国家自然科学基金(30973252)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：马景学温晓英刘丽娅高彦军安建斌更多>>
- 相关机构：河北医科大学第二医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 兔眼与猪眼视网膜色素上皮细胞分离及培养方法的对比被引量：5
- 2010年
- 目的分别对兔眼及猪眼视网膜色素上皮（RPE）细胞进行体外分离、培养和鉴定，探讨二者的异同点及注意事项。方法对有色兔眼和猪眼的RPE细胞采用胰蛋白酶消化法进行分离、培养和传代，取第4代细胞用于实验。免疫细胞化学染色对传代的细胞进行鉴定。光学显微镜下观察并比较培养的2种动物来源RPE细胞的形态、特征，并对2种动物来源的RPE细胞的培养过程进行比较。结果2种动物来源的RPE细胞分离方法的不同与各自眼球的解剖结构相关，主要体现在消化过程，猪眼RPE细胞1次消化即可分离，兔眼RPE细胞需2次消化得到。原代猪眼RPE细胞24h内贴壁较兔眼48～72h贴壁时间早。培养早期细胞生长活跃，随传代次数增加活力下降，色素颗粒减少。免疫细胞化学染色提示细胞角蛋白（AE1／AE3）表达阳性。结论2种动物来源的RPE细胞均可通过胰蛋白酶消化法分离，获得的RPE细胞数量多，培养成功率高。猪眼RPE细胞的分离培养更为容易。4代以内的RPE细胞适合于实验研究。
- 刘丽娅马景学高彦军安建斌温晓英
- 关键词：视网膜色素上皮细胞细胞培养
- 姜黄素干预人视网膜色素上皮细胞钙离子信号的改变与整合素基因表达的探讨分析被引量：1
- 2013年
- 目的探讨视网膜色素上皮细胞(RPE)的钙离子与整合素基因表达的相关性。方法人RPE细胞经分离培养,免疫细胞化学鉴定后,传至第4～6代;对各组RPE细胞进行5μmol/L Fluo-3负载30 min,姜黄素分别以0.9375、1.8750、3.7500、7.5000、15.0000 mg/L浓度干预人RPE细胞,利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)测定各组RPE细胞内早期钙离子的变化。利用MTT法测定不同浓度的姜黄素干预人RPE细胞48 h后的IC50,并观察相应的形态学变化。用Real-Time PCR测定姜黄素干预后的整合素基因的表达。结果 LSCM检测结果:空白对照组、0.9375、1.8750、3.7500、7.5000、15.0000 mg/L姜黄素组RPE细胞内均有钙荧光。空白对照组钙荧光强度明显低于姜黄素各组,且差异有统计学意义(P<0.05),对照组基因表达量与整合素α4和整合素β5呈正效应,与整合素α3和整合素α5呈负效应。结论体外培养的人RPE细胞经不同浓度姜黄素干预后,较空白对照组早期细胞内钙离子荧光强度明显增加,且有显著性差异。当细胞受到姜黄素外界信号刺激时,细胞内钙离子浓度能迅速增加,继而调节整合素的活性,继而引起细胞的生物学效应。因此,姜黄素通过调节细胞内的信号传导,可能成为治疗人眼疾,如增殖性玻璃体视网膜病变的一种有效物质。
- 杜颖华叶存喜马景学韩瑶张斌包永琴郝玉华
- 关键词：姜黄素钙离子视网膜色素上皮细胞整合素
