广东省自然科学基金(10151018201000021)
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
- 相关作者：廖卫平石奕武于美娟刘超秦兵更多>>
- 相关机构：广州医学院第二附属医院广东省人民医院广东省医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 全面性癫痫伴热性惊厥附加症GABRG2基因突变的筛查
- 2012年
- 目的:筛查全面性癫痫伴热性惊厥附加症(GEFS+)患者的GABRG2基因,并探讨GEFS+与GABRG2基因的关系。方法:收集49例患者及110例正常对照组血样,应用变性高效液相色谱技术对GABRG2基因的10个编码外显子及与mRNA剪接有关的内含子进行筛查,对发现异常洗脱峰者进行测序。结果:未发现GABRG2基因突变,但发现1个单核苷酸多态性(SNP)位点:Exon2-89T>A(rs2284782)。这个SNP位点在两组中基因型和等位基因频率的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GABRG2基因突变可能不是GEFS+患者主要的致病原因,SNP(rs2284782)在患者与正常对照者中分布无明显差异。
- 秦兵刘超朱其详于美娟石奕武廖卫平
- 关键词：癫痫突变单核苷酸多态性
- 癫痫伴热性惊厥附加症患者GABRG2基因内含子突变的体外剪接分析被引量：1
- 2011年
- 目的筛查癫痫伴热性惊厥附加症（EFS＋）患者的GABRG2基因，并对内含子突变进行体外剪接分析。方法收集EFS＋患者血样，应用PCR方法扩增GABRG2基因的9个编码外显子及与mRNA剪接有关的内含子，测序杂合峰的位点，并与110例正常人进行比对。将GABRG2基因第7、8和9外显子及两端部分内含子的PCR产物克隆到pTARGET真核表达载体，构建pTARGET-Exon-7-8-9迷你基因及其Exon8＋45C〉T突变体。野生型与Exon8＋45C〉T突变体分别转染到HEK293细胞，提取RNA进行RT-PCR检测。结果未发现GABRG2基因编码区突变，但在内含子发现1个突变：Exon8＋45C〉T。野生型与Exon8＋45C〉T突变体剪接后的RT-PCR产物大小都为522bp。结论GABRG2基因突变可能不是EFS＋患者主要的致病原因，Exon8＋45C〉T突变不影响GABRG2基因的剪接。
- 刘超秦兵于美娟石奕武廖卫平
- 关键词：癫痫DNA突变分析剪接
- In-Fusion技术构建Ⅰ型钠通道与红色荧光蛋白共表达载体及其突变载体被引量：7
- 2011年
- 目的:构建Ⅰ型钠通道(NaV1.1)与红色荧光蛋白(DsRed)共表达载体及其突变载体。方法:利用In-Fusion技术将SCN1A基因亚克隆到DsRed真核细胞表达载体(pCMV-IRES-DsRed)。限制性内切酶对载体进行酶切并回收线性载体片段,PCR扩增SCN1A基因(与线性载体对应两端有15个相同碱基),In-Fusion技术进行融合即得到pCMV-SCN1A-IRES-DsRed。将其转染HEK293T细胞,Western blot检测NaV1.1的表达。定点诱变试剂盒对其进行定点诱变。结果:成功构建NaV1.1与DsRed共表达载体,SCN1A基因所编码的第1623位密码子由谷氨酸(Glu)突变为丙氨酸(Ala)。结论:NaV1.1与DsRed共表达载体及其突变载体的构建成功,为进一步研究该突变位点导致NaV1.1功能的改变奠定了基础。
- 刘超汤斌曾杨于美娟石奕武廖卫平
- 关键词：钠通道红色荧光蛋白诱变SCN1A癫痫
