广东省科技攻关计划(2004A30404002)
- 作品数：5 被引量：46H指数：4
- 相关作者：孙国萍任随周岑英华郭俊王亚丽更多>>
- 相关机构：广东省微生物研究所中国科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省科技攻关计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学更多>>
- 细菌脱色酶TpmD对三苯基甲烷类染料脱色的酶学特性研究被引量：18
- 2006年
- 从嗜水气单胞菌DN322中分离纯化出能够对三苯基甲烷类染料结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿进行有效脱色的脱色酶，命名为TpmD。该酶的亚基分子量为29．4kDa，等电点为5．6。该酶催化上述4种三苯基甲烷类染料脱色反应的适合温度为40～60℃，适合pH范围为5．5～9．0。动力学参数测定结果显示TpmD对结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿的Km值分别为24．3、40．6、54．2、68．5μmol^-1·L^-1，Vmax值分别为19．6、74．1、82．8、115．6μmol^-1·L^-1。结晶紫为该酶的最适反应底物。TpmD催化的脱色反应依懒于NADH／NADPH及分子氧的存在，显示该酶属于NADH／NADPH依赖型的氧化酶类。这是国内外首次关于细菌中三苯基甲烷类染料脱色酶酶学性质的描述。
- 任随周郭俊王亚丽岑英华孙国萍
- 关键词：脱色酶嗜水气单胞菌酶学特性
- 利用转座质粒plasposon构建荧光标记的脱色希瓦氏菌S12被引量：1
- 2007年
- 采用分子生物学手段将具有转座功能的自杀性质粒pTnMod-okm与荧光蛋白基因eyfp构建重组质粒pTE-okm。pTE-okm通过结合转移进入脱色希瓦氏菌S12中,质粒上的转座子元件转座到S12的染色体上,而质粒本身的窄宿主复制位点使其在S12中不能得到有效的复制而"自杀"。荧光显微镜下筛选表达荧光蛋白的脱色希瓦氏菌克隆,通过对其提取质粒确定pTE-okm已经在脱色希瓦氏菌中自杀。筛选得到生长速度未发生延迟、脱色能力不受影响的荧光标记菌株S12-40。标记的脱色希瓦氏菌在无抗生素压力的情况下培养,传代20次(8h/次)后在荧光显微镜下依然查看到荧光蛋白的表达。该菌株的构建为研究其生态学行为奠定了基础。
- 李光飞邓代永许枚英岑英华孙国萍
- 关键词：荧光蛋白
- 兼性厌氧苯胺降解菌的分离鉴定及其特性被引量：8
- 2006年
- 从处理印染废水的厌氧折流板反应器（ABR）系统中分离、纯化并筛选出l株能以苯胺为唯一碳氮源进行代谢的兼性厌氧苯胺降解菌株AN29．经过形态、生理生化特征试验和16SrDNA序列分析结果，鉴定菌株AN29为假单胞菌（Pseudomonas sp．），其特性为：降解苯胺的最适温度为37℃，降解苯胺合适的起始pH值为6．5～8．0，可以利用苯胺的最高浓度为4000mg／L，合适起始浓度为500～2000mg／L．
- 曾国驱任随周曹渭胡锦财林璐菁孙国萍
- 关键词：苯胺兼性厌氧生物降解
- 细菌脱色酶TpmD的酶学特性研究被引量：12
- 2006年
- 从嗜水气单胞菌DN322中分离纯化出能够对三苯基甲烷类染料结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿进行高效脱色的脱色酶,命名为TpmD。在测定TpmD分子量、等电点及对不同三苯基甲烷染料脱色的动力学参数、脱色过程对分子氧及NADH/NADPH具有依赖性的基础上,又进一步从黄素FAD/FMN对酶活力的影响、酶抑制剂、酶蛋白N-末端测序及酶溶液的特征吸收光谱等方面对TpmD的酶学本质进行了分析。结果表明,TpmD不含核黄素,其脱色活性也不因加入FAD或FMN而提高。TpmD的N-末端氨基酸序列与多种氧化还原酶具有同源性。甲吡酮及维生素C(Vc)对TpmD的脱色活性具有明显的抑制作用。TpmD酶蛋白的溶液在408nm处有一特征吸收峰,但在连二亚硫酸钠的还原条件下通入CO气体后,该酶却不具有P450酶在450nm处的特征吸收峰。上述结果显示脱色酶TpmD是一种新的氧化酶。
- 任随周郭俊王亚丽岑英华孙国萍
- 关键词：脱色酶酶学特性
- 2株苯胺降解菌的分离鉴定及其降解特性研究被引量：16
- 2006年
- 从处理印染废水的活性污泥中分离得到2株苯胺降解菌,从菌落、细胞形态、生理生化及16S rRNA基因扩增测序等方面对2株菌进行了鉴定,并比较分析2株菌在好氧与缺氧条件下的苯胺降解、偶氮染料脱色及苯胺脱氨氧化酶基因tdnQ和黄素还原酶基因(fre)的携带情况.结果表明,2株菌属于Pseudomonas属和Shewanella属,分别命名为Pseudomonassp.AN30和Shewanellasp.DN425.AN30菌株在振荡好氧条件下72h内对250mg/L苯胺的降解率为96.1%,DN425菌株的降解率为13.8%;在静置缺氧条件下AN30菌株的苯胺降解率为39.6%,DN425菌株的降解率仅为8.6%.DN425菌株在静置缺氧条件下4h内可将初始浓度为50 mg/L的偶氮染料酸性大红彻底脱色,而AN30菌株对酸性大红不具有脱色能力.以总DNA为模板,分别用tdnQ基因和fre基因特异性引物进行扩增,2株菌均能扩增出大小分别为380bp和630bp左右的目标条带,显示2菌株均携带有苯胺脱氨氧化酶基因和黄素还原酶基因.
- 任随周郭俊曾国驱岑英华孙国萍
- 关键词：苯胺降解菌脱色
