广东省自然科学基金(4009389)
- 作品数:1 被引量:7H指数:1
- 相关作者:李娟黄蓓晖赵莹张殿宝罗绍凯更多>>
- 相关机构:中山大学附属第一医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 沉默survivin基因以增加骨髓瘤细胞对阿霉素敏感性的研究被引量:7
- 2006年
- 背景与目的:Survivin是凋亡抑制蛋白家族成员之一,在多种恶性肿瘤中高表达,但在正常成人分化组织中无表达。其表达与多种肿瘤的预后及肿瘤对放、化疗的耐受有关。本研究采用RNA干扰技术下调survivin基因在人骨髓瘤细胞系KM3中的表达,观察其诱导KM3细胞凋亡的作用,及是否增加KM3细胞对阿霉素的敏感性。方法:针对survivinmRNA体外化学合成小干扰RNA(siRNA),采用脂质体介导转染KM3细胞,以RT-PCR和Westernblot方法检测转染后24h、48h和72hKM3细胞survivinmRNA和蛋白的表达,荧光显微镜观察干扰前后细胞的凋亡情况,细胞毒分析方法比较转染前后对阿霉素敏感性的变化。结果:转染survivinsiRNA后24h、48h和72h,与阴性对照组相比,KM3细胞survivinmRNA水平分别下调了(47.0±4.3)%、(81.4±6.2)%和(49.1±7.9)%,蛋白质表达下调了(39.6±3.8)%、(56.4±6.7)%和(68.2±5.1)%。荧光显微镜下可见转染survivinsiRNA48h后的KM3细胞,凋亡率为(28±7)%,明显高于转染阴性对照siRNA的细胞。转染后细胞对阿霉素的敏感性增加,IC50由(1.12±0.14)μmol/L下降至(0.31±0.03)μmol/L。结论:以siRNA下调survivin的表达可有效诱导KM3细胞凋亡,并增加其对阿霉素的敏感性。
- 李娟赵莹罗绍凯张殿宝黄蓓晖
- 关键词:骨髓瘤KM3细胞