湖北省自然科学基金(2001ABA004)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：屈伸宗义强彭冬君孙军田俊更多>>
- 相关机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TAT透膜肽介导VP3蛋白诱导HepG_2细胞凋亡效应的研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨TAT透膜肽介导VP3融合蛋白穿透生物膜及诱导HepG2细胞凋亡的效应,为临床应用生物大分子药物治疗肿瘤提供实验基础。方法常规构建TAT-VP3、TAT-GFP及TAT-GFP-VP3的3种融合蛋白的pET28 a原核表达载体,IPTG诱导融合蛋白表达,经镍金属鳌合层析柱纯化获得融合蛋白。通过蛋白转导实验观察其穿透生物膜的效应,利用DAPI染色及TUNEL法观察其诱导HepG2细胞凋亡的效应。结果融合蛋白TAT-GFP及TAT-GFP-VP3可进入体外培养的HepG2细胞,在荧光下可见绿色荧光,融合蛋白TAT-VP3及TAT-GFP-VP3可诱导体外培养的细胞凋亡。结论在VP3的N端加上TAT透膜肽形成的融合蛋白可有效穿透细胞膜,TAT-VP3融合蛋白能诱导HepG2细胞凋亡。
- 王小波孙军彭冬君闫莹邹珺陈娟宗义强屈伸
- EGFP-Apoptin融合蛋白诱导肿瘤细胞凋亡的研究被引量：2
- 2006年
- 目的 观察EGFP-Apoptin融合蛋白在肿瘤细胞中的分布和亚细胞定位，探讨Apoptin诱导肿瘤细胞凋亡的机制。方法 构建EGFP-Apoptin融合蛋白真核表达载体，用脂质体转染技术将其导入人肝癌细胞株HepG2中，在荧光显微镜下观察Apoptin在肿瘤细胞中的分布、亚细胞定位；用TUNEL法检测其在体外诱导肿瘤细胞凋亡的效应。结果 转染细胞中EGFP-Apoptin在肿瘤细胞中得以高表达，转染24h后逐渐从细胞质迁移至细胞核，最后定位于细胞核内。转染4～5d后逐渐诱导肿瘤细胞凋亡。结论 EGFP-Apoptin融合蛋白在肿瘤细胞中具有核定位效应，并诱导肿瘤细胞凋亡；EGFP-Apoptin可以作为研究Apoptin在肿瘤细胞中分布和亚细胞定位的有效工具，用以探讨Apoptin在体外诱导肿瘤细胞凋亡的机制。
- 寇冰彭冬君孙军田俊宗义强屈伸
- 关键词：凋亡素细胞凋亡增强型绿色荧光蛋白
- 脱唾液酸糖蛋白受体介导的vp3基因靶向性治疗肝癌的实验研究被引量：2
- 2004年
- 目的利用肝细胞表面存在特异的脱唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR),探索ASGPR介导的vp3基因肝细胞靶向性治疗肝癌的方法。方法将携带vp3基因的质粒通过多聚左旋赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)与该受体的天然配体脱唾液酸粘蛋白(asialoorosomucoid,Asor)结合,获得Asor-PLL-vp3复合物;通过体外转染、放射性同位素标记检测和动物实验鉴定该复合物的肝细胞靶向性。结果 成功制备了较纯的可溶性的蛋白-核酸复合物;体内外实验结果表明Asor-PLL-vp3复合物具有良好的肝细胞靶向性。结论通过制备Asor-PLL-vp3复合物,利用ASGPR介导实现了vp3的肝细胞靶向性基因转移,证实了该复合物具有体内靶向性治疗肝癌的可行性。
- 孙军王宇哲屈伸彭冬君宗义强
- 关键词：VP3基因靶向性治疗肝癌
- 鸡贫血病毒vp3基因体内抑瘤效应的实验研究被引量：9
- 2003年
- 目的 观察鸡贫血病毒 ( chicken anem ia virus,CAV) vp3基因的体内抑瘤效应。方法 分别将 pc DNA- vp3(含 vp3基因的真核表达载体 )、pc DNA3 (空载体 )和小鼠腹水型肝癌细胞株 H2 2混合后 ,接种于 BAL B/ c小鼠皮下。几天后 ,处死动物 ,取肿瘤组织称重 ,比较试验组和对照组瘤重差异 ,确定 vp3基因的抑瘤效应。TU NEL 法鉴定 vp3在体内诱导肿瘤细胞死亡的方式。结果 注射 vp3基因的试验组肿瘤生长率明显低于注射空载体的对照组。TUNEL 试验的结果也表明 ,鸡贫血病毒 VP3蛋白在体内以凋亡方式诱导肿瘤细胞死亡。结论 预示
- 田俊王宇哲申志发宗义强屈伸
- 关键词：鸡贫血病毒VP3基因细胞凋亡
