国家自然科学基金(30340067)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 相关作者：汪道文蒋建刚付向宁沈桂芬王家宁更多>>
- 相关机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 环氧化二十碳三烯甘油酸对肿瘤细胞增殖的影响被引量：3
- 2008年
- 背景与目的:环氧化二十碳三烯甘油酸(EETs)由细胞色素P450(CYP)表氧化酶从花生四烯酸合成而来,研究发现,CYP表氧化酶在癌组织中明显高表达,而癌旁正常组织中几乎不表达,并且证实CYP表氧化酶及其代谢产物可能与肿瘤的发生、发展存在密切关系。本研究目的在于研究EETs对肿瘤细胞的促增殖作用及其相关的机制。方法:分别以不同浓度的EETs(8,9-EET、11,12-EET和14,15-EET)作用Tca-8113、A549、Ncl-H446和HepG2肿瘤细胞12、24、48h和72h后,MTT法检测细胞增殖情况。流式细胞仪检测外源性EETs对Tca-8113细胞周期的影响。用选择性抑制剂来阻断细胞增殖的MAPK、PI3K/Akt和PKC细胞信号转导通路,并用Westernblot法检测PI3K/Akt和ERK1/2总蛋白水平和磷酸化水平。结果:与对照组和溶媒组比较,EETs可明显促进肿瘤细胞的生长,并呈明显的浓度依赖性和时间依赖性(P<0.01)。流式细胞仪分析显示,EETs处理后的肿瘤细胞在S-G2/M期的细胞数增多。11,12-EET处理Tca-8113细胞后S期和G2/M期细胞[(49.7±7.5)%vs.(21.0±5.3)%]较对照组明显增多(17.2±9.7)%vs.(4.9±7.3)%],差异有统计学意义(P<0.01)。用EETs培养后肿瘤细胞的MAPK和Akt磷酸化水平显著增加,而且其抑制剂能够阻断EETs诱导的细胞增殖作用。结论:EETs具有促进肿瘤细胞增殖的作用,MAPK和PI3K/Akt细胞转导通路在此过程中起重要作用。
- 沈桂芬蒋建刚付向宁汪道文
- 关键词：药理学肿瘤细胞信号转导通路
- 细胞色素P450表氧化酶对人舌鳞癌细胞Tca-8113裸鼠皮下移植瘤生长的影响
- 2009年
- 目的:研究细胞色素表氧化酶对在体肿瘤生长的影响。方法:将转染rAAV-CYP2J2、rAAV-CYPF87V、rAAV-antiCYP2J2和rAAV-GFP的Tca-8113细胞,分别接种至裸鼠皮下,观察皮下移植瘤的生长情况,并用免疫组织化学染色分析移植瘤细胞PCNA和CD31分子的表达情况。结果:转染rAAV-CYP2J2、rAAV-CYPF87V明显促进裸鼠皮下移植瘤的生长,并且使移植瘤出现时间(分别为5.8天和6.0天)明显较对照组和转染rAAV-GFP(分别为8.4天和8.6天)短;而转染反义rAAV-CYP2J2组移植瘤生长缓慢,出现时间也明显延长(约9.75天)。免疫组化结果显示,rAAV-CYP2J2、、rAAV-CYPF87V明显促进移植瘤细胞PCNA和CD31的表达,移植瘤微血管密度明显增加。结论:CYP表氧化酶能明显促进在体肿瘤的生长,其机制可能与促进肿瘤血管生成密切相关。
- 蒋建刚沈桂芬宁耀贵汪道文
- 关键词：细胞色素P450表氧化酶微血管密度
- 花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶代谢产物EET促进血管生成的研究被引量：8
- 2005年
- 目的研究花生四烯酸细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)表氧化酶代谢产物表氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acid,EET)对牛主动脉内皮细胞(bovine endothelial cells,BAEC)、对血管生成的影响及其机制。方法分离BAEC培养,给予外源性EET刺激、重组腺相关病毒介导的各种CYP表氧化酶(CYP2J2,CYP2C11,CYPF87V)转染后,采用细胞计数、噻唑蓝比色法检测细胞增殖改变,用流式细胞仪检测对细胞增殖周期的影响,同时检测细胞趋化移行的改变,比较对Matrigel中毛细血管样结构形成的影响,观察表氧化酶过度表达对鸡胚尿囊绒毛膜血管生成和大鼠缺血后肢毛细血管生成的影响。结果各种EET刺激或表氧化酶病毒转染均显著促进BAEC的增殖、趋化和移行,并使Matrigel中毛细血管样结构的形成明显增加,且EET呈剂量依赖性效应,而合用一氧化氮合酶抑制剂、丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)抑制剂或磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)抑制剂均可显著抑制上述效应,另外表氧化酶病毒转染尚能明显促进CAM小血管和大鼠缺血后肢毛细血管的生成。结论花生四烯酸细胞色素P450(CYP)表氧化酶及其代谢产物EET可显著促进血管的生成,可改善局部组织的缺血,其作用由MAKP和PI3K介导,部分效应由其对一氧化氮的上调作用介导。
- 王炎王家宁刘珍君魏欣肖啸汪道文
- 关键词：血管生成因子花生四烯酸血管生成细胞色素代谢产物EET
- 细胞色素P450花生四烯酸表氧化酶在人肿瘤组织及肿瘤细胞系中的特异性表达被引量：2
- 2009年
- 背景与目的:细胞色素P450花生四烯酸表氧化酶(cytochrome P450 arachidonic acid epoxygenase 2J2,CYP2J2)作为花生四烯酸的新型代谢途径,在人体中的生物学及病理生理学意义还远未被认识和阐明。本研究主要探讨CYP2J2基因在人类肿瘤组织及肿瘤细胞系中的表达及其意义。方法:采用RT-PCR、Western blot和免疫组化法检测CYP2J2在130例不同类型的人癌组织及相应的癌旁正常组织,4例炎性假瘤组织以及8种常见人源肿瘤细胞系和两种非肿瘤细胞系中的表达情况。结果:CYP2J2在78%(101例)的癌组织中特异性高表达,而癌旁正常组织未能检测到CYP2J2表达,而且CYP2J2 mRNA和蛋白表达水平呈高度的相关性(r=0.613,P<0.01)。同样,免疫组化结果分析发现78%肿瘤组织中有CYP2J2表达,而癌旁正常组织及4例炎性假瘤均阴性。此外还发现CYP2J2主要在肿瘤细胞中表达,而周围的炎性细胞及间质组织均无CYP2J2表达。8种肿瘤细胞中均高表达CYP2J2,而非肿瘤细胞系则无CYP2J2表达。结论:CYP2J2在肿瘤细胞中选择性高表达,CYP2J2可能是肿瘤发生发展的一个标志物。
- 蒋建刚付向宁陈春莲汪道文
- 关键词：细胞色素基因表达肿瘤
