国家自然科学基金(30860160)
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 相关作者：曾涛曾会才彭明陈汉清林妃更多>>
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- 香蕉枯萎病菌4号生理小种转化体系的优化研究
- 香蕉枯萎病是世界范围内香蕉种植区最为严重的病害之一,严重威胁和影响着香蕉产业的发展。本文针对香蕉枯萎病病原菌的4号生理小种,建立了农杆菌介导的转化体系,确定了影响转化效率主要因子的优化体系是:农杆菌在IM培养基诱导前农杆...
- 高剑肖苏生王文华曾涛曾会才
- 关键词：香蕉枯萎病T-DNA插入
- 文献传递
- 香蕉枯萎病菌4号生理小种致病性突变体△Focr4-1422生物学特性研究
- 2012年
- 为研究香蕉枯萎病菌4号生理小种致病性突变体相关致病基因的功能,研究了基因敲除子△Focr4-1422与野生型菌株193之间部分致病性相关的表型差异。结果表明,基因敲除子对巴西蕉的致病性减弱,荧光检测显示菌丝能够从根部扩散到根茎交界处的茎部。△Focr4-1422对细胞壁降解酶的抗性大大增强。基因敲除子△Focr4-1422和野生型193在相同的温度、pH值、光照条件和碳氮源培养基下的生长速率均没有达到极显著差异,两者的菌丝和孢子的致死温度也一致。
- 陈海洋曾涛陈汉清郭刚曾会才
- 关键词：香蕉枯萎病菌致病性测定生物学特征
- 香蕉枯萎病菌1号小种致病相关基因敲除突变体△Focr1-328的生物学特性研究
- 为明确香蕉枯萎病菌1号生理小种致病相关基因敲除后,突变体△Focr1-328与野生型菌株在生物学表型上的差异,通过观察敲除突变体与野生型菌株在PDA培养基上菌落形态、菌丝颜色、分生孢子及附着孢形态上的差异,比较其在不同碳...
- 唐改娟曾涛林妃曾会才彭明郭刚
- 关键词：香蕉枯萎病基因敲除生物学特性
- 文献传递
- 农杆菌介导的香蕉枯萎病菌4号生理小种高效遗传转化体系的建立及影响因子的优化
- 本文针对香蕉枯萎病菌4号生理小种这一危害极大的有害真菌,建立了农杆菌介导的该生理小种的转化体系,确定了影响转化效率主要因子的最佳条件分别是:农杆菌在IM培养基AS诱导前,农杆菌OD600为0.15,Focr4孢子浓度为1...
- 高剑肖苏生曾涛曾会才
- 关键词：香蕉枯萎病菌4号生理小种
- 文献传递
- 尖镰孢古巴专化型4号小种T-DNA插入突变体Focr4-1562及其基因敲除子的生物学表型研究被引量：8
- 2012年
- 尖镰孢古巴专化型4号小种Fusarium oxysporumf.sp.cubenserace4(Focr4)是引起毁灭性土传病害香蕉枯萎病的危害性最大的小种,至今其致病机理尚不清楚。对已获得的野生型菌株Focr4-193-6经基因T-DNA插入引起致病性严重减弱的突变体Focr4-1562及其插入失活基因的敲除子△Focr4-1562的生物学表型进行了研究。玻璃纸穿透试验、活体叶片接种及根部接种致病性测定的结果表明,插入突变体和敲除子不能穿透玻璃纸生长,叶片接种和根部接种未见有明显病斑和球茎维管束变褐症状;野生型菌株则能穿透玻璃纸生长,叶片接种部位表现明显症状,被接种根部和球茎的维管束表现变褐症状。T-DNA插入突变体Focr4-1562和其基因敲除子△Focr4-1562的致病性表型一致,初步鉴定为致病性严重减弱。营养生长及形态学观察结果表明,野生型、插入突变体及其敲除子的最适生长温度均在28℃,最适的生长pH值为7.0-8.0之间,插入突变体及其敲除子的孢子形态与野生型Focr4-193-6相比并没有显著的变化,但敲除子△Focr4-1562的产孢量降低,插入突变体及其敲除子对细胞壁降解酶的抗性大大增强,说明被敲除的致病相关基因与Focr4-193-6分生孢子产生及细胞壁的形成有关。
- 吴飞宏曾涛陈汉清曾会才彭明
- 关键词：香蕉枯萎病T-DNA基因敲除
- 尖镰孢古巴专化型1号生理小种致病相关基因敲除突变体△Focr1-328的生物学特性被引量：2
- 2012年
- 由尖镰孢古巴专化型1号生理小种Fusarium oxysporumf.sp.cubenserace1(Focr1)引起的香蕉枯萎病是粉蕉类香蕉品种(AAB)不能规模化种植的最主要因素,其致病机理至今尚不十分清楚。本实验室前期通过T-DNA插入获得Focr1致病性丧失突变体Focr1-328,从Focr1全基因组序列中定位了因T-DNA插入失活的基因,并从野生型菌株Focr1-N2中敲除了该致病相关基因,获得了敲除突变体△Focr1-328。为了明确该致病相关基因的生物学功能,通过活体叶片、活体根部、孢子悬浮液等接种方法对敲除突变体△Focr1-328的致病性进行了测定,研究了该突变体与野生型菌株Focr1-N2在PDA培养基上菌落、菌丝和分生孢子形态上的差异;在不同碳、氮源培养基上的生长速率及形态差异;在培养不同时间后菌体生物量、pH值、OD值的变化差异及玻璃纸穿透能力的差异等。致病性测定结果显示4种接种方法都未见△Focr1-328发病症状,表明其丧失了致病力;表型测定结果显示:在PDA培养基上,△Focr1-328的生长速率、分生孢子产量、分生孢子萌发率、培养不同时间的菌丝干重均明显低于野生型菌株;在不同培养时间的培养液中,△Focr1-328的pH值、OD值均极显著低于野生型菌株Focr1-N2;敲除突变体和野生型菌株在不同碳、氮源上生长差异显著,最适碳源分别为山梨醇和麦芽糖,最适氮源均为硝酸钠;突变体菌株不能穿透玻璃纸生长,而野生型可以。上述实验结果表明:T-DNA插入失活的致病相关基因与菌株的碳源利用、产酸调控及菌丝穿透能力有关。
- 唐改娟曾涛曾会才林妃郭刚彭明
- 关键词：香蕉枯萎病生物学特性
- 农杆菌介导的香蕉枯萎病菌4号生理小种转化体系的优化被引量：11
- 2009年
- 香蕉枯萎病是世界范围内香蕉种植区最为严重的病害之一,严重威胁和影响着香蕉产业的发展。本文针对香蕉枯萎病病原菌的4号生理小种,建立了农杆菌介导的转化体系,确定了影响转化效率主要因子的优化体系是:农杆菌在IM培养基诱导前农杆菌OD600为0.15、农杆菌经IM液体培养基诱导的时间为7h、乙酰丁香酮(AS)浓度为150μmol/L、Focr4孢子浓度为1×106个/mL、共培养时间为48h、培养温度为25℃、诱导培养基pH值为5.5。在此条件下,转化效率能达到700～800个转化子/106个香蕉枯萎病菌孢子。PCR验证表明外源的T-DNA已经成功随机地整合到该病原菌基因组中。目前,应用该转化体系已获得2300多个转化子,为后续克隆相关致病基因打下了良好基础。
- 高剑肖苏生王文华曾涛曾会才
- 关键词：香蕉枯萎病T-DNA插入
- 香蕉枯萎病菌1号生理小种遗传转化体系的建立被引量：3
- 2010年
- 利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的转化方法,建立香蕉枯萎病菌1号生理小种(Fusariumoxysporum f.sp cubense race 1)遗传转化体系,并对影响转化效率的因子进行优化,明确了高效转化的条件为:农杆菌OD600为0.15,AS诱导浓度为150μmol/L,诱导时间为7 h,Focr1-N2孢子浓度为1×106个/mL,潮霉素B筛选的浓度为150μg/mL,诱导培养基pH值为5.5,共培养温度为25℃,共培养时间为48 h为最佳条件。构建了包含1 200个突变体的突变体库,并对1 200个突变体进行了致病性测定,初步筛选出致病性丧失突变体20个,致病性显著减弱突变体18个,致病性严重增强突变体53个。
- 林妃曾涛曾会才
- 关键词：突变体
