转基因生物新品种培育专项(2011ZX08006-005) 作品数:2 被引量:32 H指数:2 相关作者: 武英 郭建凤 王继英 庄勋 王霄燕 更多>> 相关机构: 山东省农业科学院 扬州大学 江苏农牧科技职业学院 更多>> 发文基金: 转基因生物新品种培育专项 国家现代农业产业技术体系建设项目 国家生猪现代产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
猪精原干细胞体外分离培养及诱导分化的研究 被引量:4 2014年 本研究旨在建立猪精原干细胞(Porcine spermatogonial stem cells,pSSCs)体外分离和诱导分化,并探索pSSCs定向分化及分化过程中关键基因的表达情况。采用差速贴壁法分离pSSCs和支持细胞(Sertoli),采用生化和免疫学方法鉴定其干细胞特性;传至3代后通过添加不同诱导剂,诱导SSCs向脂肪细胞、神经元样细胞和成骨细胞分化,并通过生化染色、qRT-PCR和免疫细胞化学检测诱导效果。结果表明:分离得到的pSSCs在饲养层上生长良好,碱性磷酸酶(AKP)及SOX2、integrinα6、SSEA1、Dazl抗体鉴定均呈阳性,表明SSCs处在未分化状态。诱导8d后,甲苯胺蓝染色及NSE抗体鉴定成阳性,成功诱导SSCs为神经元样细胞;诱导16d后,ALP、Von Kossa染色及Collagon l抗体鉴定均呈阳性,诱导SSCs为成骨细胞;诱导22d后,油红O染色可见脂滴被染成红色,诱导SSCs成为脂肪细胞。在SSCs诱导过程中,qRT-PCR结果显示,Nestin和β-tubulin在6d左右表达量最高,Cbfα1和Osterix在12d左右表达量最高,PPARγ和C/EBPα在18d左右表达量最高。本研究成功分离获得pSSCs,并且pSSCs可分别定向诱导分化为成骨细胞、神经元样细胞和脂肪细胞,表达细胞特有标记基因。 陈庭锋 王霄燕 李东 施青青 张蕾 邱峰龙 刘志永 庄勋 卞桂华 宋成义 李碧春关键词:精原干细胞 体外培养 诱导分化 基因表达 全基因组关联分析在畜禽中的研究进展 被引量:28 2013年 全基因组关联分析(genome-wide association studies,GWAS)是近几年发展起来的一种复杂性状研究的新方法。在过去几年中,国内外不少研究者对畜禽的重要经济性状、遗传缺陷性疾病、复杂疾病的抗性、品种的某些特征等性状开展了GWAS。这些研究不仅大大丰富了畜禽标记辅助选择中可利用的分子标记,而且为这些性状分子机理的探索研究提供了重要线索。本文对国内外畜禽GWAS中所用的群体、主要分析方法和研究结果进行综述,并对GWAS的研究应用做一展望,以期为进一步利用GWAS进行畜禽各种性状遗传基础的研究提供参考。 王继英 王海霞 迟瑞宾 郭建凤 武英关键词:畜禽