荧光法评价其应用前景。最终获得了1株能稳定分泌高效价的抗HCMV Pp65单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为8D6。Western blotting及间接ELISA检测其效价分别达1∶4 000和1∶105;细胞免疫荧光与免疫捕获PCR实验结果说明,该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有良好的亲和力和特异性,具有作为外周血细胞免疫荧光细胞化学和免疫捕获PCR检测HCMV临床感染的关键原料,也可作为双抗体夹心法检测HCMV临床感染的关键原料,为建立HCMV感染快速灵敏的临床诊断试剂打下了重要的基础。
邱果许凤邱义兰廖旻晶李烨刘胜姿李桑刘如石
关键词:人巨细胞病毒PP65蛋白杂交瘤细胞单克隆抗体
人羧酸酯酶1结构和功能的研究进展被引量:5
2012年
人羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,HCE1)是丝氨酸水解酶多基因家族的重要成员之一,它是一种参与肝脏外源物质解毒及代谢的肝羧酸酯酶。HCE1还能参与人体内胆固醇酯和游离脂肪酸的运输和代谢过程,与肝细胞肝癌的发生发展密切相关。文中就近十年来人羧酸酯酶1的分子结构、药物代谢、毒物代谢、脂质代谢及早期诊断肝细胞肝癌等功能方面的相关研究进展进行综述。
童金英易银沙曹蓬荣刘彩云王雷吕媛
关键词:药物代谢脂质代谢诊断标志物
乡村沼气池污泥微生物多样性的研究被引量:1
2015年
为了优化沼气池产气效率和开展污泥微生物多样性研究,通过对PCR-DGGE条件的优化,建立了农村户用沼气池污泥微生物16S r DNA V3区DGGE分析技术,通过DGGE技术分析了沼气池污泥中细菌和古细菌微生物多样性随沼气池深度的变化规律。同时通过构建污泥样品mcr A功能基因克隆文库,应用RFLP技术,开展了农村户用沼气池污泥样品中与次级代谢产物相关基因的功能基因多样性研究。结果显示,农村户用沼气池污泥中含有丰富的微生物资源,其中细菌群落受污泥深度因素影响小,而浅层污泥中古细菌群落与深层污泥中古菌群落却存在明显差异。所采集的沼气池污泥中含有较为丰富的产甲烷菌资源,其中可能存在类似功能或产生类似代谢物质的产甲烷菌。该结果为进一步优化群落结构、筛选功能基因提供了科学依据。
李桑张琳邱义兰刘胜姿孙一兵颜亨梅郭向荣刘如石
关键词:农村户用沼气池总DNA提取微生物多样性
人β-actin蛋白原核表达及其单克隆抗体制备
2012年
为获得分泌抗人β-actin蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,通过在大肠杆菌中原核表达人β-actin蛋白,以纯化的人β-actin蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠。经过细胞的融合及筛选获得1株能稳定分泌抗人β-actin蛋白McAb的杂交瘤细胞,命名为2B4。采用间接ELISA和Western blot方法对McAb的特异性、稳定性和适用范围进行鉴定。结果显示:蛋白的相对分子质量为43 kDa,可溶于8 mol/L尿素;杂交瘤细胞上清的抗体效价为1×105,腹水的抗体效价为1×107;间接ELISA结果表明,杂交瘤细胞在体外传20代或液氮冻存3个月后,分泌的抗体效价不变;37℃保存24 h后,抗体的效价开始下降。Western blot结果显示,单克隆抗体识别人、鼠、兔和鱼的β-actin蛋白,与其发生特异性反应。2B4分泌的单克隆抗体可以广泛的应用于细胞生物学和免疫学试验,具有良好的应用价值。
吴俊文许凤熊璎珞鲁健邱义兰刘胜姿李烨刘如石
关键词:原核表达电洗脱单克隆抗体Β-ACTIN
宏基因组学在胃肠道微生物研究中的应用被引量:3
2012年
动物胃肠道中普遍存在大量共生微生物群,对于它们的研究一直受制于纯培养技术。随着分子生物学的快速发展及其在微生物学及生态学上的应用,针对未培养微生物研究的一门新型学科——宏基因组技术应运而生并迅速发展。通过提取胃肠道粘膜表面以及内容物中微生物DNA,构建总DNA文库的方法,利用基因组学的研究策略,来研究胃肠道中微生物遗传组成及群落功能。宏基因组技术在胃肠道微生物研究中广泛的应用,对于医学、生态学、生物能源利用等领域的研究具有重大的价值。
吴莎莎卢向阳许源许凤吴俊文田云方俊刘如石
关键词:宏基因组胃肠道微生物
人巨细胞病毒pp65蛋白的原核表达及活性鉴定被引量:3
2013年
以病毒全基因组为模板,通过PCR技术扩增HCMV pp65基因编码序列,其产物连接到pMD18-T质粒,酶切并回收目的片段后克隆到表达载体pTO-T7,然后将重组质粒pTO-T7-pp65转化大肠杆菌ER2566,大量表达后将重组蛋白进行质谱法分析鉴定,再利用Western blot以及间接ELISA进行重组蛋白的活性及抗原性鉴定.结果显示:通过SDS-PAGE鉴定可知,大肠杆菌可能表达出了重组蛋白,质谱分析结果说明了重组蛋白为pp65蛋白,具有极高可信度,其相对分子质量约为63 kD,从Western blot和间接ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)的结果可知,pp65蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性与免疫原性,为制备相应的抗原诊断单克隆抗体打下了基础,同时也为开发HCMV IgG快速诊断ELISA试剂盒提供了可选原料.
许凤邱义兰邱果李桑何赛郑姣李小曼刘如石
关键词:免疫反应性免疫原性
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