国家自然科学基金(30973241)
- 作品数：3 被引量：10H指数：3
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- IL-6／STAT3信号活化在川崎病Th17／Tr细胞失衡中的作用被引量：5
- 2011年
- 目的探讨IL-6／STAT3信号在川崎病（KD）Th17／Tr细胞失衡中的作用。方法急性期KD患儿48例，正常同年龄对照组18例，KD患儿于静脉注射丙种球蛋白前直接取血备检。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆IL-6蛋白浓度；荧光定量PCR检测CD4^＋T细胞IL-17A、IL．17F、RORγt、Foxp3、SOCSl、SOCS3等基因mRNA表达；流式细胞术检测外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Tr）的比例和CD4^＋T细胞磷酸化STAT3（pSTAT3）蛋白平均荧光强度（MFI）；甲基化特异性定量PCR（MethySYBRPCR）检测CD4^＋T细胞SOCSl基因外显子2、SOCS3基因5^＋端非翻译区（5＇-UTR）3个可能的STAT3结合位点CpG岛甲基化水平。结果（1）急性期KD患儿血浆IL-6浓度、CD4^＋T细胞pSTAT3MFI水平显著上调[IL-6：（54．02±20．58）pg／mlvs（8．72±2．06）pg／ml，P〈0．05；pSTAT3MFI：（55．41＋15．08）VS（9．35＋3．76），P〈0．05]。其中KD合并冠脉损伤组（KD-CAL^＋）上述二项指标均明显高于无冠脉损伤组（KD—CAL一）[IL-6：（84．76±29．35）pg／mlVS（38．65±13．76）pg／ml，P〈0．05；pSTAT3MFIt（72．36＋16．81）VS（46．93±13．57），P〈0．05]。（2）急性期KD患儿CD4^＋T细胞IL-17A／F、RORTtmRNA表达水平显著上调（P〈0．05），CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr细胞比例及Foxp3mRNA表达明显低于正常对照组（P〈0．05），其中KD．CAL^＋组IL一17A／F、ROR,／tmRNA表达水平明显高于KD—CAL一组（P〈0．05），roxp3mRNA表达明显低于KD—CAL一组（P〈0．05）。（3）急性期KD患儿CD4^＋T细胞SOCSl和SOCS3mRNA水平显著高于同年龄对照组（P〈0．05），其中KD-CAL^＋组SOCSl和SOCS3mRNA表达低于KD—CAL-组（P〈0．05）；正常对照组SOCSl基因外显子2、SOCS3基因5^＋-UTR区第3个STAT3结合位点的CpG岛完全去甲基化，急性期KD患儿呈低甲基化状态（P〈0．05），其中KD-CAL^＋组SOCSl基因外显子2、SOCS3基因5^＋-
- 王国兵李成荣杨军温鹏强贾实磊
- 关键词：SOCS3黏膜皮肤淋巴结综合征TH17
- SOCS1和SOCS3低甲基化对川崎病Th1／Th2细胞失衡的影响被引量：4
- 2010年
- 目的 探讨SOCS1和SOCS3低甲基化对川崎病Th1/Th2细胞失衡的影响.方法 急性期川崎病患儿36例,健康同年龄对照组16名.酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆白细胞介素（IL）-6蛋白浓度;实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测CD4＋T细胞SOCS1、SOCS3、T-bet、干扰素（IFN）-γ、GATA3、IL-4基因mRNA表达;流式细胞术检测外周血Th1/Th2细胞比例和CD4＋T细胞磷酸化STAT3（pSTAT3）蛋白平均荧光强度（MFI）;甲基化特异性定量PCR（MethySYBR PCR）检测CD4＋T细胞SOCSl基因外显子2、SOCS3基因5＇端非翻译区（5＇-UTR）3个可能的STAT3结合位点CpG岛甲基化水平.采用t检验进行统计分析.结果 ①急性期川崎病患儿血浆IL-6浓度[分别为（51.8±16.3）pg/ml和（8.6±2.0）pg/ml]、CD4＋T细胞pSTAT3 MH水平[分别为（52±14）和（10±4）]显著上调（P＜0.05）.其中川崎病合并冠状动脉损伤组（川崎病-CAL＋）IL-6和pSTAT3 MFI水平均明显高于无冠状动脉损伤组[IL-6为（87.2±27.4）pg/ml与（36.2±12.8）pg/ml,P＜0.05;pSTAT3 MFI为（75±15）和（42±11）,P＜0.05].②急性期川崎病患儿Th1、Th2细胞比例及相关因子（T-bet、IFN-γ、GATA3和IL-4）表达明显增高（P＜0.05）,Th1/Th2比值低于健康对照组（P＜0.05）.其中川崎病-CAL＋组Th1、Th2细胞比例及相关因子表达水平高于川崎病-GAL-组（P＜0.05）,而Th1/Th2比值则略低于后者（P＜0.05）.③急性期川崎病患儿CD4＋T细胞SOCS1和SOCS3 mRNA水平显著高于同年龄对照组（P＜0.05）,其中川崎病-CAL＋组 SOCS1和SOCS3 mRNA表达低于川崎病-CAL-组（P＜0.05）;健康对照组SOCS1基因外显子2、SOCS3基因5＇-UTR区第3个STAT3结合位点的CpG岛完全去甲基化,急性期川崎病患儿呈低甲基化状态（P＜0.05）,其中川崎病-CAL＋组去甲基化水平明显低于川崎病-CAL组（P＜0.05）;各组SOCS3基因5＇-UTR区第1、2个STAT3结合位点CpG岛均处于完全去甲基化状态（P
- 王国兵李成荣杨军温鹏强贾实磊
- 关键词：黏膜皮肤淋巴结综合征甲基化SOCS1SOCS3
- 急性期川崎病Foxp3基因甲基化改变及意义初探被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨急性期川崎病（KD）Foxp3基因甲基化状态及其在KD免疫发病机制中的作用.方法 急性期KD患儿30例,正常同年龄对照组18例,KD患儿分别于静脉丙种球蛋白（IVIG）治疗前后直接取血备检.甲基化特异性定量PCR（MSQP）检测CD4＋T细胞Foxp3基因启动子、调节性T细胞（Tr）特异性甲基化区（TSDR）CpG岛甲基化状态;流式细胞术检测外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Tr的比例;荧光定量PCR检测CD4＋T细胞Foxp3、CTLA4、GITR、LAG3、CCR8、UBD、LGALS3等基因mRNA表达.结果 （1）急性期KD患儿CD4＋T细胞Foxp3基因启动子CpG岛非甲基化水平明显低于同年龄对照组（P＜0.01）,经IVIG治疗后明显升高（P＜0.01）;TSDR区CpG岛非甲基化水平各组间差异无统计学意义（P＞0.05）;（2）急性期KD患儿CD4＋CD25＋Foxp3＋Tr细胞比例及CD4＋T细胞Foxp3 mRNA表达水平明显低于正常对照组（P＜0.01）,且与Foxp3基因启动子CpG岛非甲基化水平呈正相关（CD4＋CD25＋Foxp3＋Tr：r=0.76,P＜0.01;Foxp3：r=0.89,P＜0.01）,IVIG治疗后显著上升（P＜0.01）;（3）急性期KD患儿CD4＋CD25＋Foxp3＋Tr细胞相关因子CTLA4、GITR、LAG3和CCR8等基因mRNA水平显著降低（P＜0.01）,IVIG治疗后均有不同程度的恢复（P＜0.01）;Foxp3依赖性分子UBD和LGALS3表达水平亦低于正常对照组（P＜0.01）,IVIG治疗后基本恢复至正常水平（P＜0.01）.结论 急性期KD患儿Foxp3基因启动子非甲基化水平低下可能与KD免疫调节功能紊乱有关.
- 王国兵李成荣杨军温鹏强贾实磊
- 关键词：川崎病FOXP3DNA甲基化CD4+CD25+
