教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-05-0130)
- 作品数：11 被引量：74H指数：5
- 相关作者：江正强李里特闫巧娟杨绍青李道义更多>>
- 相关机构：中国农业大学中国农业科学院饲料研究所更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 嗜热拟青霉木糖苷酶的性质及其与木聚糖酶的协同作用被引量：6
- 2008年
- 嗜热拟青霉(Paecilomyces thermophila)J18利用玉米芯能产胞外木糖苷酶,通过(NH_4)_2SO_4沉淀、DEAE-52离子交换层析及Q-琼脂糖凝肢-FF(QSFF)离子交换层析从上清液纯化得到了电泳纯的木糖苷酶,纯化倍数为31.9倍,回收率为2.27%。SDS-PAG E及Superdex-75凝胶过滤层析测定木糖苷酶的分子量分别为53.5 ku和51.8 ku。该酶最适温度及pH分别为55℃和pH 6.5。木糖苷酶能够水解木二糖和低聚木糖但不能水解木聚糖,水解低聚木糖的相对速率随聚合度增加而增加。该酶对木糖的抑制常数Ki值为139 mmol/L,具有很高的木糖耐受性。木糖苷酶与内源木聚糖酶一起水解木聚糖产生更多的还原糖,表现出协同作用。
- 江正强杨绍青朱会芳王岚
- 嗜热棉毛菌W205固体发酵产脂肪酶条件的优化被引量：3
- 2008年
- 以嗜热棉毛菌W205为出发菌株,研究其固体发酵产脂肪酶条件。结果表明:豆粕粉为固体基质底物,干基质量(g)与营养盐溶液体积(mL)1∶3时的含水量为初始含水量,酵母提取物为单一氮源且添加量为干基的0.06 g/g,初始pH 8.0时,最利于产酶。此条件下发酵第5天获得最高脂肪酶比活性190.1 U/g。酶谱分析结果表明,该菌主要产一种分子质量约30 ku的脂肪酶。
- 赵金杨王瑞君江正强
- 关键词：脂肪酶固体发酵酶谱
- 重组海栖热袍菌极耐热甘露聚糖酶的纯化和性质研究被引量：5
- 2008年
- 研究了海栖热袍菌(Thermotoga maritima)MSB8甘露聚糖酶基因(TM_1227)的克隆、重组酶的纯化和性质。该基因全序列2010bp,编码669个氨基酸,分子量为76.827kD。根据氨基酸同源性分析,该β-甘露聚糖酶与Thermotogasp.RQ2来源的β-甘露聚糖酶(GenBank登录号ACB09927.1)同源性最高,为99%。重组转化子经IPTG诱导酶比活可达39.7U/mg蛋白。粗酶液经金属亲和层析,得到电泳纯甘露聚糖酶。以槐豆胶为底物时,该酶的最适反应温度和pH分别为95°C和pH8.0,85°C处理30min酶活保存50%以上,很有潜力用于高温、偏碱性的造纸工业。对椰子甘露聚糖和槐豆胶的主要水解产物是不同聚合度的甘露寡糖,几乎没有单糖生成,适合生产低聚甘露糖。
- 张敏江正强李里特
- 关键词：海栖热袍菌甘露聚糖酶
- 枯草芽孢杆菌胞外二氢硫辛酰胺脱氢酶的纯化被引量：2
- 2008年
- 采用弱阴离子树脂DEAE-52和蓝色琼脂糖凝胶FF层析对枯草芽孢杆菌产生的胞外二氢硫辛酰胺脱氢酶的粗酶液进行2步纯化,得到电泳纯的二氢硫辛酰胺脱氢酶,纯化倍数为59.7,收率为46.9%。通过SDS-PAGE法测得其亚基分子质量为64.6 ku,Superdex 75法测得其分子质量为67.5 ku,表明枯草芽孢杆菌WY34产胞外二氢硫辛酰胺脱氢酶为单亚基蛋白质。本研究采用的二氢硫辛酰胺脱氢酶的纯化方法,简便且收率较高。
- 武爱民江正强韦赟苏春元
- 关键词：枯草芽孢杆菌纯化
- 嗜热拟青霉固体发酵产木聚糖酶的纯化和性质被引量：6
- 2006年
- 研究一株新的嗜热拟青霉J18的固体发酵产木聚糖酶的纯化和性质。固体发酵的粗酶液经硫酸铵沉淀、凝胶过滤层析和离子交换层析得到了一种分子量约为26kDa的电泳纯木聚糖酶，酶活力回收率为33．5％，纯化了5．27倍。该木聚糖酶具有很好的温度和pH稳定性，在pH7．0～pH9．0下，600℃处理24h，酶活力能保存80％以上。该酶水解玉米芯木聚糖生成以木二糖、木三糖和木四糖为主的低聚木糖，薄层层析分析表明不合木糖，适合生产低聚木糖。
- 江正强杨绍青闫巧娟李里特程少博
- 关键词：木聚糖酶固体发酵稳定性低聚木糖
- 链霉菌D21产木聚糖酶的发酵条件研究被引量：8
- 2007年
- 研究了链霉菌D21产木聚糖酶发酵条件的优化。单因素优化试验结果表明,水不溶玉米芯木聚糖为最佳碳源和诱导物,牛肉蛋白胨为最佳氮源,最适pH值为6.0,最适培养温度40℃。在此条件下,培养4d木聚糖酶活力达到1128U/mL。
- 江正强邓伟翟倩李里特程少博
- 关键词：放线菌木聚糖酶玉米芯木聚糖发醇
- 嗜热拟青霉产胞外木糖苷酶发酵条件的优化被引量：5
- 2007年
- 嗜热拟青霉J18是由本实验室筛选并保存的拟青霉新种。该菌能够利用玉米芯为碳源、尿素为氮源液体发酵高产胞外β-木糖苷酶。单因素优化试验表明:5%的粒度为0.45mm～0.9mm的玉米芯、1%尿素、初始pH6.5、温度为45℃是最佳产酶培养条件。在优化后的条件下,培养5d产β-木糖苷酶的活力最高达3.15U/mL,比酶活为2.43U/mg。该菌所产的木聚糖酶和木糖苷酶协同作用可将桦木木聚糖完全降解成木糖,水解24h后,其水解液中还原糖含量比只加入电泳纯木聚糖酶的水解液提高了64%。
- 王岚江正强杨绍青
- 关键词：拟青霉Β-木糖苷酶液体发酵玉米芯尿素
- 链霉菌Z18产木聚糖酶的发酵条件被引量：14
- 2007年
- 为进一步研究木聚糖酶的纯化和性质,对本研究室新筛选出的一株高产木聚糖酶的链霉菌Z18的液态发酵条件进行了研究。结果表明:最佳碳源为1.5%(质量分数)的玉米芯水不溶性木聚糖,培养第5天其酶活性浓度达435.03 U/mL。不同来源木聚糖诱导产木聚糖酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳及酶谱分析结果表明,链霉菌Z18能够产生3种木聚糖酶,以22 ku的木聚糖酶为主;初始pH5.5、培养温度30℃时所得木聚糖酶活性最高。在优化后的培养基和培养条件下,第7天链霉菌Z18产木聚糖酶活性达到峰值,其活性浓度为755 U/mL,为目前国内报道链霉菌属最高产酶水平。
- 翟倩江正强闫巧娟邓伟
- 关键词：链霉菌木聚糖酶发酵条件
- 酵母菌发酵玉米皮酸水解液制备结晶L-阿拉伯糖的研究被引量：20
- 2007年
- 玉米皮是玉米淀粉工业的主要副产品,含有大量的阿拉伯木聚糖。本文研究了酵母菌发酵玉米皮酸水解液制备结晶L-阿拉伯糖的方法。玉米皮经稀硫酸水解后得到了以L-阿拉伯糖、木糖和葡萄糖为主要成分的水解液,碳酸钙中和后直接利用酵母菌WYS15-3发酵特异性除去糖液中的木糖和葡萄糖,再通过活性炭脱色、离子交换树脂脱离子、浓缩结晶等步骤,得到了L-阿拉伯糖晶体,得率为9．6%(以玉米皮干基计)。该法简单易行,适用于以玉米皮为原料工业化制各L-阿拉伯糖。
- 李道义闫巧娟江正强石波李里特
- 关键词：L-阿拉伯糖玉米皮酵母菌
- 海栖热袍菌耐高温β-甘露糖苷酶基因的克隆及表达被引量：3
- 2007年
- 以海栖热袍菌(Thermotoga maritima)MSB8基因组DNA为模板,克隆得到β-甘露糖苷酶基因(man2).测序分析表明,该基因全序列为2358bp,编码785个氨基酸,分子量约为92×103.根据蛋白质氨基酸的同源性分析,该β-甘露糖苷酶与新阿波罗栖热袍菌(Thermotoga neapolitana)Man2(accession No.AAK52304.1)的同源性最大,达到80%.将此基因连接至表达载体pET-28a(+)并转化到大肠杆菌BL21细胞中,经IPTG诱导,β-甘露糖苷酶活力达5.96U/mL.粗酶的温度稳定性分析表明,该酶的热稳定性好,90℃处理10min,活力回收率65%,具有重要的工业应用前景.
- 张敏关国华江正强李颖李里特
- 关键词：海栖热袍菌重组蛋白
