国家自然科学基金(31200132)
- 作品数：4 被引量：27H指数：1
- 相关作者：周荣田新贵苏晓波樊晔廖小红更多>>
- 相关机构：广州医科大学广州呼吸疾病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人3型腺病毒纤突的原核表达及其免疫原性分析
- 2016年
- 目的克隆表达人3型腺病毒（HAdV-3）的纤毛蛋白纤突片段（knob）,分析其免疫原性,为腺病毒临床诊断试剂及新型疫苗的研发奠定基础。方法 PCR扩增knob基因片段,克隆到表达载体pGEX-4T-3中进行诱导表达,SDSPAGE电泳分析表达产物,包涵体溶解复性后亲和层析纯化融合蛋白,Western blot鉴定,纯化的蛋白免疫小鼠制备抗血清,间接ELISA法检测小鼠血清的效价,Western blot鉴定抗血清特异性。结果成功构建了重组原核表达质粒pGEX-Ad3 knob,其在大肠杆菌中高效表达并纯化重组knob融合蛋白,融合蛋白免疫小鼠抗血清效价高达10~7,Western Blot证实此抗血清可识别人3型腺病毒纤维蛋白。结论成功获得了重组HAdV-3 knob蛋白,其具有强免疫原性,可以作为研发人3型腺病毒入侵机制研究、诊断试剂及疫苗研发的原料。
- 蒋再学王芳田新贵朱蔚云苏晓波
- 关键词：多克隆抗体
- 1型登革病毒抗原表位嵌合人3型腺病毒六邻体重组病毒的构建及免疫学鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的构建六邻体嵌入1型登革病毒（DENVI）抗坂表位的人3型重组腺病毒，鉴定其抗原性。方法以人3型腺病毒骨架质粒pBRAd△E3GFP为模板，overlap PCR在六邻体高变区HVR1插入DENV1的抗原表位，突变的六邻体片段克隆到穿梭载体，酶切后与线性化的3型腺病毒骨架质粒pBRAd△E3GFP在大肠杆菌BJ5183同源重组，获得阳性重组腺病毒质粒pBRAd△E3GFP-DENV1。线性化后转染AD293细胞拯救重组腺病毒rAd△E3GFP-DENV1并大量培养。纯化后腺病毒免疫BALB／c小鼠，通过ELISA和Western blot检测小鼠的体液免疫应答。结果在人3型腺病毒六邻体成功插入DENV1抗坂表位并包装出重组腺病毒，ELISA和Westernblot结果显示小鼠免疫后能产生血清识别DENV1。结论成功构建六邻体HVR1嵌入DENV1抗原表位的重组腺病毒，为多价登革病毒疫苗的研究奠定了基础。
- 招穗珊周志超李潇樊晔廖小红周荣苏晓波
- 关键词：腺病毒高变区登革病毒抗原表位
- 高通量技术在病毒学研究中的应用被引量：1
- 2015年
- 病毒可以引起许多种不同的疾病,如常见的感冒,以及病毒性脑炎、肺炎、肝炎、肾炎、麻疹、脊髓灰质炎、狂犬病、艾滋病等疾病,也是老年性痴呆以及许多癌症（如宫颈癌等）的重要致病因子.近年更有SARS冠状病毒、H1N1、H7N9流感病毒等严重威胁公众健康的新型病毒出现[1].
- 田新贵周荣
- 关键词：高通量技术病毒学蛋白质组学
- 人腺病毒分型及分子进化研究进展被引量：25
- 2014年
- 人腺病毒（human adenovirus， HAdV）1953年首次分离自呼吸道感染的婴儿扁桃体腺。腺病毒可以感染多种黏膜组织，如胃肠道、呼吸道、泌尿生殖道及眼角结膜等，导致自限性的黏膜感染甚至严重的致死性感染。腺病毒感染还和肥胖症相关，部分型别腺病毒可以致瘤。腺病毒载体被广泛用于遗传、癌症和感染性疾病的预防和治疗研究，目前除了常用的5型腺病毒载体外，已有多种其他血清型腺病毒载体在研发中。近年来，越来越多新的HAdV型别被发现，目前HAdV已有68个基因组型别。病原体的进化是和宿主相互作用的复杂过程，病毒进化可能改变病毒的组织嗜性、传染性、产生新的疾病特征，腺病毒是DNA病毒分子进化研究的有用模型。对腺病毒进化的理解将有助于腺病毒感染暴发的预测、预防，有助于腺病毒作为基因治疗和疫苗载体应用的研究。本文就HAdV的进化研究和新型腺病毒的研究作一综述。
- 田新贵周荣
- 关键词：分子进化病毒分型呼吸道感染人腺病毒腺病毒载体基因治疗
